前白蛋白(prealbumin,pa) 紫外终点法

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1、项目前白蛋白(prealbumin,PA)方法紫外终点法目录1.检测原理2.标本采集与处理2.1受检者的准备2.2静脉采血2.3抗凝剂2.4标本处理3.试剂3.1试剂3.2校准血清3.3试剂与校准血清的稳定性4.仪器5.操作6.计算7.操作性能7.1精密度7.2准确度7.3灵敏度7.4可报告范围7.5特异性7.6干扰8.参考值9.临床意义附录A:参数1.检测原理血清中前白蛋白与其相应抗体在液相中相遇,立即形成抗原—抗体复合物,形成一定浊度。该浊度的高低在一定量抗体存在时与抗原的含量成正比。可利用标准浓度的前白蛋白生成的浊度在340nm处

2、吸光度,建立吸光度与浓度的标准曲线,从而计算出未知浓度的前白蛋白含量。2.标本采集与处理2.1受检者的准备:病人空腹12h,不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外,对于体检者,采血的季节都应做相关记录,因为样本中各项目的含量有季节性变动,为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。2.2静脉采血:除非是卧床的病人,一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布,会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟,一般从肘静脉取血,使用止血带的时

3、间不超过1分钟,穿刺成功后立即松开止血带。2.3抗凝剂:血浆使用肝素、EDTANa2(1mg/mL)作为抗凝剂。2.4标本处理:血标本室温放置30min~45min后离心分离血清或血浆,在两小时内检测完毕;如两小时内不能检测完毕,将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。3.试剂3.1试剂:本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司PA试剂盒,为液体双试剂,各组分如下:组成溶液的浓度R1TRIS缓冲液150mmol/LpH=7.4表面活性剂0.5%杀菌剂0.1%R2缓冲液100mmol/LpH=7.4PA抗血清12.5%稳定剂0.1%3

4、.2校准血清:使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。校准频次:空白定标:每日需做试剂空白定标。全点定标:试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围,需要全点定标。3.3试剂与校准血清的稳定性:原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后,在仪器中至少可保存30天。试剂储存在18-22℃稳定28天,试剂应避免污染。R1为无色液体,R2为无色或淡黄色液体,当试剂变色,按照试剂失效处理。多项校准血清在2-8℃储存至标签所示失效日期,复溶后-20℃保存,可稳定一个月,只可冻融一次,避免反复冻融。参见校准血清说明书。

5、试剂盒配备的水标准液在2-8℃储存至标签所示失效日期,开瓶后2-8℃储存避免污染,可稳定2个月。4.仪器KONELAB30型号仪器。性能:波长340nm,仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。5.操作样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆。本法为终点法。参数见后附,附录A。试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作,见仪器操作规程。6.计算计算标准液的吸光度的差值(A2-A1),建立标准液吸光度-浓度工作曲线。计算标本的吸光度差值,并在工作曲线上读取浓度值(mg/dL)。如标本的吸光度值大于标准液的最大值,则需稀释标本后,重新测

6、量。7.操作性能7.1精密度:批内CV<4.8%,批间CV<9.8%。7.2准确度:检测结果的相对不准确度≤±10%。7.3灵敏度:前白蛋白浓度为:1.0mmol/L时,吸光度为1.009~1.107。7.4可报告范围:血清与试剂R1、R2用量之比为1:50:10时,测定上限为52mg/dl。7.5特异性:测量值在给定值的90%-110%范围内。7.6干扰:内源性干扰物为Hb1000mg/ml、TG2000mg/ml、BIL30mg/ml、VitC300mg/ml对测试结果无明显影响。8.参考值10.0-40.0mg/dl9.临床意义前

7、白蛋白测定试剂盒临床上用于测定人体血清中前白蛋白的含量。血清前白蛋白(prealbumin,PA)是肝脏细胞合成的一种血清蛋白质,其主要生理功能是运输甲状腺素和维生素A,并具有胸腺激素活性,可通过促进淋巴细胞的成熟来增加机体的免疫力。PA对临床肝实质性损害有重要诊断价值。肝癌,肝硬化,慢性活动性肝炎,阻塞性黄疸患者均显著降低,是早期肝功能损伤的指标。此外,营养不良和急性感染的病人PA也可降低。附录A:参数

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