《磺胺类pptx页》ppt课件

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1、第十章磺胺类、硝基呋喃类兽药第一节磺胺类一、概述磺胺类药物（SAs）是人工合成的具有对氨基苯磺酰胺结构的一类抗菌药物的总称。药理作用：干扰细菌酶系统对对氨基苯甲酸(PA-BA）的利用，影响细胞核蛋白质的合成，从而抑制细菌的繁殖。一般为白色或黄色结晶粉末，无臭，基本无味。具有芳伯氨基和磺酸氨基，因而呈酸碱两性。SAs具有抗菌谱广、抗菌力强、吸收迅速完全和价廉易得等特点，因而广泛用在畜牧业和兽医临床上来预防和治疗畜禽细菌性疾病，兼有抗球虫活性。由于SAs在体内作用和代谢时间较长，通过任何途径摄入的磺胺都有可能在人体内蓄积。蓄积浓度超过一定值时对人体有害。短时间大剂量或长时间小剂量的

2、刺激可分别引起急性或慢性中毒，影响机体的泌尿、免疫系统，破坏肌肉、肾脏和甲状腺等组织，如诱发人的甲状腺癌等。人体中长期存在磺胺会导致许多细菌对SAs产生抗药性。国际食品法典委员会（CAC）和许多国家规定，食品中SAs总量以及磺胺二甲嘧啶等单个磺胺的最大残留限量（MRL）为0.1mg/kg。二、提取方法提取样品中SAs的方法很多，归纳起来主要有四大类：①单一溶剂提取，如丙酮、甲醇、乙腈、乙酸乙酯、二氯甲烷等；②混合溶剂提取，如二氯甲烷-丙酮、三氯甲烷-丙酮、三氯甲烷-乙酸乙酯、三氯甲烷-甲醇、乙腈-氯仿、丙酮-乙酸乙酯、氯仿-丙酮等；③酸、碱、缓冲溶液提取，如0.1mol/L、1.

3、0mol/L、3.0mol/L盐酸溶液，三氯乙酸-盐酸溶液，磷酸缓冲溶液，EDTA缓冲溶液；④酸或缓冲溶液加溶剂，如0.2％偏磷酸-甲醇、盐酸-甲醇、乙酸-丙酮、三氯甲烷-乙酸。三、净化方法液液分配由于SAs具有酸碱两性，使得液液萃取成为磺胺药净化的一种重要手段。将萃取液用正己烷萃取除去脂肪后蒸干，加入稀酸溶液溶解残渣，调节pH值，用二氯甲烷萃取，然后进行测定。该方法可以用于许多样品中多种磺胺残留的净化。当磺胺药从有机相向水相分配时，为获得满意的回收率，水相pH值的调节非常关键。磺胺药一般从有机相提取进入强酸或碱溶液。为了更好的净化，调节水相的pH值在5.1~5.6之间，分析物然

4、后被反提溶于二氯甲烷或乙酸乙酯。四、测定方法几十年来，人们对食品和饲料中SAs残留的检测进行了深入全面的研究。从早期的分光光度法（UV）、荧光法（FL）、薄层色谱法（TLC）、气相色谱法（GC）到20世纪80年代以来的液相色谱法（HPLC）、气相色谱-质谱法（GC-MS）、液相色谱-质谱法（HPLC-MS）。分析SAs的气相色谱法主要为气相色谱-电子捕获检测器法（GC-ECD）。HPLC法是目前可食性动物产品中磺胺类药物残留检测中应用最广泛的方法．早期研究通常使用正相HPLC。近十多年主要用反相HPLC法，磺胺药一般通过非极性反相色谱柱（十八烷基、辛烷基和苯基），柱子尺寸一般长1

5、5cm，内径4.6mm。其中要数十八烷基键合相硅胶柱的性能最为优良。磺胺药的HPLC检测通常使用紫外检测器、荧光检测器或电化学检测器。紫外检测器最为常用，应尽可能选取最大吸收波长并且干扰组分相应值较小的波长作为测定波长。在进行多残留检测时，选择波长还要保证各组分的响应因子之间差异不致太大。磺胺药一般均有较强的紫外吸收，无需衍生化即可直接进行液相色谱测定。检测波长一般为254~288nm。第二节硝基呋喃类一、概述硝基呋喃类药物是一类人工合成的广谱抗菌药，它主要包括呋喃唑酮、呋喃西林、吠喃它酮和呋喃妥因等。此类化合物具有相同的药效基团，是由呋喃核的5位引入硝基基团，而2位上引入不同的

6、取代基组成。硝基呋喃有非常好的抗菌作用，对大多数革兰阳性菌、革兰阴性菌、某些真菌和原虫有灭杀作用，曾经被广泛应用于治疗和预防由埃希菌和沙门菌引起的哺乳动物消化道疾病。研究表明，硝基呋喃类药物是一种诱导基因突变的有害物质，硝基呋喃及其代谢产物均可使实验动物发生癌变和基因突变。近年来发现其具有慢性毒性，可引起消化道反应，出于安全性考虑，欧盟已于1995年禁止在食用动物中使用硝基呋喃类药物。我国也于2002年颁布了禁止使用该类兽药的禁令。由于硝基呋喃类药物在动物体内代谢极快，半衰期不过几小时，所以待测组织中通常不太可能检出硝基呋喃原药残留，检测硝基呋喃类药物母体化合物已不能反映真实的用

7、药情况。由于组织中结合残留物的浓度可能非常低，需要采用高灵敏度的检测方法。此外这类药物属光敏物质，对太阳光特别敏感，因此操作必须在柔和的光线下进行。二、样品处理1.提取和衍生化1）溶剂提取在样品的提取步骤，要求能够将动物源性食品中的硝基呋喃残留物释放至溶液中，一般使用水和酸化的有机溶剂，以达到去除大部分蛋白质和萃取残留物的目的。2）水解和衍生化对于硝基呋喃代谢物的测定，鉴于其残留物主要以蛋白结合物形态存在，只有在适当的酸性条件下经水解过程，才能释放出游离代谢产物，而且因残留物的浓