灯盏乙素对小鼠免疫性肝损伤的保护作用论文

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1、灯盏乙素对小鼠免疫性肝损伤的保护作用论文杨秀芬,庞紫妤,周芳,郭菁菁,王乃平【摘要】目的观察灯盏乙素对卡介苗(BCG)和脂多糖(LPS)诱导的小鼠免疫性肝损伤的影响。方法给雄性小鼠尾静脉注射卡介苗(BCG,每鼠0.025mg),12d后尾静脉注射脂多糖4μg,建立小鼠免疫性肝损伤模型,在注射LPS前,小鼠灌胃给予不同剂量的灯盏乙素(50mg·kg–1,100mg·kg–1),1次/d,连续12d。测定血清丙氨酸氨基转氨酶(ALT)活性,.freelmunehepaticinjuryinducedbyCalmette-Guerinbacillusvaccine(BC

2、G)andLipopolysaccharide(LPS)inmice.MethodsExperimentalimmuneliverinjuryette-Guerinbacillusvaccine(BCG)inmalemicebyinjectingviatailvein(BCG,0.025mgeachmouse)Lipopolysaccharide(LPS)andLPS(4μgeachmouse)12dlater.Scutellarin(50mg·kg–1,100mg·kg–1)inistrationofLPS.ThelevelofALTinserum,organ(

3、liver,spleen,andthymusgland)indexandpathologicalmorphologicalchangesinlivercellsonitored.ResultsScutellarincouldsignificantlydecreaseserumALTlevelandliverindex,spleenindex,relievepathologicaldamageinliver.ConclusionTheseresultssuggestedthatscutellarinhasmarkedlyprotectiveeffectonimmun

4、ehepaticinjuryinducedbyBCGplusLPSinmice.Keymunehepaticinjury灯盏乙素(scutellarin)又名野黄芩苷,是灯盏花的主要有效成分[1,2]。实验发现灯盏乙素可改善脑缺血再灌注后所致的肝功能损伤,其机制是降低血中一氧化氮(NO)水平和黄嘌呤氧化酶活性、升高肝胞浆中的抗氧化酶超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物还原酶(GSH-Px)和谷胱甘肽转移酶的活性[2]。另有研究表明:灯盏乙素可抑制Fe-Vc诱导的大鼠肝线粒体氧化损伤,通过诱导肝组织中的抗氧化酶SOD,过氧化氢还原酶(CAT)及GSH-Px,清

5、除氧自由基,降低肝组织中的丙二醛(MDA),有效抗硒所致的肝脏损伤[3]。但灯盏乙素对由卡介苗(BCG)和脂多糖(LPS)所致的免疫性肝损伤的作用未见报道。本研究通过对小鼠进行血清丙氨酸氨基转氨酶(ALT)的测定、肝指数、脾指数、胸腺指数及肝组织病理切片来考察灯盏乙素对由卡介苗(BCG)和脂多糖诱导的免疫性肝损伤是否具有保护作用。1材料和方法1.1材料1.1.1动物昆明种雄性小鼠,体重17~23g,SPF级,购自广西壮族自治区食品药品药检所。动物合格证:SCXK桂2003-001号。1.1.2药品与试剂灯盏乙素(98.81%)购自云南玉溪万方天然药物有限公司,批号

6、:051202;皮内注射用卡介苗(CalmetteGuerinbacillusvaccine,BCG)(5人份/支)购自中国生物技术集团公司上海生物制品研究所.freela公司,批号:L2880;联苯双酯滴丸购自广州星群(药业)股份有限公司,批号:CF40090;丙氨酸氨基转氨酶(alanineaminotransferase,ALT)测定试剂盒购自南京建成生物制品研究所,批号:20060419。1.1.3仪器Agilent8453紫外分光光度计仪;德国赛多利斯电子分析天平;高速低温离心机(德国BiofugeStouctos公司)。1.2方法1.2.1小鼠免疫性肝

7、损伤模型的复制方法[5,6]采用卡介苗(BCG)加脂多糖(LPS)诱导小鼠免疫性肝损伤模型。给每只小鼠尾静脉注射BCG0.025mg,致敏后12d,再注射LPS4μg攻击,以诱导肝损伤,12h后,再处死,测定各项指标。1.2.2给药方法动物按体重分层随机分为5组:正常对照组、免疫模型组、联苯双酯组(200mg·kg–1)、灯盏乙素(50mg·kg–1、100mg·kg–1)小、大2个剂量组。除正常组外,其余4组小鼠均于实验的第1天,按上述的实验方法给予BCG,联苯双酯组和灯盏乙素小、大2个剂量组均于造模的第1天(给BCG3h后),按上述剂量灌胃给药,灌胃1次/d,

8、连续12d

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