非发酵革兰氏阴性杆菌

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1、第十一章非发酵革兰阴性杆菌一、教学大纲要求(1)非发酵菌的概念、种类和初步鉴定特征。(2)假单胞菌属的分类、临床意义、细菌特性、实验室检查和耐药性。(3)铜绿假单胞菌的临床意义、细菌特性、实验室检查和耐药性。(4)荧光假单胞菌、恶臭假单胞菌、斯氏假单胞菌的临床意义、细菌特性和实验室检查。(5)不动杆菌属、寡养单胞菌属、产碱杆菌属和军团菌的临床意义、细菌特性、实验室检查和耐药性。(6)黄杆菌属和莫拉菌属的细菌特性和实验室检查。二、教材内容精要(一)非发酵菌的主要特点和分类非发酵菌(Nonfermenta

2、tiveBacilli)是一群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厌氧、无芽胞的革兰阴性杆菌;在分类学上分别属于不同的科、属和种,但生化特征十分接近,多为条件致病菌,主要引起院内感染。非发酵菌包括的菌种较多,主要有下列菌属:假单胞菌属(Pseudomonas)、不动杆菌属(Acinetobacter)、寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)、伯克菌属(Burkholderia)、产碱杆菌属(Alcaligenes)、无色杆菌属(Achromobacter)、莫拉菌属(Moraxe

3、lla)、金氏杆菌属(Kingella)、黄杆菌属(Flavobacterium)、艾肯菌属(Eikenella)、土壤杆菌属(Agrobacterium)、黄单胞菌属(Xanthomonas)、丛毛单胞菌属(Comamonas)、食酸菌属(Acidovorax)等。若某种未知的革兰阴性杆菌具有以下一种或几种特征,则怀疑其为非发酵菌:1.氧化发酵试验常显示是氧化型或产碱型。2.氧化酶阳性,非发酵菌中,除不动杆菌和嗜麦芽寡养单胞菌外氧化酶试验均为阳性。但并非所有氧化酶阳性的革兰阴性杆菌都是非发酵菌,如巴

4、斯德菌、气单胞菌、邻单胞菌和弧菌属等也是氧化酶阳性但不是非发酵菌。3.动力,非发酵菌大部分为专性需氧菌,在半固体培养基上观察动力不明显,h培养物悬滴法或湿片法。也可进行鞭毛染色,鉴别某些有动力的非发酵菌。第一节可用悬滴法或鞭毛染色法检测其动力。(二)假单胞菌属假单胞菌属(Pseudomonas)为严格需氧、有鞭毛、无芽胞、无荚膜的革兰阴性杆菌,氧化酶试验均阳性,是假单胞菌科的代表菌属。1.分类假单胞菌科由假单胞菌属及其亲缘关系密切的菌属(以前大部分属于假单胞菌属)组成,用于假单胞菌科分类的方案有两个,

5、一是根据细菌的表型特征分为7个主要的组,二是根据rRNA-DNA同源研究将假单胞菌科分为5个rRNA群。尽管假单胞菌科的绝大部分细菌原先都被归类于假单胞菌属,但现在只有rRNAⅠ群的细菌属于假单胞菌属(Pseudomonas),包括铜绿假单胞菌、荧光假单胞菌、恶臭假单胞菌、斯氏假单胞菌、曼多辛假单胞菌、产碱假单胞菌和假产碱假单胞菌7种细菌。rRNAⅡ群的细菌属于伯克菌属(Burkhokderia),包括13个种,其中类鼻疽伯克菌、葱头伯克菌、唐菖蒲伯克菌和皮氏伯克菌与人类疾病相关。鼻疽伯克菌是动物专性

6、寄生菌,在极少数情况下可传播给人(通常通过皮肤的磨损),是本菌属中唯一无动力的种,本属其他菌种与植物有关而与人类疾病无关。rRNAⅢ群的细菌属于丛毛单胞菌科(Comamonadaceae),本科包括两个菌属:丛毛单胞菌属(Comamonas)和食酸菌属(Acidovorax),前者包括土生丛毛单胞菌等三个菌种,后者包括敏捷食酸菌等三个菌种。rRNAⅣ群属于短波单胞菌属(Brevundimonas),包括两个菌种:缺陷短波单胞菌和泡囊短波单胞菌。rRNAⅤ群的细菌属于寡养单胞菌属(Stenotropho

7、monas),只有一个菌种——嗜麦芽寡养单胞菌。2.细菌特性假单胞菌属是一类无芽胞、有荚膜、散在排列的革兰阴性杆菌,菌体直或微弯、有单鞭毛或丛鞭毛,运动活泼;专性需氧,生长温度范围广,最适生长温度35℃,少数细菌可在4℃或42℃生长,营养要求不高,普通培养基上均可生长;氧化利用葡萄糖,氧化酶、触酶试验阳性,麦康凯上可生长。除曼多辛假单胞菌、产碱假单胞菌和假产碱假单胞菌外,假单胞菌属的细菌在生长过程中可产生各种水溶性色素,主要为黄绿色的绿脓素、青脓素等。3.临床意义人类非发酵菌感染中,假单胞菌占70%~

8、80%,主要为铜绿假单胞菌,其他较为常见的菌种有鲍曼不动杆菌、嗜麦芽寡养单胞菌、荧光假单胞菌、恶臭假单胞菌、产碱假单胞菌等。4.微生物学检验(1)检验程序见图11-1。医院环境用品、临床标本肉汤培养基分离培养基血平板麦康凯平板可疑菌落OF试验涂片革兰染色O革兰阴性杆菌、氧化酶阳性非发酵菌系列生化反应鉴定到种产绿脓素、青脓素42℃生长、极端单鞭毛乙酰胺酶阳性铜绿假单胞菌图11-1非发酵菌检验程序(2)标本采集根据感染部位不同分别采集痰液、分泌物、尿液以及医

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