运动解剖学实验指导

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1、运动解剖学实验指导 实验一   细胞和组织的显微观察一、实验目的(一)正确使用显微镜。(二)掌握细胞的基本形态结构,理解其形态。 (三)掌握上皮组织、结缔组织的结构特点,了解上皮组织的分布及功能特点,了解结缔组织的分类。 (四)掌握骨骼肌、肌原纤维的结构,掌握神经元的结构特点。二、实验原理利用显微镜观察不同的细胞与组织结构。三、实验器材 细胞结构模型、细胞组织切片、显微镜等。四、实验步骤(一)学习显微镜的一般构造(图3-1)显微镜是进行细胞、组织研究和实验的重要仪器之一。显微镜可分为普通光学显微镜和精密度很高的电子显微镜。普通光学显微镜又可

2、分为单目镜、双目镜等多种类型。在实验课中,双目镜常用于示教,学生实验多用单目镜。现重点介绍普通单目镜的一般构造。1.镜筒:镜筒装接目镜。2.旋转盘:接于镜筒下方,嵌装物镜,可以旋转。3.镜台:放置玻片的平台,中央有一圆孔,光线可通过此孔,两侧装有压片夹或推进器。4.光圈:位于集光器上方,可任意开闭,以调节光线强弱。5.集光器:由几片透镜组成,用以聚集光线,可上下移动,以调节光度。6.副镜台调节器:转动时可使副镜台上下移动,以调节亮度。7.反光镜:为集光器下方的圆镜,有平凹两面。凹面镜有聚光作用,光线弱时使用。平面镜只有反射作用,光线强时使用。此镜

3、片可向各方向转动,收集光源。8.目镜:嵌于镜筒之顶端,刻有5×或l0×或15×等字样,表示该目镜的放大倍数。9.物镜:嵌于旋转盘下,分低倍、高倍和油镜3种,上面均刻有放大倍数,如l0×或40×或100×等。低倍镜放大约10倍,镜头较短。高倍镜放大约40倍,镜头较长。油镜放大约90~100倍,镜头最长,有红线或黑线作标记,用时在镜头与玻片之间要加香柏油。10.镜臂:位于中部,呈弓形,作支持和握取用。11.细调节器:位于粗调节器下方,调节轮较小,旋一圈可升降镜筒0.lmm。12.粗调节器:位于镜筒两侧,调节轮较大,旋一圈可升降镜筒10mm。13.镜座

4、:在最下部,呈马蹄形,作支撑用。   (二)显微镜的使用方法   1.对光   转动旋转盘,使低倍镜置于镜筒直下方,放大光圈,适当下降集光器,两眼睁开,用左眼在目镜上观察(注意两眼睁开,勿用右眼),转动反光镜,使镜内视野完全明亮为止。   2.装片   用粗调节器升高镜筒,将切片平置于镜台上(盖玻片必须朝上);移动切片使需观察的部分移至圆孔中央,并用压片夹固定(如有推进器时,可先将切片固定,再将标本移至圆孔中央)。   3.使用低倍镜   向前转动粗调节器,应从镜侧密切注视,使镜筒慢慢下降至距离玻片约3mm时为止。然后,左眼注视目镜,向后转动粗调

5、节器,使镜筒缓慢上升至见到物象。再转动细调节器,将物象调节到最清晰时为止。   用低倍镜观察视野广,能看见较多结构,宜多下功夫观察和寻找组织结构,不要急于使用高倍镜。   4.使用高倍镜   在低倍镜下将需观察的结构移至视野中央,再把高倍镜转至镜筒直下方,通常只需转动细调节器调节焦距即可得到清晰的物象,如光线太弱,可开大光圈,升高集光器。在使用非原配镜头的显微镜时,则应先用粗调节器升高镜筒,再调换高倍镜,按使用低倍镜的步骤进行。   5.使用油镜   在使用油镜之前需将油镜头和玻片用二甲苯或1:1乙醚纯酒精拭净,将高倍镜下已找到的结构,移至视野中

6、央。接着,将镜头升高约1cm,将油镜头转至镜筒直下方,滴香柏油一滴于切片上欲观察处(注意滴油时切勿产生气泡)。从侧面注视镜头使之慢降至镜头浸入油滴,约与玻片相隔0.5mm,然后用左眼注视目镜,转动细调节器使物象至最清晰为止。使用油镜时,需要更强的光线,用后须用擦镜纸擦净镜头和玻片上的油迹,再用1:1乙醚纯酒精拭净。(三)观察细胞类型、细胞的形态结构取细胞模型,观察细胞膜、细胞质和细胞核3部分,辨认细胞质的细胞器,分别观察它们的形态结构,思考它们的功能。(四)观察四种组织的结构特点1.取各类上皮组织切片,观察各类上皮组织的结构。2.取疏松结缔组织与

7、致密结缔组织切片,用显微镜观察其结构特点,取软骨组织与骨组织切片,用低倍镜观察,可见哈佛氏管、哈佛氏骨板和间骨板;内、外环骨板由于制片时不能同时保留故不能清晰辨出。用高倍镜观察,可见骨板间有许多呈黑色的卵圆形小腔,即骨陷窝,四周的黑色小支,即骨小管,还可见相邻骨陷窝之间的骨小管彼此相通。3.取骨骼肌纵切片与横断面切片,用低倍镜和油镜切片或幻灯片观察,Z线、H带、I带、肌节等,观察骨骼肌细胞的结构特点。4.取脊髓灰质涂片,可见胞体与胞突(轴突与树突),选择一较清晰的神经元,用低倍镜或高倍镜观察神经细胞质内尼氏体、核仁。五、注意事项(一)使用显微镜 

8、  携取:一手握镜臂,另一手托住镜座。放置:镜台向前,镜臂向后,置于工作台偏左侧。保护:使用时,勿使灰尘、湿气、水滴、药品等沾染显微镜的

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