骨髓间充质干细胞输注对再生障碍性贫血模型小鼠骨髓造血功能的影响论文

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1、骨髓间充质干细胞输注对再生障碍性贫血模型小鼠骨髓造血功能的影响论文【摘要】本研究探讨人源骨髓间充质干细胞（MSC）输注对免疫介导性再生障碍性贫血模型小鼠骨髓造血功能及生存率的影响.采用雌性BALB/c小鼠30只，参照姚军等方法建立免疫介导性再生障碍性贫血模型，实验分模型组、MSC组及照射组。MSC组于制模后3天从小鼠尾静脉1次性输注人骨髓MSC1×106，观察各组小鼠外周血象变化、第28天存活率、骨髓有核细胞数量、造血集落生成和骨髓病理学特征。结果显示：于制模后第7天，模型组外周血SC组和照射组，分别为（0.65±0.05）×109/L，（2.45±0.71）×109/L，（2.30±0.

2、33）×109/L；第10天3组均表现为全血细胞减少.freelalStemCellInfusiononHematopoiesisinMiceiaAbstractToexploretheeffectsofinfusionanmesenchymalstemcellsfrombonemarroarroatopoieticfunctionandsurvivalinmiceia(AA),immunomediatedaplasticanemiamicemodelethod.ThirtyBALB/cfemalemiceodelgroup,MSCgroupandradiationgroup.InMS

3、Cgroup,1×106MSCentofmodel.Thechangesofbloodcount，thenumberofnuclearcellsinasinglethighbone,colonyformingunits(CFU),pathologicalfeaturesofbonemarroiceberofodelgroupatday7afterestablishmentofmodelodelgroupberofnucleatedcellsinsinglethighboneandpathologicalsliceasodelgroup,respectively.Thesurvivalr

4、ateofmiceinMSCgroupodel(18.2%,p0.01).Therearroatopoiesisandsurvivalrate.ItisconcludedthatMSCinfusionreducesthedegreeofbonemarroprovesurvivalofimmunomediatedAAmicemodel.Keyia；animalmodel；mesenchymalstemcell；hematopoiesis骨髓间充质干细胞（mesenchymalstemcells,MSC）除具有促进造血干细胞移植后造血重建外，还具有免疫调节作用，防治移植物抗宿主病［1，2］。

5、获得性再生障碍性贫血主要是T淋巴细胞介导的骨髓造血功能衰竭［3，4］，且再生障碍性贫血患儿骨髓MSC体外增殖能力较正常对照儿童明显减弱［5］。本研究探讨人源骨髓MSC对免疫介导性再生障碍性贫血小鼠骨髓造血功能及生存率的影响，再生障碍性贫血模型的建立清洁级雌性BALB/c小鼠（H2d、Mlsb），8-10周龄，16-18g，作为受者。清洁级DBA/2小鼠（H2d、Mlsa），6-10周龄，为淋巴细胞供者。两者均由中山大学动物实验中心提供。参照文献［6］建立免疫介导性再生障碍性贫血模型。取DBA/2小鼠颈椎脱臼处死，常规消毒，无菌取出胸腺及颈部、颌下、腋窝、腹股沟、肠系膜等处淋巴结，分别获

6、胸腺、淋巴结细胞悬液,细胞浓度为5×106/ml，按胸腺细胞与淋巴结细胞以1∶2比例混合，即胸腺淋巴结细胞悬液。台盼蓝鉴定细胞活性，活性细胞95%。雌性BALB/c小鼠经5Gy60Coγ射线全身照射（剂量率125.35cGy/min），照射后20小时内由尾静脉注入DBA/2小鼠胸腺淋巴结细胞1×106/只。小鼠照射后立即移入中山大学动物实验中心SPF级无菌层流室内，饮用加有庆大霉素（40万U/L）和二性霉素B（50mg/L）高压灭菌水，每日观察并记录小鼠体重、活动力、外表、饮食、大便、死亡情况，制模后28天实验终止。MSC分离、扩增及输注取正常儿童骨髓2ml，按本室已建立的方法［7］进行

7、MSC分离、扩增，传代至4-5代时收获细胞，于制模后第3天（照射后72小时）经小鼠尾静脉注射人源MSC1×106。实验分组雌性BALB/c小鼠30只，分为3组：①再生障碍性贫血模型组：11只，照射+胸腺淋巴结细胞输注；②MSC组：10只，照射+胸腺淋巴结细胞输注+MSC输注；③单纯照射组：9只，仅照射。观察指标生存率及生存曲线。比较各组小鼠生存情况。外周血象检测于制模后第7、10、14、21天分别断尾，微量吸管采集肝素抗