裸鼠荷瘤方法及注意事项

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时间:2018-07-13

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1、关于肿瘤细胞株的选择,确实是一个很麻烦的问题,各类文献中提到过的细胞株有很多,但是一般而言,我觉得,对于我们做裸鼠肿瘤模型,细胞株的选择应该考虑一下几个方面:1.国际公认度,虽然SFDA的指导原则上表示只要是建株细胞株均可以,但是一般来说,还是应该尽量考虑国际上比较公认的细胞株。2.体内生长情况,很多细胞株,在文献中有很高的出镜率,但是实际上,基本都是从体外开始有名,所以很多人就硬生生的往体内套,结果就是吃力不讨好,比如楼主提到的A549,还有MCF-7,都是很有名气的细胞株,但是在体内却不是一个好的试验对象,成瘤率低,生长慢,均一度差。现在国内的很多研

2、发单位,特别是一些公司的领导们,缺乏这方面的认识,动不动就把这些著名的细胞株挂在嘴边,硬压着一线的研究人员去花功夫做这些细胞株,作的不好,就怀疑大家的水平如何如何的,奶奶的,对此非常生气!3.药物的敏感性,这一点常常被大家忽视,大部分的裸鼠肿瘤模型都是为抗肿瘤药物的筛选以及研究服务的,但是常常大家只考虑了这个细胞株是不是好做,但是没有考虑到细胞株本身对于药物的敏感性,比如Lovo细胞,国际公认度也还可以,体内生长情况也很棒,但是对于药物的敏感性不佳,大部分的常规化疗药物到了它这里,抑瘤率都会下降,显而易见,对于抗肿瘤药物的筛选来说,它不是一个好的选择。另

3、外说一点,体内与体外的关系,现在做体内的人,常常被体外的人牵着鼻子走,体外做出来什么什么细胞株敏感,体内的人就得吭哧吭哧的去做这个,但是却死活做不好,其实,现在我和一些老前辈们的观点是,体内和体外应该协调好细胞株的选择问题,体外的人手上有大把的细胞株可以选择,如果,体内的人不去和他们协调,那么将永远被牵着鼻子走,受累还不讨好,应该大家坐下来,一起选择20~30种细胞株作为常规的筛选细胞株,这就足够了,细胞株选择的时候考虑好方向(胃癌、肝癌、肺癌什么的)、靶点(EGF、vEGF等等),不能漫无边际的抓着哪个体内就的做哪个,谁也没有这个本事啊。以下给出一些细

4、胞株供大家参考:头颈部肿瘤没有特别好的细胞株,Hep2(喉癌)、CNE(鼻咽癌)凑活,比较慢,但是可以接受。肺癌不要和我提什么A549,不好伺候,NCI-H460(大细胞肺癌)还不错,生长速度快,成瘤率好,但是技术不好的话,均一度会差一些,水平过关的话,开始试验的时候SD应该为平均值的1/3,对药物很敏感,特别是紫杉醇,非常敏感。SPC-A-1(肺腺癌),马马虎虎过得去,速度不是很快,但是也还能接受。胃癌MNK-45,日本细胞株,公认度也可以,比较好。BGC-823,很好的公认度,生长有些慢。食道癌Eca-109,我们找不到其他的东西,只能用它,一般般,

5、有点不好伺候。前列腺癌PC-3、DU-145,都是不错的细胞株,用它们没错的。结肠癌HT-29吧,生长还可以,Lovo对药物的敏感性差了点。肝癌这个是比较头痛的一个领域,Bel-7402,SMMC7721只能说凑活,还有国内自己建株的QGY生长特性不错,但是公认度差了点。白血病我自己都没有做出来过,嘿嘿,K562和HL60都不好整。表皮癌A431,这家伙,棒极了,在我手上,每次试验只需要淘汰一两只,剩下的SD小于平均值的1/4,我很喜欢它,主要是EGFR高表达,做这方面的药物,少不了它!乳腺癌不要用MCF-7,MDA-MB-435、MDA-MB-468、

6、Bcap-37都不错,其中Bcap-37也是EGFR高表达。卵巢癌SK-ov-3不错的。宫颈癌比较麻烦,Hela细胞株自身的生长特性就不佳,另外安全性方面也很不好,女生勿近,我们以前做过一个C33A,还可以,对药物很敏感,生长比较慢,成瘤率也偏差,用的人也不多,但是没有办法阿。想起来的就这些,剩下的大家补充吧。二、1. 裸鼠的状态裸鼠的年龄,比如5-7w比9w容易成瘤,因为这时免疫系统不够强;或者如果裸鼠由于试验系统染菌而长毛或感染,则成瘤率可能会受影响2. 细胞接种量动物肿瘤一般接种2~600万/只就100%成瘤,而人癌则需要1000万以上才能较高的成

7、瘤3. 细胞状态肿瘤细胞的活力,生长状态,是否对数生长期,有无污染也对成瘤影响很大三、接种量 要查文献来确定接种量,在找不到任何相关资料的情况下,最高就用到1*107/0.2ml/site,再高也没有意义了。如果你的细胞很小,1*107/0.1ml也可以操作,不至于很粘稠,那么最好是1*107/0.1ml/site。查文献看他们的构建条件是什么样的,比如培养条件,接种量,接种位置什么的,是不是一定要用雌性鼠等等。      有的瘤株也有可能很容易成瘤,而且生长速度很快。建议用几只动物试试不同的接种浓度,万一能够长出来,而且还长得很快,那你就要根据情况选择

8、一个合适的浓度了。基本上一般认为比较合适的接种浓度有这么几个特征:1. 接种后1

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