新疆多脂鳞伞对不同氮源物质的多样性利用特征

新疆多脂鳞伞对不同氮源物质的多样性利用特征

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1、新疆多脂鳞伞对不同氮源物质的多样性利用特征刘淼1a,1b,林辰壹1a,1b,曹艳1a,1b,马海1a,1b,魏鹏2(1.新疆农业大学,a.林学与园艺学院;b.设施农业研究所,乌鲁木齐830052;2.新疆农业科学院植物保护研究所,乌鲁木齐830091)摘要:通过新疆阿瓦提野生多脂鳞伞(Pholiotaadiposa)氮源物质的选择性利用能力评价,掌握新疆野生多脂鳞伞种质资源氮代谢特性,为资源保护和种质创新提供理论依据。通过在15种不同含氮处理培养基上的菌落形态特征、菌丝体显微观察、生长量、生长速率、生长高峰期、满皿时间、达到总生长

2、量50%的天数的分析表明,当氮源为牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、硝酸铵、硝酸钾、硫酸铵、氯化铵、谷氨酰胺和天门冬氨酸时,多脂鳞伞LL-01菌丝体生长速度快、活力强、长势整齐、菌落形态结构完整、锁状联合发育正常。其中当有机氮为蛋白胨、无机氮为硝酸铵、氨基酸类物质为谷氨酰胺时,菌丝体总生长量分别达到77.70mm、79.90mm和65.27mm。阐明了多脂鳞伞对不同性质的氮源采用了不同的氮代谢途径,表现出对不同类型的含氮物质的利用速率和利用效率的差异,且具有氮源利用的多样性特征。..关键词:新疆;多脂鳞伞(Pholiotaadiposa);

3、蛋白胨;硝酸铵;谷氨酰胺中图分类号:S646文献标识码:A:0439-8114(2015)04-0827-04DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.04.015收稿日期:2014-07-10基金项目:新疆维吾尔自治区十二五重大专项(201130104-2-2);国家级大学生创新创业训练计划项目(201310758020)简介:刘淼(1987-),女,辽宁岫岩人,硕士,主要从事食用菌研究,()18299144154(电子信箱)liumiao1987426522@126.com;通信,林辰壹,女

4、,教授,主要从事蔬菜种质资源评价与利用、食用菌种质资源评价与利用研究,(电子信箱)linchenyi65@sina.com。氮源是构成菌体蛋白质、核酸、酶类以及其他含氮化合物的主要成分,是野生菌生长所必需的物质。氮源一般不提供能量,是食用菌重要的营养物质之一[1],野生食用菌可以利用铵盐、硝酸盐在内的无机氮和各种有机氮,并将其中的氮转变为氮源,维持其快速生长。氮源也是野生食用菌形成人体所需要的维生素、氨基酸等活性物质的重要物质基础[2,3],尤其与增强机体的免疫能力、抗肿瘤、降血压、抗衰老等物质的合成密切相关[4]。新疆的多脂鳞伞

5、主要分布于新疆天山、阿勒泰山脉的河谷阔叶林中,当地人称之为木黄菇、肥鳞耳、黄丝菌或柳树菌[5]。多脂鳞伞是球盖菇科(Strophariaceae)鳞伞属(Pholiota)的一种具有坚果味道的食药用菌[6,7]。无机氮源中的硝酸盐和铵盐,有机氮源中的氨基酸、酰胺和胺等是重要的氮源,研究证明,0.1%~0.3%蛋白胨是多脂鳞伞最佳氮源[8,9]。新疆特殊自然条件下许多生物表现出遗传多样性特征,本研究以新疆阿瓦提县野生食、药用真菌多脂鳞伞[Phonliotaadiposa(Fr.)Quél.]为对象,开展了多脂鳞伞对不同性质氮源的选择

6、性利用能力研究。通过探讨新疆阿瓦提县野生的多脂鳞伞对不同性质氮源物质的利用是否存在多样性特点,为多脂鳞伞突变菌株筛选、杂交育种以及生理生化研究奠定理论基础。1材料与方法1.1野生多脂鳞伞的获得与菌丝体活化野生多脂鳞伞采自新疆阿瓦提县(39°31′N、79°45′E、1028mAlt)拜什艾日克镇农田防护林柳树的枯洞中。经多代分离获得稳定多脂鳞伞LL-01,试验菌株由新疆农业科学院植物保护研究所提供。以PDA加富培养基为活化培养基,灭菌后趁热倒平板,取大小为5mm×5mm菌种块接种,25℃黑暗条件下菌丝体活化培养。1.2多脂鳞伞菌株

7、LL-01对不同种类氮源的选择性利用研究无氮培养基的基本配方(CK)由20g葡萄糖、2g磷酸二氢钾、1g硫酸镁、0.05g维生素B1、20g琼脂组成,定容至1000mL[10,11]。分别加入2g的大豆、大豆芽、牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素、硝酸铵、硝酸钾、硫酸铵、氯化铵、草酸铵、谷氨酰胺、天门冬氨酸、甘氨酸、甲硫氨酸,调pH至7,其他步骤和方法同“1.1”所述,恒温培养7d。1.3指标测定与数据处理菌丝长势:+++表示长势浓密,++表示长势一般,+表示长势差且稀疏,--表示萎缩,-表示不生长。菌落形态特征:○表示边缘整齐完整,□

8、表示老化斑点,◎表示菌丝干缩,¤表示菌丝松散,☆表示菌丝有爬壁,同时观测菌丝生长圈数量以及菌丝是否吐水、菌落形状、中央隆起或倒伏、转色、气味、是否有杂菌抑制线。显微特征观察:在10×40倍MoticSFC-28显微镜下观测菌丝粗细、分支、形状以及每

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