油脂硫巴比妥酸价之测定

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1、油脂硫巴比妥酸價之測定第十一組組員：李巧琳２３號　　　謝羿如２５號　　　林昀靚０５號　　　梅婉如０１號（打字）油脂硫巴比妥酸價之測定一、實驗目的測定油脂氧化裂解產物丙二醛之含量作為油脂氧化後期的指標。二、實驗原理硫巴比妥酸價(TBA)測定原理為油脂氧化次級產物丙二醛(包括丙醛型產物)與TBA試劑反應產生紅色產物，可利用分光光度計測定532nm吸光值計算之。丙二醛和硫巴比妥酸之呈色反應原理如下：由於該反應不是丙二醛特有的反應，所以實驗進行時最好先經蒸餾去除雜質，餾出液再與TBA試劑作用。三、材料鹹鴨蛋熟蛋黃、四乙氧基丙

2、烷(TEP)鹽酸溶液、TBA試劑、分光光度計、0.1N鹽酸溶液、定量瓶、加蓋試管、燒杯、加熱板、蒸餾瓶、冷凝管、三角瓶、定量吸管、安全吸球。一、方法與步驟1.單數組取0.1g四乙氧基丙烷0、2、4MLMDA；雙數組取0.1g四乙氧基丙烷0、6、8MLMDA定容成50ML2.取3ML四乙氧基丙烷定容液+3MLTBA試劑放入加蓋試管混勻3.沸水浴30分，放冷4.用分光光度計測532nm吸光值5.在250ML三角錐形瓶放35MLRO水，以麥克筆作記號，再把水倒掉6.把鹹蛋黃5g放入500ML磨砂三角錐形瓶加0.1NHCL1

3、00ML架上裝置(瓶子裡要放沸石數顆、消泡劑2ML)7.以加熱板加熱到沸騰後，調面板顯示200-300℃，使泡沫不超過三分之二瓶高8.接收冷凝液35ML停止收集,定量到50ML9.之後再(2重覆)取兩個3ML+3MLTBA試劑放入加蓋試管混勻10.沸水浴30分，放冷11.用分光光度計測532nm吸光值計算公式丙二醛(μg/g)=aWsA:試樣溶液吸光值求出相當之丙二醛含量(μg)Ws:鹹蛋黃重(g)二、結果與討論自己組實驗結果1.蛋黃重量：5.1053g2.標準曲線繪製數據MAD02040測得第一次吸光值0.0050

4、.0390.058測得第二次吸光值0.0190.0950.125測得第三次吸光值0.0250.0820.124Sample二重覆0.3150.292全班數據組別吸光值標準曲線0 μg2 μg4μg6μg8 μg樣品平均MDA(μg/g)10.0200.0310.0700.15320.0080.2320.3090.2376.12030.0030.0140.0050.2496.08040.0130.2030.2580.1337.96050.0010.0330.0610.1235.24060.0260.1830.2210.

5、48370.0190.0350.0400.1653.77080.0170.0340.0460.14590.0340.0280.0370.3086.670100.0160.0750.1010.1463.380110.0250.0820.1240.3047.840120.0230.0810.1000.156130.0100.0260.0100.230平均值0.2185.883標準差0.1021.690借夜間部第五組和第十二組數據求MDA吸光值0 μg2 μg4μg6μg8 μg0.0090.1570.3140.4530.

6、608MDA(μg/g)7.843討論1.用分光光度計測532nm吸光值的時候，因第一次忘了背景校正（不過上一組校正過）怕值不準就想說在測一次，沒想到意外發現奇怪的情形，測出來的值忽然間飆高許多，覺得太詭異了又去測第三次，一樣高到不行，明明就同一台儀器測了三次卻測出不同的值2.原本以為是不是我們在儀器操作上面有出錯，亦或是實驗步驟上有失誤，為此去請教其他組的人儀器方面的操作流程和實驗步驟，根本沒有任何問題，但是其他組的數據也一樣的奇怪（例如第3.9.13組的吸光值0-4μg理論來說應該要越來越高，他們數值反倒變成一下

7、低一下高）3.苦無結果最後和老師討論才知道原來問題是出在藥品上，從這邊讓我們知道不管做甚麼實驗藥品最好是當天使用當天配4.從全班數據樣品的標準差來看明顯發現大部分的數值和其平均值之間差異很大，代表此次實驗並不準確1.因丙二醛含量的多寡為造成細胞膜損傷的因子，所以我們要了解鹹蛋黃含有多少丙二醛，最後借用夜間部第五組和第十二組數據求MDA值，Ｒ２為0.9997利用他們的數據測得鹹蛋黃中丙二醛的含量是7.843(μg/g)