人骨形成蛋白7基因修饰的兔骨髓基质干细胞异位成骨实验

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1、人骨形成蛋白7基因修饰的兔骨髓基质干细胞异位成骨实验作者：闫露，罗二平，鱼兵，栗艳，沈敏，范清宇【摘要】 ［目的］螋通过人骨形成蛋白7(hu挪manbonemorph肥ogeneticprot蝈Ein7，BMP7)基因宾修饰的兔骨髓基质干细胞(程mesenchymals战temcells,MSC苎s)与聚乳酸-羟基乙酸(polycleclide恻coplycocli氐de,PLGA)支架复合粽，进行自体皮下异位成骨实赦验，探索BMP-7基因治滁疗与组织工程技术相结合的摹可行性。［方法］PLGA倒与腺病毒Ad-BMP-7竦感染后的兔MSCs共培养潇，电镜观察了解细胞在PL倥GA

2、上黏附、生长和合成分泌骨基质成分的情况；将转＊染基因的细胞和未转染基因鸣的细胞分别与PLGA支架贡复合，构建组织工程化骨并茬植入体内，通过组织观察新榈骨形成情况。［结果］制备鹗得到的PLGA为疏松多孔的网格样结构，具有一定的ひ韧性和强度。将腺病毒感染装的骨髓基质干细胞接种于修卅剪成一定形状的PLGA上，经电镜观察可见细胞贴附枚于材料表面和孔隙内并增殖。异位成骨实验证实空白对嫠照PLGA孔隙内无新骨形彩成，对照细胞组内有部分新生骨形成，而AdBMP7实验组形成的新生骨组瀑织面积更大(P【关键词】觇 基因治疗；骨形成蛋白；组织工程Abstrac淳t：［Objectiv

3、e囔］hBMP7genet溽herapycombin疚11/11edwithtissue斫engineering焰techniqueswa亨sexploredtoimproveosteog情enesisinanec婊topicbonefor僻mationmodeli甓nrabbits.［Me岙thod］PLGA(wi逊thdiameterof螫150～300μmand糗porosityof90%)wasprepare蹦dandautologo啮usbonemarrow薄stromalcells憩(bMSCs)infecぞtedbyadenovi娥ruscarringhB胜M

4、P7gene(Ad噱BMP7)werese偻ededontoelec裣tronicmicros薄copingwereusedtoobservecellmatrixin陷teraction.Th￠ecellsinfectedandnoninf共ectedwerecom鲸binedwithPLG捞Aataconcentr民ationof5×106擘cells/mltoco哭nstructtissu扦eengineeredboneswerefur雳therimplante糠dinto8rabbit⑨ssubcutaneou菱slyusingPLGA悠asblankco

5、ntr软ol(8implants弦pergroup).Si缒xweeksaftersurgery,theimplantswereev鬼aluatedwithhistologicalstainingandco缱mputerizedan食alysisofnewbǒoneformation钳.［Result］PLG褫Apreparedwas梏agridlikepo羞rousstructure,withdefiniもteductilitya锾ndstrength,a谄ndcouldbetrimmedintodiff钗erentmodels.俑Adenovirusi瞰nfec

6、tedMSCss醢eededontoPLG莳Ashowedhighl拐evelofprolif蟛eration,andm谔asssynthesis蛭ofcellmatrix洄wasobservedw裳ithelectroni抬ctheectopicb二oneformation姐model,PLGAal绞onecouldnoti秽nducenewbone敉formation.Th螭enewbonearea耔formedinthen系oninfectedM铁SCsgroupwas±骒%,whileAdBM绯P7groupwas±δ%,whichwashi觉gherthanthat

7、鲵11/11oftheformers衡ignificantly恽(P由支架材料、种子细胞篝和生长因子复合构建的组织工程骨为临床治疗顽固性的骨折不愈合和大型骨缺损带醴来了希望。然而，如何实现璇生长因子在特定的解剖部位玟持续稳定的释放，这个问题硎一直未得到有效解决。骨髓似基质干细胞(mesencㄒhymalstemcel装ls,MSCs)具有明确潦的成骨潜能，是骨愈合过程ù中骨化的重要细胞。它具有忙来源丰富，采集方便，容易螭在体外培养、诱导、扩增的礻特点，是组织工程化