心肌酶的检测方法

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时间:2018-07-17

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1、心肌酶谱的检测方法1检验目的规范检测“肌酸激酶(CK)”的过程。2适用范围适用于正常人和病人血清“肌酸激酶(CK)”的测定。3职责3.1责任人:生化室当班工作人员。3.2质量要求:按照《临床化检验室内质量控制作业指导书》进行室内质控,合格后可发报告。3.3完成时间:门诊检验结果当天下午2:30发报告;病房检验结果当天下午4:00发报告。4检验原理:酶偶联法CK磷酸肌酸+ADP-→葡萄糖-6-磷酸+ADPG6PDH葡萄糖-6-磷酸+NADP-→6-磷酸-葡萄糖酸+NADPH+H+,NADPH的生成。引起在340nm吸光度上升,上升的速率与CK的活力成正比,可以用(340nm和405nm)速率

2、法测量。5样本要求:5.1样本类型样本量:空腹取静脉血3ml(血清或肝素抗凝血浆),按顺序将申请单和样本一一对应编号。认真检查检验材料、检验目的、病人姓名、性别、科室、床号、血液量等。5.2容器和抗凝剂种类:黄色胶头试管,含促凝剂;红色胶头普通生化管;肝素钠、肝素锂抗凝试管。5.3样本处理方法将已编号的样本放入37℃的水温箱中,待血液自动凝固后,取出配平离心,3000r/min×5min。将血清分离放入DADEBEHRINGRXL专用样本杯后,仔细观察是否符合要求,否则申请重新采集样本;上雅培AEROSET全自动生化分析仪直接将试管放入样本架上。5.4样本的稳定性:血清、血浆肌酸激酶(C

3、K在20-25℃放置可保存1天,2-8℃贮存最多7天;冷冻保存可超过1个月。已检测标本2—8℃保存3天。6仪器:杜邦RXL全自动生化分析仪雅培AEROSET全自动生化分析仪7试剂:7.1杜邦RXL全自动生化分析仪配套试剂;雅培AEROSET全自动生化分析仪配套试剂。7.2杜邦RXL全自动生化分析仪配套试剂准备:将肌酸激酶(CK)试剂船按仪器操作说明书加入仪器试剂仓内。避光,2-8℃保存24hr,15-25℃保存5hr。7.3雅培AEROSET全自动生化分析仪配套试剂准备:按仪器作业指导书准备试剂,未开封试剂在贮存于15-30℃下时,稳定性可保持到有效期截止时为止,开封后试剂上机的稳定期为4

4、2天。8校准8.1来源:杜邦RXL、雅培AEROSET配套校准液。8.2贮存条件:原校准物在0~4℃以下可保存至有效期8.3准备:直接用注射器抽取原液0.3ml备用。8.4校准条件:A:质控失控;B:定期校准;C:试剂更换批号。8.5校准后的稳定期可保持约41天(984小时),每次更换批次时都应进行校准。按照您的实验室所建立的质控要求,使用至少1个水平的质控品进行校准曲线验证。如果质控结果不在可接受范围值内,则需要进行重新校准。9程序步骤9.1样本编号→样本分离→检验仪器准备、试剂准备→室内质控测定、样本测定、资料录入→分析室内质控、分析测定结果→打印报告单→结果审核签发9.2上机操作:见

5、仪器作业指导书.10质量控制10.1来源:朗道质控物。10.21个数:1个水平10.3贮存条件:质控物存放于2-8℃可保存至有效期,溶解后25℃可保存12小时,4℃可保存5天,分装存放于-20℃,可稳定一个月。10.4准备:每瓶加3.00ml相配稀释液充分溶解后分装。溶解质控血清时间为30分钟,分装存放于-20℃。10.5程序:10.5.1每隔24小时运行至少1个质控水平(正常值)。10.5.2如果质控结果不在实验室所规定的可接受范围值内,则患者值可疑。需使用新鲜质控品重复质控。10.5.3如果质控结果仍不在可接受标准范围内,则需重新校准。10.5.4每次更换试剂批次后,都要检查质控结果和

6、可接受标准。10.5.5操作:详见质量控制作业指导书10.6分析参数10.6.1杜邦RXL全自动生化分析仪分析参数样本量(μl):14试剂量(μl):R1:95R2:255稀释液量:方法:RATE   预设系数:C0:-8.85 C1:8.044主波长(nm):340次波长(nm):405温度(℃):37反应时间(min):3反应方向:正反应(+)线性范围:0-800U/L10.6.2雅培AEROSET全自动生化分析仪分析参数Reactionmode:rateupReadtime24-33Blankreadtime:14-16Flex:22-25样本量(μl):8试剂量(μl):R1:16

7、0R2:40主波长(nm):340次波长(nm):412温度(℃):37Calibrationmodefactor4127线性范围:0-800U/L11结果计算以复合校准品校准值校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结果,以U/L报告。12生物参考区间:24~170U/L13可报告区间:20-1600U/L14危急值:暂无规定15性能参数15.1本法线性范围为20-1600U/L,不准确度允许范围±3

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