金花茶种子对激素相关性肿瘤体外抑制作用的实验研究论文

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1、金花茶种子对激素相关性肿瘤体外抑制作用的实验研究论文韩立春,史丽颖,于大永,唐前,唐玲,冯宝民,王永奇【摘要】目的观察金花茶种子不同提取物对激素相关性肿瘤体外抑制作用。方法采用噻唑蓝比色法(MTT)检测金花茶种子不同提取物对人宫颈癌HeLaS3细胞和人前列腺癌PC3细胞增殖的影响。结果金花茶种子乙醇提取物、正丁醇部分和水溶部分都显示了较强的抑制人宫颈癌HeLaS3细胞和人前列腺癌PC3细胞增殖的作用,其IC50分别为85.88,67.62,55.71μg/ml和63.06,56.20,68.53μg/ml,且抑制作用和样品浓度呈量效关系。结论金花茶种子乙醇提取物的正丁醇部

2、分和水溶部分在体外对激素相关性肿瘤具有抑制作用,为其抗癌活性的有效部位。【关键词】金花茶;宫颈癌;前列腺癌;HeLaS3细胞;PC3细胞Abstract:ObjectiveToinvestigatetheinhibitiveeffectoftheseedsofCamelliachrysantha(Hu)TuyamaonGonadalHormonesdependenttumourinvitro.MethodsHeLaS3cellsediumcontaining10%fetalcalfserum,PC3cellsediumcontaining10%fetalcalfserum

3、.Theanti-proliferativeeffectoftheseedsofCamelliachrysantha(Hu)TuyamaonHeLaS3cellsandPC3cellstheEtOHextractfromtheseedsofCamelliachrysantha(Hu)TuyamacouldsignificantlyinhibittheproliferationofHeLaS3cellsandPC3cellsatIC50concentrationof85.88,67.62,55.71μg/mland63.06,56.20,.freell,respective

4、lyandadose-dependentrelationshipbetpleconcentration.ConclusionBuOHfractionandH2OfractionfromtheEtOHextractfromtheseedsofCamelliachrysantha(Hu)Tuyamaareeffectiveforanticancer.Keyelliachrysantha(Hu)Tuyama;Cervicalcancer;Prostaticcancer;HeLaS3cells;PC3cells金花茶Camelliachrysantha(Hu)Tuyama系山茶科

5、Theaceae山茶属CamelliaLinn.金花茶组SectionchrysanthaChang植物,被列为国家一级、世界二级珍稀保护植物[1]。金花茶不仅有较高的观赏价值.freelanSciencesResearchResourceBank(日本人类科学基金会,东京,日本)获得,HeLaS3细胞培养于含有10%热灭活小牛血清的RPMI1640培养液中,PC3细胞培养于含有10%热灭活小牛血清的DMEM培养液中,37℃,5%CO2,饱和湿度条件下培养。选取对数生长期细胞进行实验。1.3体外细胞增殖抑制实验噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞生长情况,将HeLaS3细胞和P

6、C3细胞分别种于96孔培养板,每个孔细胞数为5×103,分别培养于RPMI1640培养液和DMEM培养液中,在37℃,5%CO2条件下培养24h。培养24h后,以PBS冲洗细胞,然后分别加入新的培养液和系列浓度的待测样品。经初步筛选后确定实验组设6个药物浓度组,每组药物的终浓度分别为5,10,20,40,80,160μg/ml,对照组加入同样浓度的二甲基亚砜(DMSO),培养24h。培养结束前4h每孔加入20mlMTT溶液(5mg/ml),离心,弃上清液,加入200mlDMSO充分溶解结晶物,酶标仪测490nm处吸光度值。因为吸光度值与培养液中活细胞数成正比,所以通过吸光

7、度值可以计算细胞存活百分率。1.4统计分析以对照组中细胞存活率为100%,样品组与其相比所得相对值为细胞存活百分率,实验结果以±s表示,采用统计学t检验进行组间比较分析,P0.05为差异有显著性。2结果用浓度分别为5,10,20,40,80,160μg/ml的金花茶种子的不同提取物处理HeLaS3细胞和PC3细胞,观察不同浓度的样品对HeLaS3细胞和PC3细胞增殖的影响。结果发现金花茶种子乙醇提取物、正丁醇部分和水溶部分都显示了较强的抑制HeLaS3细胞和PC3细胞增殖的作用(见表1),其IC50分别为85.88,67.62

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