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1、3刘婷,王文礼,姜丽丽(内蒙古医学院生物化学与分子生物学教研室,内蒙古呼和浩特010059)摘要:蛋白质磷酸化是生命活动最重要的一项翻译后修饰,与信号转导、细胞周期、生长发育以及癌变机制等许多生物学问题有着密切的关系。蛋白质磷酸化和去磷酸化作为原核和真核细胞表达调控的关键环节,了解其对功能的影响可以深入理解生命系统在分子水平的调控状况。目前磷酸化蛋白质组研究仍是功能基因组面临的重大课题,本文对此作一综述。关键词:磷酸化蛋白质组学;信号转导;疾病中图分类号:Q51文献标识码:A文章编号:1004-2113(2007)04-0302-04RESEARCHPROGRESSINPHOSPHOPROTE
2、OMICSLIUTing,WANGWen-li,JIANGLi-li(DepartmentofBiochemistryandMolecularBiology,InnerMongoliaMedicalCollege,Hohhot010059China)Abstract:Theproteinphosphorylationisthemostimportantposttranslationalmodificationofpro2teinsinthelifeactivity,whichhascloserelationshipwithsignaltransduction,cellcycle,growth,
3、func2tionofcancerandmanyotherbiologicalproblems.Asthekeypointofexpressionmodulationinpro2karyoticandeukaryoticcells,theproteinphosphorylationanddephosphorylationmayhelprevealthestatusofthelifesystematthemolecularlevel.Thephosphorylationinproteomeremainschallengingforfunctionalgenomics.Inthispaper,so
4、menewresearchprogressinproteinphosphorylationinproteomearesummarized.Keywords:phosphoproteomics;signaltransduction;disease等多种形式[2]。蛋白质的磷酸化修饰是生物体内重要的共价修饰方式之一。磷酸化修饰本身所具有的简单、灵活、可逆的特性,以及磷酸基团的供体ATP的易得性,使得磷酸化修饰被真核细胞所选择接受成为一种最普遍的调控手段。蛋白质的磷酸化和去磷酸化这一可逆过程,几乎调节着包括细胞的增殖、发育、分化、细胞骨架调控、细胞凋亡、神经活动、肌肉生物体能迅速对体内环境变化和外界
5、环境刺激产生应答反应,这些反应过程靠复杂的调控机制调节,其中大多数调控机制是由蛋白质的构象变化所介导的,而蛋白质本身的构象变化常常是通过变构效应和蛋白质一级结构上发生的各种共价修饰来实现的[1]。目前,已发现20多种蛋白质翻译后修饰,以至一种基因产物可呈现磷酸化修饰、糖基化修饰、羧基化修饰、乙酰化修饰以及连接变异体收稿日期:2007-02-01;修回日期:2007-06-28基金项目:内蒙古医学院重大科研项目(ny2004-zd-002)作者简介:刘婷(1981-),女,内蒙古医学院2005级在读硕士研究生。通讯作者:王文礼,教授,硕士研究生导师,E-mail:wenliwang1950@ya
6、hoo.com.cn内蒙古医学院,010059收缩、新陈代谢及肿瘤发生等生命活动的所有过程,并且可逆的蛋白质磷酸化是目前所知道的最主要的信号转导方式[3]。目前已经知道有许多人类疾病是由于异常的磷酸化修饰所引起,而有些磷酸化修饰却是某种疾病所导致的后果[4]。鉴于磷酸化修饰在生命活动中所具有的重要意义,探索磷酸化修饰过程的奥秘及其对功能的影响,已成为众多生物化学家及蛋白质组学家所关心的内容。用蛋白质组学的理念和分析方法研究蛋白质磷酸化修饰,可以从整体上观察细胞或组织中磷酸化修饰的状态及其变化,对以某一种或几种激酶及其产物为研究对象的经典分析方法是一个重要的补充,并提供了一个全新的研究视角,由此
7、派生出磷酸化蛋白质组学(phosphoproteomics)这一新概念[4]。发展的机制。针对蛋白质翻译后修饰主要为磷酸化,并且主要为丝/苏氨酸和酪氨酸磷酸化的特点,蛋白质磷酸化抗体免疫印迹是常用的分析方法,即对外界因素(如:EGF)刺激细胞的前后的细胞提取物,使用泛抗磷酸化丝/苏氨酸抗体或(和)泛抗磷酸化酪氨酸抗体,富集特异性沉淀丝/苏氨酸或(和)酪氨酸磷酸化蛋白分子,然后进行二维凝胶电泳(tw
