微生物论文 自来水中细菌总数的测定

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1、自来水中细菌总数的测定摘要：水是生命之源，人的生存离不开水环境，各种天然水中常含一定数量的微生物。水中微生物的主要来源是：水中的水生性微生物（如光合藻类）、来自土壤径流、降雨的外来菌群和来自下水道的污染物和人畜的排泄物等。国家饮用水标准规定，每毫升水样细菌总数（37℃培养24h）不得大于100个［1］。本实验应用平板菌落技术测定水中细菌总数，计算出来的细菌总数仅是近似值。目前一般采用普通牛肉膏蛋白胨琼脂培养基在保证无菌的环境下，采取自来水的样品，利用培养基制作平板［2］。对自来水用平板菌落技术测定细菌总数，通过观测得到如下结

2、果：菌数为44个/mL，符合国家饮用水标准。自来水的微生物学检验，在保证饮水安全和控制传染病上有着重要意义，同时也是评价水质状况的重要指标。关键字：自来水平板菌落计数技术牛肉膏蛋白胨琼脂培养基细菌0引言在饮用水处理中，出厂水加氯消毒后进人管网，部分存活的微生物和管网中生物膜中的微生物会利用管网水中的微量生物降解有机物进行再生长［3］。水质的好坏对人们生活起着至关重要的作用，而判断水质的标准，微生物在水中的数量、种类是必不可少的。自来水的微生物学检验，在保证饮水安全和控制传染病上有着重要意义，同时也是评价水质状况的重要指标。我

3、国应用水卫生标准（GB5749-85）规定每毫升水样细菌总数37℃培养24h不得大于100个。长期以来，国内多采用异养菌平板计数法(HeterotrophicPlateCounts，HPC)和最大或然数法(MostProbableNumber，MPN)来测定饮用水中的活菌数．但由于饮用水中的贫营养环境有别于传统培养基提供的富营养环境，大多数在显微镜下观察到的细菌不能在传统培养基中生长(Nonculturable)，致使活菌计数结果偏低．近些年来，国外先后应用吖啶橙染色直接计数(AcridineOrangeDirectCoun

4、ts，AODC)、活菌直接计数(DirectViableCounts，DVC)等方法对饮用水中的细菌总数及活菌数进行快速、直接的镜检计数．一些新的染色方法，如采用5一氰基一2，3一联甲苯四唑盐酸盐(5Cyano一2，3一ditolyltetrazoliumchloride，CTC)、核酸探针(BacLight)等对活细菌计数，都取得了很好地效果．国内这方面的研究却未见报道［4］．因平板计数法相对简单，本实验即采用本方法，用普通牛肉膏蛋白胨琼脂培养基在保证无菌的环境下，采取自来水的样品，利用培养基制作平板。对自来水用平板菌落技

5、术测定细菌总数从而判断自来水是否符合国家标准，是否受到污染。1材料与方法1.1本实验于2010年10月26,27日在太原师范学院南区实验楼微生物实验室完成。`1.2材料1.2.1实验材料自来水1.2.2实验试剂牛肉膏蛋白胨NaCl1mol/LNaOH1mol/LHCl蒸馏水1.2.3实验仪器高压蒸气灭菌锅培养皿三角烧瓶天平量筒玻璃棒电炉药匙pH试纸（pH5.5-9.0）温度计1.3实验方法1.3.1灭菌1.3.1.1首先将内锅层取出,再向外锅内加入适量的水,使水面与三角搁架相平为宜。1.3.1.2放回内锅层,并加入用报纸包好

6、的培养皿、三角烧瓶、吸管。1.3.1.3加盖，并将盖上的排气软管插入内层锅的排气槽内。再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺旋，使螺旋松紧一致，勿使漏气。1.3.1.4用电炉加热，并同时打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷气。待冷空气完全排尽后，关上排气阀，让锅内的温度随蒸气压力增加而逐渐上升。当锅内压力上升到所需压力时，控制热源，维持压力至所需时间。本实验用0.1MPa,121℃,20min灭菌。1.3.1.5灭菌时间到后，切断电源，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降至“0”时打开排气阀，旋松螺旋，打开盖子，取出灭菌物

7、品。1.3.2水样的采取放开水龙头使水流5min后，用已灭菌的三角烧瓶接取水样，以待分析。1.3.3制备牛肉膏蛋白胨培养基1.3.3.1称量按培养基配方依次准确的称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。牛肉膏常用玻璃棒挑取，放在称量纸上，称量后直接放入水中，稍微加热，牛肉膏便会与称量纸分离，然后立即取出纸片。1.3.3.2溶化在上述烧杯中先加入少于所需要的水量，用玻璃棒搅匀，然后，在石棉网上加热使其溶解，将称好的琼脂放入已溶的药品中，再加热溶化，最后补足所损失的水分。1.3.3.3调pH在未调pH前，先用精密pH试纸测量培养

8、基的原始pH，如果偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入1mol/LNaOH，边加边搅拌，并随时用pH试纸测其pH，直至pH达7.6。反之，用1mol/LHCl进行调节。1.3.4细菌总数测定1.3.4.1灭菌吸管吸取1mL水样，注入其中一套灭菌的培养皿中。共做两个平皿。1.3.4.2分别倾注溶化