snt1316-2011 牛海绵状脑病检疫技术规范

《snt1316-2011 牛海绵状脑病检疫技术规范》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、版权所有·禁止翻制、电子发售中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜１３１６—２０１１代替ＳＮ／Ｔ１３１６—２００３牛海绵状脑病检疫技术规范犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲狆狉狅狋狅犮狅犾犳狅狉犫狅狏犻狀犲狊狆狅狀犵犻犳狅狉犿犲狀犮犲狆犺犪犾狅狆犪狋犺狔２０１１０５３１发布２０１１１２０１实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局版权所有·禁止翻制、电子发售中华人民共和国出入境检验检疫行业标准牛海绵状脑病检疫技术规范ＳＮ／Ｔ１３１６—２０１１中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街１６号邮政编码：１０００４５网址ｗｗｗ．ｓｐｃ．ｎ

2、ｅｔ．ｃｎ电话：６８５２３９４６６８５１７５４８中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷开本８８０×１２３０１／１６印张２字数５７千字２０１１年１１月第一版２０１１年１１月第一次印刷印数１—１６００书号：１５５０６６·２２２５８８定价３０．００元标准分享网www.bzfxw.com免费下载版权所有·禁止翻制、电子发售犛犖／犜１３１６—２０１１前言本标准按照ＧＢ／Ｔ１．１—２００９给出的规则起草。本标准代替ＳＮ／Ｔ１３１６—２００３《牛海绵状脑病病理组织学检查方法》。本标准与ＳＮ／Ｔ１３１６—２００３相比，主要的技术性变化如下：———增加了牛

3、海绵状脑病的采样；———增加了蛋白免疫印迹方法；———增加了酶联免疫吸附试验方法（ＥＬＩＳＡ）；———增加了免疫层析试纸条检测方法。本标准参考了国际动物卫生组织（ＯＩＥ）的《诊断试验和疫苗标准手册》（２００８版）《ＭａｎｕａｌｏｆＤｉａｇｎｏｓｔｉｃＴｅｓｔｓａｎｄＶａｃｃｉｎｅｓｆｏｒＴｅｒｒｅｓｔｒｉａｌＡｎｉｍａｌｓ》）中第２．４．６章“牛海绵状脑病的诊断技术”。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国北京出入境检验检疫局起草。本标准主要起草人：马贵平、李炎鑫、李冰玲、刘全国、史喜菊、刘旭辉。

4、本标准所代替标准的历次版本发布情况为：———ＳＮ／Ｔ１３１６—２００３。Ⅰ标准分享网www.bzfxw.com免费下载版权所有·禁止翻制、电子发售犛犖／犜１３１６—２０１１牛海绵状脑病检疫技术规范１范围本标准规定了牛海绵状脑病的采样、组织病理学检查方法、免疫组织化学方法、蛋白免疫印迹方法、酶联免疫吸附试验方法、免疫层析试纸条检测方法等检测方法的技术要求和操作规范。其中组织病理学检查方法为免疫组织化学方法的辅助方法，免疫组织化学方法和ＳＡＦ蛋白免疫印迹诊断为确诊方法，蛋白免疫印迹方法、酶联免疫吸附试验方法和免疫层析试纸条检测方法为筛选方法

5、。本标准适用于牛海绵状脑病的诊断，也可用于其他动物的传染性海绵状脑病的诊断。２规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。ＧＢ／Ｔ６６８２分析实验室用水规格和试验方法ＧＢ１９４８９实验室生物安全通用要求３临床诊断３．１牛海绵状脑病（ＢＳＥ）平均潜伏期为４年～５年。病牛临床表现为精神异常、运动障碍和感觉障碍。３．２精神异常：主要表现为不安、恐惧、狂暴等，当有人靠近或追逼时往往出现攻击性行为。３．３运动障碍：主要表现

6、为共济失调、颤抖或倒下。病牛步态呈“鹅步”状，四肢伸展过度，后肢运动失调、震颤和跌倒、麻痹、轻瘫；有时倒地难以站立。３．４感觉障碍：最常见的是对触摸、声音和光过度敏感，这是ＢＳＥ病牛很重要的临床诊断特征。用手触摸或用钝器触压牛的颈部肋部，病牛会异常紧张颤抖，用扫帚轻碰后蹄，也会出现紧张的踢腿反应；病牛听到敲击金属器械的声音，会出现震惊和颤抖反应；病牛在黑暗环境中，对突然打开的灯光，出现惊吓和颤抖反应。４实验室诊断４．１采样及样品准备方法４．１．１材料４．１．１．１被检组织待检牛脑。４．１．１．２试剂１０％中性福尔马林溶液（见附录Ａ）；消

7、毒液：２％次氯酸钠，２ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠；９８％～９９％甲酸；无水乙醇；９５％乙醇溶液；７０％乙醇溶液；二甲苯；石蜡（熔点为５４℃～５６℃，５６℃～５８℃，５８℃～６０℃）。１标准分享网www.bzfxw.com免费下载版权所有·禁止翻制、电子发售犛犖／犜１３１６—２０１１４．１．１．３仪器设备脱水包埋盒、镊子、吸水纸、ｐＨ计、手术刀、专用取样勺、刀板、剪刀、锯、载玻片（多聚赖氨酸或其他等效物质处理过）、自动脱水浸蜡机、包埋机、冰箱、切片机、展片槽、烘干台、天平、温箱（３７℃）、ｐＨ计、计时器、安全设施、ＢⅡ生物安全柜、通风橱、一次性腈

8、手套、防护服、防护面罩或口罩、防护眼镜、防切割手套、鞋套、尖锐废弃物容纳盒、灭菌锅（１２１℃）、蒸汽灭菌器（温度不低于１３５℃，且蒸汽不外排）。４．１．２方法４．１．２．１牛脑组织的采集４．１．２．１．１疑