肿瘤免疫治疗新方法

《肿瘤免疫治疗新方法》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、自体细胞免疫疗法CIK（cytokine-inducedkiller，中文名：[自体细胞免疫疗法]多种细胞因子诱导的杀伤细胞）是将人外周血单个核细胞在体外用多种细胞因子（如抗CD3单克隆抗体、IL-2和IFN-γ等）共同培养一段时间后获得的一群异质细胞。由于该种细胞同时表达CD3+和CD56+两种膜蛋白分子,故又被称为NK细胞样T淋巴细胞,兼具有T淋巴细胞强大的抗瘤活性和NK细胞的非MHC限制性杀瘤优点。因此,应用CIK细胞被认为是新一代抗肿瘤过继细胞免疫治疗的首选方案。CIK细胞中的效应细胞CD3+和CD56+细

2、胞在正常人外周血中极其罕见，仅1%—5%。[1] CIK特点　　CIK细胞中的效应细胞CD3+CD56+细胞在正常人外周血中极其罕见，仅1%～5%，在体外经多因子培养28～30天，CD3+CD56+细胞迅速增多，较培养前升幅可达1000倍以上。实验证明，扩增出的CD3+CD56+细胞来源于CD3+CD56-T细胞，而非CD3-CD56+NK细胞。同时发现在CD3+CD56-的T细胞中，除CD4-CD8-T细胞外，其余三种T10细胞亚群（CD4-CD8+、CD4-CD8-、CD4+CD8+）均可通过体外多因子培养而获

3、得CD56分子的表达，而由于CD4+CD8+细胞和CD4-CD8-细胞在正常人外周血中含量极低而间接提示此CD3+CD56+细胞绝大多数来源于外周血中CD4-CD8+T细胞。而由于CD4-CD8-T细胞在培养1个月后有近56%的T细胞同时表达CD56和CD3，表明其也是CIK细胞的重要来源。比较CD3+CD56+CIK细胞中表达CD8+和CD8-,的两群细胞其杀瘤活性没有显著性差异，提示CIK细胞的细胞毒性与CD3CD56表达成相关趋势，而与CD8的表达未表现出相关性。 杀伤原理　　CIK细胞能够通过三种途径杀灭肿

4、瘤细胞和病毒感染细胞： ①CIK细胞对肿瘤细胞和病毒感染细胞的直接杀伤：CIK细胞可以通过不同的机制识别肿瘤细胞，释放颗粒酶/穿孔素等毒性颗粒，导致肿瘤细胞裂解。 ②CIK细胞释放的大量炎性细胞因子具有抑瘤杀瘤活性：体外培养的CIK细胞可以分泌多种细胞因子，如IFN-γ、TNF-α、IL-2等，不仅对肿瘤细胞有直接抑制作用，还可通过调节机体免疫系统反应性间接杀伤肿瘤细胞。 ③CIK细胞能够诱导肿瘤细胞的凋亡：CIK细胞在培养过程中表达FasL（Ⅱ型跨膜糖蛋白）通过与肿瘤细胞膜表达的Fas（Ⅰ型跨膜糖蛋白）结合，诱导

5、肿瘤细胞凋亡。 CIK细胞发挥作用的三种途径10 杀瘤特点　　应用LAK细胞是目前较为普及的肿瘤过继免疫治疗方案，广泛使用于黑色素瘤、肾细胞癌、非霍奇金淋巴瘤、肺癌和结肠癌。因LAK细胞扩增数量有限，杀瘤活性也较TIL等T淋巴细胞为低，故虽然杀瘤谱广，但效果局限。相比较而言，TIL细胞本身较LAK细胞具有更强大的抗瘤效力，但由于杀瘤谱窄，制备困难，及在收集过程中可能导致的功能改变而限制了其临床应用价值。与上述两种效应细胞过继免疫治疗相比，CIK细胞具有独特的优势，列举如下。 1.增殖速度快 CIK细胞在培养过程中加

6、入IFN-γ、IL-1α、抗CD3、McAb、IL-2等多因子后，细胞增殖速度迅速加快，远超过LAK细胞。在培养第22天增殖曲线达顶峰，约增加100倍，其中CD3+CD56+细胞不仅绝对数量增加1000倍以上，且所占百分比也大幅上升，培养至28～30天时达平台期，细胞毒活性亦达峰值，而LAK细胞培养前后数量没有明显增加。 2.杀瘤活性高 CIK细胞是以CD3+CD56+T细胞为主的异质细胞群，大量体内外实验证实CIK细胞较以NK细胞为主的LAK10细胞具备更强大的杀瘤活性，而且其体内杀瘤细胞毒性的维持不必依赖大剂量

7、外源性IL-2的持续给予。体外实验中，任欢和Lu等均发现在体外等数量的CIK细胞比LAK细胞对肿瘤细胞系的杀伤能力稍高或相近，但因CIK细胞在培养过程中CD3+CD56+效应细胞增长迅速，故CIK细胞的总杀伤单位（TLU）为LAK细胞的73倍甚至更高，其杀伤效率显著高于LAK细胞。肿瘤克隆抑制实验显示，CIK细胞的瘤细胞抑制Log指数为2.5～3.5，较LAK细胞的瘤细胞抑制指数高2个Log。体内实验发现，对于在严重联合免疫缺陷小鼠身上构建的人类B细胞淋巴瘤SU-DHL4模型，CIK细胞在清除荷瘤鼠体内肿瘤病灶，抑

8、制转移，延长生存期等方面的作用均明显优于LAK细胞。 3.杀瘤谱广 CIK细胞虽然以CD3+CD56+T细胞为主要效应细胞，但却没有T淋巴细胞杀伤时的MHC限制性，故对于多种肿瘤细胞系（包括NK敏感的K562和NK不敏感的Hela、HL60、人T细胞急淋白血病细胞系OCRF-CEM，人淋巴瘤细胞系OCI-LY8、LAM53，人结肠癌细胞系HT-29、CR75