氨基酸分析仪培训讲义

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1、大家好！日立氨基酸分析仪培训讲义天美科技有限公司目录一、氨基酸分析仪简介二、氨基酸三、氨基酸分析仪基本分析原理四、氨基酸分析仪法与HPLC的比较五、样品的制备六、影响氨基酸分析的各种因素七、应用日立氨基酸分析仪简介一、氨基酸分析仪：（一）氨基酸分析仪的构成（见图1)（二）氨基酸分析仪的流程图（见图2)（三）特点一、氨基酸分析仪：目前世界上只有为数很少的几个国家，注重对氨基酸分析仪进行研制。不同厂家、不同型号的氨基酸分析仪也不多，但总的趋势一般都是向微量、快速、自动化方向发展。近年来，有的厂家也注意到经济、简单化的问题，这是在氨基酸分析仪研制发展上一个新的动向，也

2、是使用者值得注意的一个问题。目前国内可见到的氨基酸分析仪，大多数是日立公司的产品从最早的KLA-5型、835-50型、8500型、8500A型、到L-8800型以及最新型号产品L-8900型。从目前的情况来看，别的仪器产品厂家有的已退出中国市场、且仪器的使用年限已有20几年，具我们了解的情况来看，基本大多数都已报废停用（如贝克曼121M、6300型）。近期进入国内市场的一两家仪器生产商，在国内的占有率也非常小、而且售后服务也不到位。日本日立公司的一切从最早的分析时间12小时、4小时、70分钟、直至降到现在的30分钟一个分析程序（快速20分钟），而且操作软件非常得心

3、应手简便快捷，最小检测限为3pmol。无论从市场占有率上、还是售后服务上都是最好的。下面将日立氨基酸分析仪的构成、流程图及特点给大家介绍如下：（一）氨基酸分析仪的构成1、输液单元（泵与管路）作用：输送缓冲液、反应液在流路系统中流动。2、进样单元（自动进样器）作用：将样品在流动相的带动下送入仪器体系中。3、分离单元（离子交换柱、柱温箱）作用：主要是样品的分离、将混合的样品分离成单一组分。4、反应单元（反应柱、反应温度加热设备）作用：被分离的单一组分物质与反应液在反应单元反应、生成可检测物质。5、检测单元（分光光度计）作用：准确检测单一组分物质的电能信号（mv).6、

4、程序控制、数据处理（工作站）作用：仪器的运行程序控制、检测结果的处理。从图、表面看（1）自动进样器（2）泵1、泵2单元（3）电磁阀（4）除气（5）废液槽（6）检测器（7）氮气单元（8）柱温箱（9）过滤器（10）混合器（11）反应柱单元（12）试剂和清洗液（13）保护罩。左侧：电源开关。后部通讯接口、电源连接器、氮气源连接器。(二）氨基酸分析仪流程图见图（2）（三）日立氨基酸分析仪特点1、优异的性能（1）高灵敏度：以蛋白水解液标准为例可检测到3pmol，是灵敏度最高的仪器之一。（2）快速、高分辨率：日立氨基酸分析仪，目前在各种氨基酸分析仪中分析时间是最短的，水解氨基

5、酸分析时间只有30分钟。能在短短的30分钟之内将18种氨基酸分离开来、关键在于采用了最新的日立专用3um阳离子交换树脂填充的高分辨率的分析柱，同等条件下对于填充柱来讲，填充微粒越细的树脂其理论塔板数越高，其分离效果也越好，而且此种填充柱还可以在高流速下进行工作，大大提高了分辨率和工作效率。（3）专利的反应柱技术：日立氨基酸分析仪采用仅长4cm内填惰性均匀小颗粒金刚砂日立公司专利的反应柱，此种柱中小颗粒填料不但令液体流动平缓均匀，而且在135度最佳反应温度下大大提高了比表面积，完全避免了样品峰的扩散及重叠现象，从而保证了样品在高灵敏度、快速分析过程中很好的进行最佳状

6、态的衍生反应。而别的公司大多采用反应圈技术，在传统的反应圈中样品带在分离时容易扩散、引起重叠效应，液体在反应圈中流动时中间部位快、两边慢，从而引起样品带的加宽，反应后会产生峰重叠。而通过在反应柱中填充的小颗粒，流动相移动平缓、流动均匀，无样品带加宽现象，峰显高斯分布，更不会产生峰重叠。（4）泵（高速反馈、实时控制技术）：日立氨基酸分析仪采用双柱塞串联往复泵，此种泵采用了高速反馈实时控制技术，最大的优点是脉动小、流速稳定、噪音低，所采用的这种泵它可保证所供液体流量恒定、流速稳定。流量是否恒定关系到峰的重复性、分辨率和定量的准确。流速如果不稳定会产生脉动，它可导致检测

7、器噪音增大、最小检测量增加灵敏度下降。实时控制技术系统采用了一个高速传感器，对内部压力进行实时监控，在柱塞换向的时间区段内、系统压力有所下降趋势时快速反馈给cpu、并发出指令使步进电机加快运转、消除脉动，反之当系统压力升高时则电机减慢运行。（5）高效的光学系统：日立氨基酸分析仪，分光光度计采用了高能量卤素灯、高效的光学系统。光谱为：消象差凹面衍射光栅，这种光直接入射到光栅的高效单色器系统，即使在很小的空间也能造就优异的光路、这种光栅同时还能聚光及消除象差、仪器长时间工作测定时也非常稳定。2、独特的设计不需要额外的空间，只要打开前门就可以进行缓冲液、反应液和分离柱的

8、更换、废液