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1、WA1302·009-01第3页共3页起草：日期：审核：日期：批准：日期：生效日期：签字：拷贝号：变更记载：制定（变更）原因及目的：公司更名。修订号批准日期生效日期002001年5月4日2001年5月11日0102分发部门生产技术部[]份质量部QA[]份质量部QC[]份一车间[]份二车间[]份三车间[]份设备动力科[]份物控部[]份总经办[]份综合部[]份薄层色谱法操作规程1.适用范围：适用于本厂品种薄层色谱检验。2.职责检验员：严格按照操作规程进行检验。3.定义薄层色谱法系将适宜的吸附剂或载体涂布于玻璃板、塑料、铝基片上成一均匀薄层,经点
2、样、展开、显色后,再与适宜的对照物质按同法在同板上所得的色谱图相对比,并可用薄层扫描仪进行扫描，用于药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。4.仪器与材料4.1.玻板：除另有规定外,用10cm×10cm、10cm×15cm、20cm×10cm、20cm×20cm、5cm×20cm的规格，要求光滑、平整、洗净后不附水珠，晾干。4.2.吸附剂或载体：最常用有硅胶G、硅胶GF254、硅胶H、硅胶HF254。用水或0.2～0.5%羧甲基纤维素钠水溶液适量调成均匀糊状。4.3.薄层铺板机：自动涂成厚度均匀的薄层。4.4.点样器:微量进样器(平头)、毛细
3、管。4.5.展开室:平底或双槽层析缸，盖子须密闭。WA1302·009-01第3页共3页1.试药与试液1.1.0.2～0.5%羧甲基纤维素钠溶液:称取2—5g羧甲基纤维素钠,加1升水煮沸溶解,过滤,静置，用时取上清液。6.操作方法2.1.薄层板的制备2.1.1.手动制板法：将吸附剂1份和水(或0.2～0.5%羧甲基纤维素钠水溶液)3份在研钵中向一个方向研磨混合,去除表面汽泡后,倒入准备好的玻璃板上,用洁净玻棒涂铺成一个均匀的薄层,再稍加振动,使整板薄层均匀。2.1.2.薄层铺板机法：先将吸附剂1份和水(或0.2%-0.5%羧甲基纤维素钠溶液
4、)3份置匀浆仪中混合均匀,将所需规格薄层板置搁板上,用所需层度刮板装入供浆槽口内,将匀好的吸附剂浆液倒入供浆槽内,即时板开关,制板自动开始,制完板后自动停机。2.2.干燥、活化2.2.1.将制备好的薄层板，于室温下置水平台上晾干，在反射光及透射光下检视，表面应均匀、平整、无麻点、无破损及污染,于110℃烘30分钟，冷却后立即使用或置于干燥箱中备用。2.3.点样除另有规定外,用点样器点样于薄层板上,一般为圆点,点样基线距底边1.0～1.5cm,样点直径一般不大于2mm,点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。2.4.展开将点好样品的薄层板放
5、入层析缸的展开剂中，浸入展开剂的深度为距原点5mm为宜，待展开到规定距离，除另有规定外，一般为8-15cm，取出薄层板，晾干。按该药品项下的规定检测。2.5.展开室如需预先用展开剂饱和，可在室中加入足够量的展开剂，并在壁上贴两条与室一样高宽的滤纸条，一端浸入展开剂中，密闭展开室的盖，使系统平衡。2.6.结果与判定2.6.1.若供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，均显相同颜色的斑点，则判检出该对照品斑点。2.6.2.若供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，斑点不明显或错位或斑点颜色不对应，则应重新取样复试。若复试结果符合6.6.1.项
6、要求，则判检出该斑点。2.6.3.若供试品色谱中,在与对照品色谱相应位置上无斑点或经6.6.2.WA1302·009-01第3页共3页复试仍不符合规定,则判未检出该斑点。1.薄层扫描法：如需用薄层扫描仪对色谱进行扫描供鉴别、检查、含量测定，则可用薄层扫描法。1.1.定义：系指用一定波长的光照射在薄层板上，对薄层色谱中有吸收紫外光或可见光的斑点，或经激发后能发射荧光的斑点进行扫描，将扫描得到的图谱及积分数据用于药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。1.2.操作方法1.2.1.样品的制备：取样2份，按4.项下进行操作，即得已展开的薄层板。1.2
7、.2.上机扫描：按该品种项下要求，在薄层扫描仪上进行扫描。1.2.3.计算1.2.4.相对偏差：≤3.0%1.2.5.判定：根据该品种项下要求判定。1.3.注意事项1.3.1.供试品溶液至少制备2份，每份对照品溶液和供试品溶液在同一薄层板上点样不少于2个点，并且交叉点样。1.3.2.待测成分斑点与相邻斑点的分离度至少在1.0以上，背景干扰尽量小。1.3.3.待测成分斑点与对照品斑点目测颜色或荧光应一致。2.编制依据《中国药典》2000年版一部附录《中国药品检验标准操作规范》2000年版
