《运动解剖学》实验指导

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1、《运动解剖学》实验指导实验一细胞和组织的显微观察(2学时必做组织学验证性实验)一、实验目的(一)正确使用显微镜。(二)掌握细胞的基木形态结构,理解其形态。(三)掌握上皮组织、结缔组织的结构特点,了解上皮组织的分布及功能特点,了解结缔组织的分类。(四)掌握骨骼肌、肌原纤维的结构;掌握神经元的结构特点。二、实验原理利用显微镜观察不同的细胞与纽织结构。三、实验器材细胞结构模型、细胞组织切片、显微镜等。四、实验步骤(一)学习显微镜的一般构造(图1)显微镜是进行细胞、组织研究和实验的垂要仪器之一。显微镜可分为普通光学显微镜和放

2、大倍数、粘密度很高的电子显微镜。普通光学显微镜乂可分为单「

3、镜、双「

4、镜等多种类型,在实验课屮双目镜常用于示教,学生实验多川单「I镜。现重点介绍普通单目镜的一•般构造。1.镜座:在最下部,呈马蹄形,作支撑用。2.镜臂:位于屮部,呈弓形,作支持和握取川。3.镜筒:镜筒为装接目镜。4.目镜:嵌于镜筒之顶端,刻有5X或10X或15X等字样,表示该目镜的放人倍数。5.旋转盘:接于镜筒下方,嵌装物镜,可以旋转以更换物镜。6.物镜:嵌于旋转盘下,分低倍、高倍和油镜3种,上而均刻有放大倍数,如10X或40X或100X等。低倍镜放人

5、约10倍,镜头较短。高倍镜放人约4()倍,镜头较长。油镜放人约90-1(X)倍,镜头最长,有红线或黑线作标记,川时在镜头与玻片之间要加香柏油。7.粗调节器:位于镜筒两侧,调节伦较人,旋一圈可升降镜筒lOmmo8.细调节器:位于粗调节器下方,调节伦较小,旋一圈可升降镜筒0.lnirno9.镜台:放置玻片的平台,中映有一圆孔,光线可通过此孔,两侧装有压片夹或推进器。10.副镜台:在镜台下方,包括下列3种部件:(1)集光器。由儿片透镜组成,川以聚集光线,可上下移动,以调节光度。(2)光圈。位于集光器上方,可任意开闭,以调节

6、光线强弱。(3)滤光圈。可放置不同颜色的滤光片。1.副镜台调节器:转动时可使副镜台上下移动,以调节亮度。2.反光镜:为集光器卜方的圆镜,有平凹两而,凹而镜有聚光作用,光线弱时使川,平血镜只有反射作用,光线强时使用。此镜片对向各方向转动,收集光源。(二)显微镜的使川方法1.对光转动旋转盘,使低倍镜置丁•镜筒直下方;放大光圈;适当下降集光器;两眼睁开,用左眼在H镜上观察(注意两眼睁开,勿用右眼);转动反光镜,使镜内视野完全明亮为止。2.装片用粗调节器升高镜筒,将切片平置于镜台上(盖玻片必须朝上);移动切片使需观察的部分移

7、至圆孔中央,并用压片夹固定(如有推进器吋,可先将切片固定,再将标本移至圆孔中央)。3.使川低倍镜向前转动粗调节器,应从镜侧密切注视,使镜筒慢慢下降至距离玻片约3rmn时为」I:。然后,左眼注视目镜,向后转动粗调节器,使镜筒缓慢上升至见到物彖。再转动细调节器,将物象调节到最清晰时为止。丿IJ低倍镜观察视野广,能看见较多结构,宜多下功夫观察和寻找组织结构,不要急于使用高倍镜。4.使用髙倍镜在低倍镜下将石观察的结构移至视野中央,再把爲倍镜转至镜筒直下方,通常只需转动细调节器调节焦距即可得到清晰的物象,如光线太弱,可开大光圈

8、,升髙集光器。在使川非原配镜头的显微镜时,则应先用粗调节器升高镜筒,再调换高倍镜,按使用低倍镜的步骤进行。5.使用油镜在使用油镜之前需将油镜头和玻片用二甲苯或1:1乙聪纯酒精拭净,将高倍镜下已找到的结构,移至视野中央。接着,将镜头升髙约lcm,将油镜头转至镜筒直下方,滴香柏油—•滴于切片上欲观察处(注意滴油时切勿产生气泡)。从侧而注视镜头使之慢降至镜头浸入油滴,约与玻片相隔0.5mm,然后用左眼注视目镜,转动细调节器使物象至最清晰为止。使用油镜时,需要更强的光线,用后须用擦镜纸擦净镜头和玻片上的油迹,再用1:1乙離纯

9、酒精拭净。(三)观察细胞类型、细胞的形态结构取细胞膜型,观察细胞膜,细胞质和细胞核3部分,辨认细胞质的细胞器,分别观察它们的形态结构,思考它们的功能。(四)观察四种纽织的结构特点。1.取各类上皮组织切片,观察各类上皮组织的结构。2.取疏松结缔组织与致密结缔组织切片,用显微镜观察其结构特点,取软骨纽织与骨组织切片,用低倍片观察,可见哈佛氏管、哈佛氏骨板和间骨板;内、外环骨板山于制片时不能同时保留故不能清晰辨出。用高倍片观察,可见骨板间有许多呈黑色的卵圆形小腔,即骨陷窝,四周的黑色小支,即骨小管,还可见相邻骨陷'禽之间的

10、骨小管彼此相通。3.取骨骼肌纵切片与横断面切片,用低倍镜和油镜切片或幻灯片观察,Z线、H带、1带、肌节等,观察骨骼肌细胞的结构特点。4.取脊髓灰质涂片,可见胞体与胞突(轴突与树突),选择一•较清晰的神经元,或高倍镜或幻灯片,观察神经细胞质内尼氏体、核仁。五、注意事项1.使用显微镜携取:一手握镜臂,另一手托住镜座。放置:镜台向前,镜臂向后,置于工

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