甲氧滴滴涕对小鼠卵母细胞体外成熟的影响的论文

《甲氧滴滴涕对小鼠卵母细胞体外成熟的影响的论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、甲氧滴滴涕对小鼠卵母细胞体外成熟的影响的论文【摘要】目的：观察甲氧滴滴涕(mxc)对小鼠卵母细胞体外成熟的影响.方法：实验组小鼠未成熟卵用7.25,14.5，29mg/lmxc不同浓度培养液培养；对照组小鼠未成熟卵直接用合成人输卵管培养液培养，两组培养时间均为24h.观察各组生发卵泡破裂(gvbd)和第一极体(pb1)的形成,出现pb1的卵母细胞视为核成熟.结果：培养24h时，卵母细胞gvbd发生率7.25mg/lmxc组为80.4%，14.5mg/lmxc组为78.8%，29mg/lmxc组为78.4%，与对照组的86%相比较并没有明显改变.培养过程中不同浓

2、度mxc试验组gvbd发生较同期对照组相比较也没有明显延迟.但在培养液培养24h时pb1的排出率7.25mg/lmxc组为52.8%，14.5mg/lmxc组为44.4%，29mg/lmxc组为22%，明显低于对照组的71.2%，差异具有统计学意义(p<0.05).结论：mxc对体外培养的小鼠卵母细胞gvbd发生没有影响，但能抑制其卵母细胞的核成熟.【关键词】甲氧氯；卵母细胞；体外研究;细胞培养技术　　【abstract】aim:toinvestigatetheeffectofmethoxychlor(mxc)oninvitromaturationofm

3、ouseoocytes.methods：theoocytesinexperimentalgroupsediumsupplementedg/lmxcandtheoocytesintheunexposedcontrolgroupediumfor24h.germinalvesiclebreakdoentalgroup(7.25mg/l,14.5mg/land29mg/lmxc)ouseoocytesafter24hofincubationinthepresenceofmxc(7.25mg/l:52.8%;14.5mg/l:44.4%;29mg/l:22%)xccou

4、lddecreasetherateofnormalnuclearmaturationofmouseoocytesinvitrobutexertlittleimpactonthegvbdethoxychlor；oocytes；invitro;cellculturetechniques　　0引言　　甲氧滴滴涕(methoxychlor,mxc)是一种替代滴滴涕的有机氯杀虫剂，因其杀虫效果明显，生物毒性相对较低，在许多国家得到广泛应用.常飞等［1-2］通过大鼠染毒实验发现雌性生殖系统对mxc非常敏感，mxc可导致早期流产、出生呼吸窘迫、生长发育迟缓和青春期性发育异常

5、；可干扰孕小鼠的生殖功能,导致生殖和胎仔发育毒性［3］；能改变小鼠的受孕和妊娠的维持［4］等.而目前有关mxc对体外卵母细胞成熟和受精及胚胎发育的影响的报道却很少.我们采用mxc体外培养小鼠未成熟卵母细胞，观察mxc对体外成熟时生发泡破裂(germinalvesiclebreakdoxc对小鼠卵母细胞发育能力的影响提供依据.　　1材料和方法　　1.1材料　　未成熟卵母细胞取自8~12周龄雌性昆明白小鼠，体质量20~25g(由第四军医大学实验动物中心提供)；mxc(美国sigma公司)；孕马血清促性腺激素(pmsg，杭州第二激素制品厂)；合成人输卵管培养液(ht

6、f，第四军医大学西京医院妇产科实验室提供)；二甲基亚砜(dmso，美国amresco公司).　　1.2方法　　1.2.1卵母细胞培养液的配制将mxc完全溶解于dmso，-70℃保存备用.临用前用htf将其分别稀释成7.25，14.5，29mg/lmxc培养液,配好后预平衡2h.　　1.2.2卵母细胞的获取在小鼠动情前期注射pmsg510iu，44~47h后脱颈椎处死，取其卵巢置于输卵管液中，在解剖显微镜下用1ml注射器针头刺破半透明状的卵泡，轻轻挤压使卵丘卵母细胞复合体(cumulusoocyteplex,coc)溢出，并选择外围至少包绕两层卵丘细胞的co

7、c分为实验组和对照组.卵母细胞在倒置显微镜下观察，以见到生殖泡者即为未成熟（germinalvesicle,gv期）卵母细胞.　　1.2.3体外成熟培养所得coc用预平衡过的htf培养液洗涤3次后移入培养液微滴中，实验组分别用含7.25，14.5，29mg/lmxc的htf培养液，对照组直接用htf培养液培养于50ml/lco237℃培养箱中培养，总培养时间为24h.培养过程中在倒置显微镜下每隔1~2h观察gvbd的发生率，培养24h时观察pb1的形成情况.若不能清楚观察到coc，可以采用巴氏吸管轻轻吹打脱去外层颗粒细胞.gvbd的发生表示减数分裂恢复，pb1

8、的形成表示卵母细胞的核成熟.　　统计学