布鲁氏菌病原学血清学诊断课件

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1、布鲁氏菌病原学、血清学诊断丽水市疾病预防控制中心兰进权主要内容：1、布鲁氏菌病原学；2、布鲁氏菌诊断标准；3、布鲁氏菌血清学实验的几种方法。（一）布氏菌概述1887年英国医生布鲁氏首先从死于“马尔他热”的英国士兵脾脏中分离出羊种布氏菌后，布鲁氏菌属（Brucella)，包括6个种19个生物型。羊种布氏菌（Brmelitensis)牛种布氏菌（Brabortus)猪种布氏菌（Brsuis)沙漠森林野鼠种布氏菌（Brneotomae)绵羊附睾种布氏菌（Brovis)犬种布氏菌（Brcanis)布鲁氏菌

2、的发展史年份菌名发现人国家宿主1887羊种菌Bruce马尔他羊1897牛种菌Bang丹麦牛1914猪种菌Traun美国猪1953绵羊附睾种菌Buadle新西兰公绵羊1956沙漠森林鼠种菌Stoennen美国沙漠森林野鼠1966犬种菌Carmichael美国小猎犬（一）病原学概述布鲁氏菌属（Brucella)包括6个种19个生物型。牛种布氏菌（Brabortus)：1、2、3、4、5、6、7、9型羊种布氏菌（Brmelitensis)：1、2、3型猪种布氏菌（Brsuis)：1、2、3、4、5型沙漠森林野鼠种布氏菌（Br

3、neotomae)绵羊附睾种布氏菌（Brovis)犬种布氏菌（Brcanis)1、形态布鲁氏菌是一组微小的球状、球杆状、短杆状细菌；宽约0.3—0.5微米、长0.6—1.5微米。电镜下见到的羊种菌为明显的球杆状、牛种菌和猪种菌为短杆状；6种布鲁氏菌靠形态很难区分，一般来说，羊种菌最小，牛种菌产次之，猪种菌较大；布鲁氏菌没有鞭毛，不形成芽胞和夹膜。2、染色涂片染色检查多为单个排列，少见成对短链排列。布鲁氏菌可被碱性染料着色；革兰染色阴性；柯兹罗夫斯基提出用0.5%沙黄水溶液染色，加热出现气泡，水洗后用0.5%孔雀绿或1%

4、美兰复染，布鲁氏菌呈红色，其它细菌呈绿色和兰色。布鲁氏菌：革兰阴性，长约0.6-1.5μm,宽约0.3-0.6μm,用柯氏染色染成红色,无鞭毛、不形成芽胞和荚膜。3、培养特性1.布鲁氏菌培养营养要求高：需要各种氨基酸和各种金属离子，有的菌种需要血清才能生长。2.生长缓慢：一般需经4—6天，有的甚至21—30天才能长出菌落。3.生长所需温度：20—40℃，最适为37℃,超过42℃则不生长。4.C02:绵羊附睾种菌和牛种菌的某些生物型菌需严格的C02(5～10％)。（4）细菌变异布氏菌在各种理化因素作用下易发生变异;即从光

5、滑型（S）变为非光滑型——粗糙(R)或粘液(M)状。变异菌落常比光滑型稍长，表面有颗粒。菌落颜色为灰白色或褐色，（5）抵抗力布氏菌在合适条件下能生存很长时间，有较高的抗灭活能力。对湿热、紫外线和各种射线以及常用的消毒剂、抗生素、化学药物比较敏感；对低温和干燥有较强的抵抗力，故可用冷冻真空干燥法保存菌种。布氏菌在自然条件下的生存能力自然条件生存时间（天）自然条件生存时间（天）水50—120奶油25—65尘4—120奶酪21—90粪21—72冻肉14—47畜舍墙棚4—150腌肉20—45地面4—150培养基60—318衣

6、服30—80干燥胎膜120皮毛45—120腐败脏器死亡鲜牛乳2—550人工胃液20—50(1)对物理因子的抵抗力物理因子对布氏菌的影响物理因子生存时间物理因子生存时间湿热56℃60分钟以上干热80℃60分钟以上湿热63℃60分钟以上干热90℃60分钟以上湿热80℃30分钟以上干热100℃7分钟以上湿热90℃10分钟以上直射阳光1～4小时湿热100℃半分钟死亡散射阳光7～8天(2)对化学因子的抵抗力化学因子对布氏菌的影响药物名称浓度(%)生存时间药物名称浓度(%)生存时间新洁尔灭0.130秒

7、钟漂白粉0.2～2.52分钟以内石炭酸1～21～5分钟红汞27分钟来苏儿21～3分钟过锰酸钾0.1～0.27～15分钟来苏儿31分钟以内甲醛0.220分钟以上氯亚明0.25～7分钟乳酸0.51分钟以内氯亚明0.53～5分钟氢氧化钾23分钟升汞0.051分钟以内肥皂220分钟以上主要化学药品对三型菌的影响──────────────────浓度布鲁氏菌生存时间(分钟)化学药品名称──────────────(%)羊型牛型猪型─────────────────

8、─石碳酸1≤5≤3≤5石碳酸2121来苏儿2≤3≤1≤3来苏儿3瞬间瞬间瞬间漂白粉澄清液0.21-2瞬间瞬间漂白粉乳剂2.51-2瞬间瞬间肥皂水2≥20≥20≥20─────────────────────────────（二）布鲁氏菌分离培养采用何种方法、取何种材料、何种培养基实验室条件布氏菌的分离培养一、从可疑病人分离布氏菌血