虾青素对小鼠急性乙醇肝损伤的保护作用

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1、虾青素对小鼠急性乙醇肝损伤的保护作用【摘要】目的：研究虾青素对乙醇所致小鼠急性化学性肝损伤的保护作用。方法：雄性小鼠60只，随机分为正常对照组、急性乙醇肝损伤模型组、联苯双酯阳性对照组(15mg/kg)以及虾青素低、中、高剂量组(10，15,20mg/kg)共6组。测定并比较各组小鼠肝脏系数，血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶（GSHpx）活性与丙二醛(MDA)含量；测定肝组织中SOD,GSHpx活性,MDA含量以及组织病理系数。结果：各剂量虾青素

2、均能升高急性乙醇肝损伤小鼠血清与肝组织中SOD,GSHpx活性(P<0.01)，降低血清ALT,AST活性(P<0.01)，降低血清与肝组织MDA含量(P<0.01)，并能不同程度地改善肝脏病理组织损伤。结论：虾青素对乙醇所致急性肝损伤具有预防性保护作用。【关键词】虾青素；乙醇肝损伤；抗氧化　　［Abstract］Objective:Tostudytheprotectiveeffectsofastaxanthinagainsttheacutealcoholliverinjuryinmiceandresear

3、chitspossiblemechanismforofferingscientificbasisofitshealthfunction.Methods：Randomlytodistribute60malemicestocontrolgroup,acutealcoholliverinjurymodelgroup,DDBgroup(15mg/kg)andloiddle,highdosegroupsofastaxanthin(10,15,20mg/kg),andtodetermineandpareliverindexbetalani

4、netransaminase(ALT),aspartatetransaminase(AST),superoxidedismutase(SOD),glutathioneperioxidase(GSHpx)activities,malondialdehyde(MDA)content,liverSOD,GSHpxactivities,MDAcontentandlivertissuepathologyindextobeassayed.Results：TreatmentandlivertissueSOD,GSHpxactiviti

5、es(P<0.01),decreaseserumALT,ASTlevels(P<0.01)andMDAcontentinlivertissue(P<0.01).Pathologyindexshoelioratetheliverinjuryindifferentdegree.Conclusion：Astaxanthinshoice.　　［Keyl丙酮-正己烷萃取。静置2h后，将脂溶性相收集（反复萃取直至水相成无色）。再利用减压旋转蒸发仪进行提取液浓缩处理。　　1.2.2虾青素提取液柱色谱纯化（1）装柱将活化好的

6、氧化铝装填于玻璃层析柱中，装填高度为12cm，用正己烷润湿。（2）洗脱分别取2ml虾青素提取液上柱，用50ml正己烷-丙酮淋洗，收集洗脱液。将洗脱液用氮气吹干制粉，装入充满氮气的玻璃瓶内，-70℃储存备用。　　1.3虾青素鉴定　　参照全反式虾青素标准品，根据其HPLC中保留时间和紫外可见吸收光谱的特征峰进行鉴定。得到的虾青素提取液经过过滤后用高效液相色谱分离。色谱柱：CCarotenoidS5(4.6mm×250mm)；流动相A：乙腈-甲醇（75∶25）;流动相B：MTBE；流动相A与B中分别加入0.05%三乙胺作为改性剂防

7、止虾青素降解；线性梯度洗脱：B在8min内由0%增加至55%；8～35minB维持55%；35～40minB由55%减至0%；流速1.0ml/min;检测波长：λ/nm=475；波长范围260～700nm；进样量20μl。收集后观察其光谱特征峰行为［3］。色谱和光谱分析结果表明实验所用灌胃物为全反式虾青素，纯度为95%。　　1.4动物实验　　1.4.1乙醇诱导动物急性肝损伤模型的建立将60只小鼠（购自中国军事医学科学院实验动物养殖中心，医动字第07231号）随机分组，设空白对照组、急性乙醇肝损伤模型组、联苯双酯组(15mg/k

8、g水溶混悬液)、虾青素高剂量(20mg/kg)、虾青素中剂量(15mg/kg)、虾青素低剂量组(10mg/kg)共6组，每组10只。按体质量20ml/kg用联苯双酯和不同剂量的虾青素分别给相应各组灌胃，每天1次。正常组与模型组每天灌服等体积的纯净水，连续14d。最后一次用药1