苦丁茶对五种细菌的体外抑菌试验论文

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1、苦丁茶对五种细菌的体外抑菌试验论文陈源红，唐华英，韦连登，林小海，覃学辉，梁昌丽【摘要】目的探讨苦丁茶对五种常见细菌的体外抑菌效果。方法用琼脂扩散法和试管稀释法测定苦丁茶汤剂对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、变形杆菌、白色念珠菌、新生隐球菌五种病原菌的体外抑菌作用。结果苦丁茶对所测病原菌的最小抑菌浓度(MIC)为：金黄色葡萄球菌100mg/ml，表皮葡萄球菌50mg/ml，变形杆菌100mg/ml.freelg/ml。结论金黄色葡萄球菌对苦丁茶均呈中度敏感，表皮葡萄球菌对苦丁茶呈高度敏感，变形杆菌

2、对苦丁茶呈低度敏感，白色念珠菌、新生隐球菌对苦丁茶均呈耐药。【关键词】苦丁茶；细菌；微生物敏感性试验苦丁茶又名皋卢、瓜卢，是一种纯天然绿色饮品。远在东汉时的《桐君录》（已经遗失）中就曾记载作为贡品供皇家享用。民间记载具有清热解毒、消炎利便、解酒功能，对咽喉肿痛、口腔炎、牙龈炎、便秘等疾病效果显著［1～3］，但其药理学研究不多，我们研究了苦丁茶的抗菌作用，现报告如下。1实验材料1.1试验药物苦丁茶水煮浓缩液。药物制备：100g苦丁茶加10倍量蒸馏水小火煮沸2次，每次1h，合并2次水煮液，四层纱布过

3、滤，浓缩至100g/100ml，调整pH至7.0～7.2，4℃冰箱保存备用。1.2菌种所用菌种为金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、变形杆菌、白色念珠菌、新生隐球菌（由中国药品生物制品鉴定所提供，其中金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌为耐青霉素类药物菌株）。菌种的培养及菌液的配制:金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、变形杆菌用MH琼脂平板培养，37℃培养18h；白色念珠菌、新生隐球菌用沙保弱琼脂平板培养，28℃培养48～72h备用。菌液取细菌生理盐水用0.5麦氏管比浊配成。1.3培养基制备MH琼脂按平板常规方法制

4、备：MH琼脂38g/蒸馏水1000ml；MH肉汤按常规方法制备：MH肉汤27g/蒸馏水1000ml；沙保弱琼脂培养基制备：沙保弱琼脂27g/蒸馏水1000ml。1.4试验器材打孔器、高压蒸汽灭菌器、冰箱、恒温培养箱、无菌工作台等。2试验方法本试验同时采用琼脂扩散法和试管稀释法用苦丁茶对各菌株进行抑菌试验，观察苦丁茶对五种病原菌的抑菌效果。2.1琼脂扩散法用灭菌棉签蘸取供试菌液（0.5麦氏管比浊），均匀涂布于MH琼脂平板上，然后用直径6mm的琼脂打孔器均匀打孔，每板4孔，去除孔内琼脂并适当封闭孔底

5、。将供试药液加于孔中，以满而不溢为宜并作好标记，并且以MH肉汤作为阴性对照。置4℃冰箱中作用1h后取出。金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球、变形杆菌置于37℃恒温箱中培养18～24h，白色念珠菌、新生隐球菌28℃培养48h，观察结果。2.2试管稀释法取无菌试管6支，第1管加入1.8mlMH肉汤，2～5管加入1mlMH肉汤。以无菌操作吸取已制备好的供试药液0.2ml加入第1管中，混匀后吸取1ml加入第2管中，依次倍比稀释至第5管弃去1ml，第6管加入2mlMH肉汤作为对照管。每管加入菌液50μl。细菌37

6、℃培养18～24h，真菌培养48～72h后观察结果。能够完全抑制细菌生长的最小药物浓度为最小抑菌浓度（MIC）。3实验结果3.1琼脂扩散法实验结果为了使实验结果一目了然，琼脂扩散法实验结果的判断采用《中药制用经验录》的方法［4］表示。即抑菌环直径在0.8cm或以下的，记（-）号，为不敏感；抑菌环直径在0.8～1.30cm，记（+）号，为低度敏感；抑菌环直径在1.31～1.90cm，记（++）号，为中度敏感；抑菌环直径在1.91～2.5cm，记（+++）号，为高度敏感。本实验琼脂扩散法测得苦丁茶对

7、五种细菌的抑菌圈及敏感度见表1。表1苦丁茶对五种细菌的抑菌情况（略）3.2试管稀释法实验结果苦丁茶对所测病原菌的MIC见表1。4讨论本实验用琼脂扩散法对苦丁茶的抑菌作用作了定性检定，然后用试管稀释法对其药理活性进行定量分析，苦丁茶对五种细菌的抑菌作用用琼脂扩散法和试管稀释法得到的结果相符。以对表皮葡萄球菌的抑菌作用最强，对金黄色葡萄球菌、变形杆菌次之，对白色念珠菌、新生隐球菌两种真菌的效果较差或未见抑菌作用，为临床防治所试敏感病原菌感染提供了一定的实验依据。另本实验用的金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球

8、菌均为耐青霉素类药物菌株，苦丁茶对两者的效果均很好，这就为苦丁茶在临床抗耐药菌上发挥作用提供了依据。由实验结果可知苦丁茶对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、变形杆菌抑菌效果较为明显。金黄色葡萄球菌的抑菌效果和有关文献报道相符［5］，但上述报道中的金黄色葡萄球菌并不是耐青霉素类药物菌株，表皮葡萄球菌、变形杆菌未见报道，这些是我们比前面报道新颖的地方。同时据报道［5］苦丁茶对甲型溶血性链球菌、乙型溶血性链球菌、肺炎球菌、白喉杆菌、痢疾杆菌有明显效果，本实验为苦丁茶在咽喉肿痛、口腔炎、牙龈炎、便秘、痢疾等