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1、比色法测定血浆中羧甲基茯苓多糖的含量?830?中国医院药学杂志2006年第26卷第7期ChinHospPharmJ,2006Jul,Vol26,No:07比色法测定血浆中羧甲基茯苓多糖的含量郭咸希,王晖,阮亮,邹军,宋金春(武汉大学人民医院,湖北武汉430060)[摘要]目的:建立羧甲基茯苓多糖血药浓度测定方法.方法:对血浆样品进行预处理,并用比色法测定羧甲基茯苓多糖的含量.结果:血药浓度线性范围为2～64mg?I-.,回归方程为:C=76.6676A+().8508,r=0.9998;回收率≥96.54,日内精密度≤1.
2、56,日间精密度为≤2.53.结论:本方法操作简便,测定结果准确可靠,可用于羧甲基茯苓多糖的血药浓度测定.[关键词]羧甲基茯苓多糖;比色法;含量测定[中图分类号]R927.2[文献标识k3]A[文章编号]1001—5213(2006)07-083{)一02Determinationofcarboxymethylchymaran'SconcentrationinplasmabycolorimeticmethodGUOXian-xi,WANGHui,RUANLiang,ZOUJun,SONGJin-chun(Departmen
3、tofPharmacyofRenminHospitalofWuhanUniversity,HubeiWuhan430{}60,China)ABSTRACT:OBJECTIVEToestablishtheconcentrationdeterminationmethodofcarboxymethylpachymaran(CMP)inplas—mabycolorimetricmethod.METHODSAftertheplasmasampleswerepre-treated,theconcentrationsofCMPinpla
4、smaweredeterminedbycoloricmetry.RESULTSThelinearrangeofthecalibrationwas2-64mg?L(regressiveequation:C76.6676A+0.8508,r=0.9998).Therecoveryratewas≥96.54withwithin-dayRSD~I.56andbetween-dayRSD≤2.53.CONCLUSIONThemethodissimpleandaccurateandcouldbeusedtodeterminetheco
5、ncentrationofCMPinplas—ma.KEYWORDS:carboxymethylchymarancolormetricmethod;concentrationdetermination羧甲基茯苓多糖(carboxymethylpachymaran,CMP)系中药茯苓中提取的茯苓多糖的结构修饰产物,研究表明其有多种药理活性,如抗肿瘤作用_1~4],增强和调节免疫作用[卜,抗病毒作用[,保肝作用等,其相关药理作用与其在体内的血药浓度有一定相关性L3],故建立血药浓度测定方法有较强实际意义.目前国内外尚未见人血浆
6、中CMP的含量测定报道,本实验拟用比色法测定家兔血浆中CMP的含量,为研究其在动物体内的药动学奠定基础.1材料UNICUV一2800紫外一可见光分光光度计(上海尤尼柯公司);羧甲基茯苓多糖(纯度98.629/5,武汉大学药学院);其他试剂均为分析纯;水为注射用水.2方法和结果2.180苯酚试剂的制备100.00g苯酚加0.10g铝片(预先用稀硫酸处理)及0.05g碳酸氢钠,经过蒸馏得到新鲜苯酚,避光保存.取20.0()g新鲜注射用水,加入80.00g新蒸苯酚,混匀,置棕色瓶中保存备用.2.2CMP溶液的配制精确称量CMP0
7、.1g,加入到1()(JmL的量瓶中,加注射用水至刻度,定容摇匀.配置成1g?L的CMP溶液,待用.用移液管吸取6.4mLCMP溶液至100mL量瓶中,得64mg?LCMP溶液.2.3血样的预处理取家兔空白血浆10mL,离心后做如下处理:用1()mL5()的乙醇溶液醇洗一次,3000r?rain离心10rain,再将已经醇洗的血浆样本上清液8mL移出,置于56℃的恒温中水浴20~30min,再以3000r?rain离心10min,取上清液备用.2.4吸收波长的选择精取上述64mg?LCMP对照液2mL,置20mL具塞试管中
8、,分别加入80苯酚溶液50L以及浓硫酸5mL,摇匀,静置10rain后,置25~30℃水浴中保温20min.以2mL注射用水代替CMP溶液,同法所得为空白溶液.绘制在600--4{}0nm的吸收曲线.CMP最大吸收波长为488.2nm.2.5苯酚和硫酸用量的选择精密量取64mg?LCMP溶液2mL数份,
