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《人参皂苷rg1对体外培养胚胎神经干细胞增殖作用的论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、人参皂苷Rg1对体外培养胚胎神经干细胞增殖作用的论文【摘要】目的探讨人参皂苷rg1对体外培养胚胎神经干细胞增殖作用的影响。方法从孕16天sd大鼠胚胎脑组织中分离培养胚胎神经干细胞,免疫组化法进行神经干细胞的鉴定及增殖鉴定,采用稀释法筛选和检测人参皂苷rg1对体外培养胚胎神经干细胞增殖作用的影响。结果剂量筛选结果显示,人参皂苷rg1组(100、4、0.8μmol/l)神经球数明显增加。选定人参皂苷rg140、4、0.4μmol/l作为高、中、低剂量进行进一步实验研究,与对照组相比,人参皂苷rg1高、中、低剂量组神经球生成数目明显增加。结论人参皂苷rg1可以明显
2、增加神经球生成数目,具有促进胚胎神经干细胞体外增殖的作用。【关键词】人参皂苷rg1;胚胎神经干细胞;增殖 effectsofginsenosiderg1ontheproliferationofneuralstemcellsculturedinvitrozhouzhi-huan,,tianjin300193,china) abstract：objectivetoexploretheeffectofginsenosiderg1onproliferationofneuralstemcells(nscs)invitro.methodsthenscscultures
3、thebrainofembryonicday16sdrat.primitivenscsmunocytochemical(icc)stainingofnestin.theiccstainingofbrduiteddilutionmethod,theeffectofginsenosiderg1ontheproliferationofnscsol/l)ofginsenosiderg1couldpromotetheproliferationofnscsinvitro.paredbersofnerurospheresofthethreedosageginsenosid
4、erg1groups(40,4,0.4μmol/l)otetheproliferationofnscsinvitro. keybryonicneuralstemcells;proliferation 神经干细胞(neuralstemcell,nscs)具有自我更新能力和多向分化潜能[1],在神经系统疾病或损伤的修复中起着重要的作用。.研究调节nscs增殖分化的影响因素,诱导其增殖和定向分化为中枢神经系统损伤修复和退行性变的治疗带来了希望。因此,nscs的体外培养、增殖、诱导定向分化的研究已成为神经科学的一个研究热点。本研究对体外培养胎鼠nscs进行增殖鉴
5、定,观察了人参皂苷rg1对nscs增殖能力的影响,为开发对nscs具有保护效能的治疗药物、探索神经系统疾病新的治疗方法打下基础。 1材料与方法 1.1培养基、试剂及药物 dmem/f12(1∶1)培养基(lot.noatb31223,hyclone,u.s.a);hbss液(无钙离子和镁离子,lot.no01118197,lonza,u.s.a);b27添加物(lot.no311624,gibco/invitrogen);青霉素-链霉素溶液(双抗,100×)(每毫升含有10000u青霉素以及10mg链霉素,cat.nop4333,sigma);重组人碱
6、性成纤维细胞生长因子(bfgf,cat.nocyt-218,prospec-tany,israel);人表皮生长因子(egf)(lot.no3860501000,strathmannbiotec,germany);人参皂苷rg1、丹酚酸b(天津中一制药)。 1.2大鼠胎鼠神经干细胞原代培养及传代 取孕龄16天孕鼠,脱臼处死,75%乙醇浸泡消毒3～5min,无菌条件下打开腹腔,取出串珠状子宫,浸泡于冷hbss液中。取出胎鼠,置于另一含有冷hbss液的培养皿内,小心剥离外层骨膜,取出大脑皮质并去除软脑膜,冷hbss液漂洗2次后,转移至离心管。加入一定量冷hb
7、ss液后吹打至肉眼看不到明显组织块,使液体呈均匀悬浊状。过200目(70μm)筛网,1000r/min离心8min,弃上清,全培基(含2%b27、20μg/lbfgf、20μg/legf的dmem/f12,1%双抗)重悬,约3～4个胎鼠/75cm2的密度种入培养瓶中,37℃、5%co2培养箱中培养。每2～3d半量换液,收集培养液到50ml离心管中,静置3～5min,然后收集上清(管底约留1～2ml)转入另一离心管,500r/min离心3min。弃约一半上清液,补充入相同量的新鲜的全培基(含1%双抗,2%b27、20μg/lbfgf、20μg/legf的dme
8、m/f12),重悬种置。 约5～9d传代1次。50
