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时间:2018-07-09
《米诺环素对衰老痴呆大鼠脑组织enos、inos表达的影响论文》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、米诺环素对衰老痴呆大鼠脑组织eNOS、iNOS表达的影响论文赵宇蔡志友晏勇余昌胤张骏黄良国晏宁承欧梅李洁颖蒋萍【摘要】目的观察米诺环素(minocycline)对衰老痴呆大鼠学习记忆和脑组织eNOS、iNOS表达的影响,探讨米诺环素对衰老痴呆脑保护作用机制。方法组)、米诺环素治疗组(MT组)。酶联免疫吸附法和免疫组织化学法检测大鼠脑组织eNOS、iNOS的含量,行为学检测大鼠记忆学习改变。结果MT、M组与S组大鼠前后两次跳台实验、水迷宫实验的结果有显著性差异(P<0.01),MT组与M组大鼠前后两次跳台实验、水迷宫实验的检
2、测结果有显著性差异(P<0.01)。MT组iNOS表达较M组降低(P<0.01),MT组eNOS表达较M组增高(P<0.01);MT组eNOS、iNOS表达较S组增高(P<0.01);M组eNOS、iNOS表达较S组显著增高(P<0.01)。结论米诺环素能降低衰老痴呆大鼠脑组织iNOS、增强eNOS表达抑制氧化应激反应发挥脑保护作用。【关键词】痴呆;米诺环素;一氧化氮合酶【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectofminocyclineontheexpressionsofeNOSa
3、ndiNOSinbrainofageddementiarat,andstudyitsneuroprotectionmechanismforageddementia.MethodsinocyclinecandecreasetheexpressionofiNOSandincreasetheexpressionofeNOSinageddementia.Minocyclinecanplaysuchaneuroprotectionroleinageddementiaratsbyrestrainingoxidativestressac
4、tion.【Keyentia;Minocycline;Nitricoxidesynthas一氧化氮合酶(NOS)是催化一氧化氮(NO)生物合成的酶,广泛存在于各种类型的细胞中。内皮源性一氧化氮合酶(eNOS)可以激活血管平滑肌细胞中的可溶性鸟苷酸环化酶,使胞内cAMP浓度升高,从而起到扩张血管、抑制血小板和白细胞黏附、聚集的作用.freelg,第三军医大学野战外科研究所提供,动物中心许可证号:渝实动设施准第260号)。米诺环素胶囊(100mg/粒):中国惠式制药有限公司,生产日期:2006年6月8日,生产批号:060608
5、74。eNOS、iNOS化学检测试剂盒:福建迈新生物技术有限公司;D半乳糖(Dgal):上海试剂二厂;大鼠跳台和大鼠穿梭箱程序自动控制仪均由重庆市神经病学重点实验室提供。1.2方法1.2.1衰老痴呆模型制备和分组参照文献〔10,11〕颈后皮下注射Dgal120mg·kg1·d1连续6g/ml浓度备用。正常组、M组每天给予等量生理盐水处理;在M组的基础上,MT组于缺血后给予米诺环素50mg·kg1·d1灌胃。美满霉素的剂量选择参考Stirling等〔12〕和He×16cm×25cm,箱顶部装有蜂鸣器。训练时,将
6、大鼠放在箱内任一侧,20s后出现蜂鸣音,持续15s,蜂呜5s后由底部电栅给以电刺激(电流强度1.5mA),大鼠受到电刺激后逃到另一端,电击蜂鸣自动停止。记录动物在单独蜂鸣期间逃避的时间(主动逃避时间)和遭受电刺激的时间以及电击的次数。全部动物每天测试1次,每次20个循环,全程训练。1.2.3.2水迷宫实验Morris水迷宫作为检测实验动物学习记忆水平的重要工具,其测试程序主要包括定位航行实验和空间探索实验两个部分。(1)定位航行实验:用于测量大鼠获取经验(学习)的能力。实验前1d下午将大鼠放入水中自由游泳2min,观察其游
7、泳姿势并使其熟悉实验环境。实验历时4d,每天上、下午两个时间段,每个时间段训练4次,每次训练随机选择一个入水点,将大鼠面向池壁放入水池,同一次训练所有大鼠入水点相同。记录大鼠找到平台的时间,即潜伏期。(2)空间探索实验:用于测量大鼠保存经验(记忆)的能力,即大鼠学会寻找平台后,对平台空间位置记忆的能力。在训练的最后时段撤除平台,然后在B象限任选一个入水点将大鼠面向池壁放入水中,观测其在120s内在各象限的游泳距离及其占总距离的百分比,以及120s内穿越各象限平台相应位置(即平台在D象限所在的位置)的次数。记录大鼠找到平台的
8、时间(学习潜伏期),及120s内穿越各象限平台相应位置的次数(记忆潜伏期),比较各组潜伏期,评价大鼠学习记忆功能。1.2.4酶联免疫吸附法(ELISA法)大鼠麻醉后固定于手术台上,快速心脏抽血约5ml注入试管中,室温下静置2h后,4℃离心,3000r/min,10min,取血清。在冰台上迅速分离大鼠一侧
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