BLI对小鼠卵母细胞体外成熟的影响

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1、华中科技大学同济医学院硕士毕业论文BL-I对小鼠卵母细胞体外成熟的影响研究华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科硕士研究生:张玲导师:朱桂金中文摘要目的研究丁内酷-I(BL-I)对昆明系小白鼠卵母细胞体外成熟、发育能力及超微结构、染色质构型的影响。方法第一部分:将小鼠卵丘一卵母细胞复合物(COO用含有不同浓度BL-1(0,6.25,12.5,25,50,100umoVL)的培养液培养,按培养时间分为3h组和6h组。在BL-I培养液中培养结束时,先观察卵母细胞生发泡破裂(GVBD)的发生率,再将卵

2、母细胞挪入不含BL-I的培养液中继续培养,观察成熟动力学的变化,即卵母细胞GVBD过程和第一极体形成过程,以得到抑制卵母细胞核成熟3h或6h所需的BL-I最低有效浓度;第二部分:将小鼠COC分为实验组和对照组。实验组用“两步法”培养小鼠COC,即用6.25timoVL和10011mol/L的BL-I培养液分别抑制COCA和6h后,挪入成熟培养液继续培养。对照组包括COC自然体外成熟组、二甲亚飒(DMSO)暴露组、体内成熟组三组。将成熟的卵母细胞进行体外受精,观察受精率和囊胚形成率并进行组间比较。第

3、三部分:将1000.05),但卵母细胞的成熟动力学发生明显改变,GVBD和第一极体形成过程较对照组均明显加速,100amol/

4、L组加速更显著。第二部分:BL-16.251amol/L组卵母细胞的受精率(83.1%)和囊胚形成率(25.4%)虽低于体内成熟组(93.3%和46.4%;P<0.05),但显著高于体外成熟组(59.9%和华中科技大学同济医学院硕士毕业论文4.9%;P<0.01)0100vmol/L组卵母细胞的受精率(78.4%)虽高于体外成熟组(P<0.01),但囊胚形成率(2.5%)与体外成熟组无差异(P>0.05)。第三部分:10011mol/LBL-I抑制卵母细胞核成熟6h后,卵丘颗粒细胞的伸展未受影响,

5、卵母细胞胞质的超微结构未出现明显异常,皮质颗粒和线粒体的形态及分布与对照组相似;部分卵母细胞(32.8%)的染色质凝集,染色质围绕核仁型(SN)和染色质非围绕核仁型(NSN)卵母细胞的比例(50.8%和16.4%)较培养前(69.2%和30.8%)明显下降。结论6.25umoUL及以上浓度BL-I能在一定时间内有效抑制小鼠未成熟卵恢复减数分裂,而且抑制作用解除后,成熟能力不受影响,但成熟动力学发生显著的变化,GVBD和第一极体的形成过程明显加速。6.25amol/LBL-1抑制核成熟3h可显著提高

6、小鼠未成熟卵的发育能力。在BL一工抑制卵母细胞恢复减数分裂的过程中,未对胞质的超微结构产生不良影响;染色质构型发生变化,部分NSN型可能转化为发育能力更高的SN型。因此,值得进一步的研究。关键词butyrolactone-I卵母细胞体外成熟发育能力染色质构型超微结构华中科技大学同济医学院硕士毕业论文StudyoftheeffectofbutyrolactoneIonmaturationin-vitroinmurineimmatureoocytesMasterstudent:ZHANGLingTut

7、or:ProfZHUGuijin.Centerofreproductionmedicine,DepartmentofObstetricsandGynecology,Ton自ihospital,Tongjimedicalcollege,HuazhongscienceandtechnologyuniversityAbstractO讨ective:TostudyefectofbutyrolactoneI(BLI)onmaturationinvitro,developmentalcompetence,ul

8、trastructureandchromatinconfigurationinmurinecumulusoocytecomplex(Kunmingstrain).Methods:Partone:MurineimmatureoocytesculturedinthemediacontainingdiferentconcentrationofBLI(0,6.25,12.5,25,50,100“mol/L)weredividedintotwogroups.Inonegroupoocytes

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