建立兔脑内血肿模型研究

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1、建立兔脑内血肿模型研究【摘要】目的建立稳定、可靠、重复性好的兔脑内血肿模型。方法利用兔不抗凝自身血注入脑基底节区形成血肿。通过高磁场强MR序列评价两种注射法（缓慢匀速注射法和快速注射法）的差异。并通过神经功能缺损评分判断血肿对机体的影响。结果MR显示缓慢匀速注射法可形成较稳定、形态规则的血肿，与快速注射法形成血肿大小比较差异有显著性（P<0.01）。神经功能评分可见缓慢匀速注射组得分(10.08±3.23)、快速注射组(15.32±2.48)，对照组未见明显神经功能异常，前两者差异有显著性（P<0.05）。结论利用缓慢匀速注射法、不抗凝自身血注

2、入兔脑基底节区可形成稳定、可靠、重复性好的脑内血肿模型。【关键词】兔脑内血肿磁共振动物实验　　【Abstract】ObjectiveTomakeareproduciblehemorrhagemodelinrabbitsbyinjectingautologousbloodsloethodsbyhighfieldMRscanning.Theneurologicdeficitscoreulaintracerebralhemorrhageingentlyinjection.Statisticsshoorrhagecouldbemadeorrhagemagicres

3、onanceimaginganimalexperiment　　临床上脑出血的发病率及病死率均较高，对其研究也在不断深入。脑出血除了占位效应外，血肿引起的脑水肿及继发性损伤已受到重视［１］。因此，建立稳定可靠、重复性好的脑内出血动物模型将对临床、病理研究及影像学诊断提供很大帮助。作者介绍家兔自身血缓慢匀速注射法及快速注射法制作脑出血模型，并对两种方法进行比较。　　1材料与方法　　1.1实验动物及分组　　2003年12月至2005年2月采用体重2000～2500g健康家兔30只（浙江大学医学院实验动物中心提供）。随机分成三组，每组10只。分为缓慢匀速注射组、快

4、速注射组及对照组。　　1.2模型制作方法　　(1)动物麻醉及穿刺定位：常温下给予家兔2.5％戊巴比妥钠，经耳缘静脉注射麻醉。麻醉成功后动物浅感觉消失，呼吸平稳。将动物固定于立体定向仪上（江湾Ⅱ型）。颅顶部脱毛、消毒。取兔眶上切迹后方11mm水平、正中矢状线旁开4.5mm处作为基底节区穿刺点。切开皮肤分离至骨膜，颅骨钻孔。(2)穿刺、注血：①缓慢匀速注血法：用1ml针筒在兔耳正中动脉抽血共500μl（不抗凝），立即经颅顶钻孔垂直穿刺入基底节区，深度11mm。穿刺到位后2min内缓慢匀速注入250μl自体血至基底节区形成血肿，注射完成后保留穿刺针8min，以防

5、止血液自针道反流。②快速注血法：穿刺到位后快速（半分钟以内）注入自体血以形成脑内血肿，注射完成后保留穿刺针8min，以防止血液自针道反流。③对照组：第1组5只动物只钻孔不穿刺；第2组5只动物只穿刺，但不注血。　　1.3MR扫描并测量血肿大小　　采用GESignaHorizonLX1.5T超导型磁共振机，相控振头线圈。扫描序列：T1aging(T1R扫描后放血处死，取脑固定于9％甲醛24h，以针道为中心，2mm层厚切片。常规石蜡包埋、HE染色。　　1.6统计学处理　　采用SPSS10.0软件，采用方差分析比较两种注射法血肿大小，采用t检验分析两组兔神经功能评

6、分差异。2结果　　2.1MR各序列扫描　　MR各序列扫描（图1）：T2*in时即可清楚显示基底节区血肿。缓慢匀速注射组形态较规则，大小较一致。快速注射组血肿形态欠规则、大小不一。T2WI上血肿呈稍高信号，边界欠清；T1WI上血肿呈等信号，边界不清。对照组未见明确血肿形成。在T2*WI序列上测量血肿体积（表1），体积计算按公式＝长×宽×厚度×1/2。表1两种注射法在T2*WI图像上所形成血肿体积测量值比较（略）　　2.2神经功能评分　　缓慢匀速注射组得分(10.08±3.23)，快速注射组(15.32±2.48)，对照组未见明显神经功能异常。　　2.3病理观

7、察　　24h缓慢匀速注射组均形成较规则血肿，HE染色高倍镜下见血肿周围可见大量小胶质细胞、中性粒细胞浸润，并见少量神经元坏死（图2）。快速注射组血肿形成不规则，其中4例破入侧脑室，3例形成硬膜下血肿。对照组未见明确血肿形成，其中5例穿刺者仅见针道周围少量出血。两种穿刺方法形成脑内血肿体积大小差异有显著性，F＝35.71，P<0.01。两种方法所导致神经功能缺损比较差异有显著性，t＝3.15，P<0.05。　　3讨论以往脑内出血实验研究以大鼠做模型较多见。由于大鼠体型较小，脑内血肿形成后测量及影像学评价较困难。家兔的基底节区较发达，穿刺定位简单、

8、准确。DelBigio［２］等曾报道用胶原酶注入鼠脑内形成脑血肿，