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1、疑难血型问题分析与 血型研究新进展江苏省血液中心刘衍春E-mial：lyc60@126.com025-85411563-65162014-06-27常州一疑难血型问题分析何为血型？表型多糖类多肽类蛋白类聚糖，如ABO、P1Pk、Lewis、H、I、GLOB除左侧血型外的其它血型称组织血型抗原或糖抗原。存在红细胞及中枢以外的组织和体液中。可结合可游离于血浆中。自然界有相似的物质。发育晚。称器官血型抗原。主要存在于红细胞和组织细胞。糖蛋白、脂蛋白。发育早。基因型何为疑难血型（临床）血型工作中所需各种血型抗体试剂各种工具细胞酶/化学试剂各种仪
2、器各种检测方法//实验技术工具细胞标准细胞筛选细胞谱细胞酶处理细胞特定抗原细胞用于反定型等用于意外抗体的发现用于抗体的鉴定对冷抗体检出极敏感;须设阴、阳性对照试验;增强Rh及Kidd系统、抗-Lea、抗-Leb、抗-P、抗-H等凝集反应,对M、N、S、s、Fya及Fyb、Lua、K、Kidd、Sutter等抗原决定簇有破坏作用，所以酶法必须与其他方法合用。使用的蛋白酶一般以能检出128~256倍稀释的抗-D为酶活性的大致标准。须冷冻保存。试剂抗原减弱或改变蛋白水解酶M,N,S,Fya,Fyb,Yta,Ch,Rg,Pr,Tn,g,Mia/
3、Vw,Cla,Jea,Nya,JMH,someGe,InbDTT/AETYta,JMH,Kna,McCa,Yka,LWa,LWb,allKell,Lutheran,Dombrock,andCromerZZAP以上抗原AET：溴化~2胺乙基lisothiouroniumDTT：二硫苏糖醇ZZAP：DTT和蛋白酶的混合物酶与试剂的作用无花果酶、木瓜酶、胃蛋白酶破坏或减弱M,N,S,Fya,Fyb,Yta,Ch,Rg抗原；增强Rh,P,I,H和Lewis抗原。酶处理的细胞可以增加抗JKa，抑制抗JKb的反应病人血清(抗E、抗c)Ps结果结论细
4、胞1CCDEE+抗E细胞2ccDee+抗c特定抗原细胞如：标本有混合抗E，抗c不能排除时设计抗原组合反应条件反应温度增加反应时间改变细胞/抗体比例某些抗体在室温或以下有较好的特异性。在冷的温度下自身对照是特别的重要，因为不少血清含抗-I或其他冷自身抗体。抗体最高可达5-10倍于细胞体积，在37℃60’不时摇动，增强抗体反应。但Liss、PEG介质不适用。低离子反应需要一定的比例。盐水和白蛋白介质需时要30-60’，Liss、PEG不可延长，会减低凝集。改变pHpH6.5使抗M反应增强；pH＜6.0时，Rh、Duffy、Kidd和MNS血
5、型失去反应抗原灭活DTT/AET，ZZAP不变的原理多样的技术试管法凝聚胺法凝胶介质法微孔板法白蛋白介质法低离子Liss强度实验抑制技术Lea,Leb,P1,Sda,ChidoandRodgers物质如怀疑有抗P1可加入P1物质2%或30%的牛血清白蛋白溶液适用Rh系统，对Kell敏感性低于抗人球Liss红细胞悬液当天使用为好，否则，可使Fya、Fyb等发生变性，抗原性消失，并在上清液中出现阻止抗-Fya、抗-Fyb特异性的活性物质。有利于混合外观的发现适合于大规模筛查盐水IgM、抗人球IgG等吸收与放散实验吸收实验放散实验吸收放散实验
6、热放散冻融放散乙醚放散毛地黄放散磷酸氯喹放散冷甘氨酸放散甘氨酸EDTA放散热放散—IgM甘氨酸放散--IgG甘氨酸放散Ac、Bc、Oc：游离液A’c、B’c、O’c：放散液甘氨酸放散：应用液：红细胞=2:1；热放散：生理盐水：红细胞=1:1。凝集☆血型抗原血型系统血型集合901高频系列血型系列700低频系列22个血型引起输血反应，12个血型引起HFDN---1血型HTR(AHTR/DHTR)HFDNABO严重AHTR、DHTR严重、中等MNS-M、-N，37℃罕见AHTR、DHTR；-S、-s、-U及其他引起ATHR、DHTR-S、-s
7、、-U及其他引起~，-M罕见P1Pk/p罕见引起37℃AHTR、DHTR/pRh严重AHTR、DHTR严重Lutheran-Lua、-Lub引起中等强度DHTR；抗Lu8，AHTRKell严重AHTR、DHTR严重Duffy-Fya、-Fyb引起AHTR、DHTR；-Fy5引起DHTR-Fya、-Fyb引起HFDNKiddDHTR;-Jka、-Jk3引起AHTR不常见Diego-Dia引起DHTR，但少见；-Dib引起DHTR；-Wra引起HTR-Dia、-Dib、-Wra、-Wrb引起严重Yt-Yt引起少见的HTRDombrock-D
8、oa、-Dob引起AHTR、DHTR22个血型系统引起输血反应，12个血型引起HFDN---2血型HTR(AHTR/DHTR)HFDNColton-Coa引起AHTR、DHTR，-Coa、-Co3引起中等H
