培养基配方及配置

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1、培养基配方及配置根据其作用不同，培养基分为：诱导培养基增殖培养基生根培养基根据其营养水平不同，培养基可分为基本培养基和完全培养基。基本培养基（就是通常称呼的培养基）主要有MS、White、N6、B5、改良MS、Heller、Nitsh、SH、Miller等。完全培养基就是基本培养基的基础上，根据试验的不同需要，附加一些物质，如生长调节物质和其他复杂有机物质等。N6培养基特点：•1974年朱至清等为水稻等禾谷类作物花药培养而设计•成分简单•KNO3和(NH4)2SO4含量高•广泛应用于小麦、水稻及其它植物

2、的花药培养等White培养基特点：•1943年由Ｗhite为培养番茄根尖而设计的。1963年又作了改良，称作Ｗhite改良培养基。•特点：无机盐含量较低•适用：生根培养。B5培养基特点：•含较低的铵•双子叶植物尤其木本植物组培可选择MS培养基特点：无机盐、离子浓度高，硝酸盐含量较高。MS培养基是目前应用最多最普遍的培养基。无机盐的浓度较高，能保证组织培生长所需的矿物质营养。并且因为离子浓度高，在配制、贮存、消毒过程中，即使有些成分略有出入，也不致影响培养基中的离子平衡培养基配方明细表：培养基成分：一、无

3、机盐：氮枝叶生长需要氮素，缺氮老叶先发黄；氮过量，枝叶过度茂盛。磷缺磷，植株生长缓慢，老叶暗紫色。钾促进花卉生长健壮，增强抗性，茎秆挺拔。缺钾，叶尖、叶缘枯焦，叶片呈皱曲状，老叶发黄或火烧状。钴缺钴，叶片失绿而卷曲，整个叶片向上弯曲凋枯。二、有机物碳水化合物：选用种类：蔗糖（或葡萄糖、果糖）等•蔗糖浓度：2%～3%，胚培养为4%～15%•大生产时可用白糖糖在培养基的作用：1）为细胞提供合成新物质的碳骨架2）为细胞的呼吸代谢提供底物和能量3）维持渗透压维生素种类：VB1（盐酸硫胺素）、VB6（盐酸吡哆醇）

4、、VB3（烟酸）、Vc（抗坏血酸浓度：0.1－1.0mg/L作用：VB1促愈伤组织产生，提高活力VB6促根生长Vc防组织褐变VB3与植物代谢和胚的发育有关系氨基酸：甘氨酸、精氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、丙氨酸等等。因培养基的种类不同，其种类和浓度不同。肌醇：又称环己六醇，在糖类的转化中起作用天然复合物椰乳：促愈伤组织和细胞培养，用量10－20%，使用注意茎尖大小香蕉泥：用量150－200ml/L，应用在兰花组培马铃薯汁液：用量150－200g/L，使苗壮水解酪蛋白：浓度100－200mg

5、/L，应用在微茎尖培养三、激素自然界中，植物激素是植物新陈代谢中产生的天然化合物，它能以极微小的量影响到植物的细胞分化、生长、发育，影响到植物的形态建成、开花、结实、成熟、脱落、衰老和休眠、萌发等许多生理生化活动。在培养基中，其各种成分对培养物影响最大的最显著的就是激素。激素的种类、浓度、以及配比都会显著的影响愈伤组织的形成、不定根、不定芽的分化，胚状体的形成等。通常，不同植物，或不同品种，甚至同一植物的不同位置对激素的要求有很大的变化，这主要取决于植物的内源激素水平。组织培养中使用的激素有的是天然的，

6、如脱落酸（ABA）等，有的是合成的，如二氯苯氧乙酸（2，4－D）（一）、激素的种类：1、生长素类：在自然界中，生长素影响茎和节间的伸长、向性、顶端优势、叶片脱落和生根等现象在组织培养中的主要作用是：诱导细胞的分裂和根的分化，诱导愈伤组织）组织培养中常用的生长素：1二氯苯氧乙酸（2，4－D）2萘乙酸（NAA）3吲哚乙酸（IAA）4吲哚－－3－丁酸（IBA）NAA、IAA、IBA被广泛用于生根，2，4－D有利于愈伤组织的诱导和生长。IAA容易光解，注意用棕色试剂瓶保存，保存时间不要太久。溶解方法：1MNaO

7、H或95％酒精，以前者为好保存：配成一定浓度后，冰箱冷藏保存2、细胞分裂素自然界中，细胞分裂素影响细胞分裂，顶端优势的变化和茎的分化等组织培养中，细胞分类素主要促进细胞分裂和由愈伤组织上或器官上分化不定芽。细胞分裂素常常与生长素相互配合，用以调节细胞分裂，细胞伸长，细胞分化和器官形成。常用的细胞分裂素有：6－苄氨基嘌呤（6－BA）激动素（6-糠氨基嘌呤、KT）玉米素（ZT）噻二唑苯基脲（thidiazuron、TDZ）溶解方法：1MHCL保存：配成一定浓度后，冰箱冷藏保存3、赤霉素由日本人黑泽1926年

8、发现。自然界中，赤霉素能够打破休眠、促进果实成长等效果。虽然已经用于顶端分生组织的培养和维管分化的研究，但在培养基中很少添加，因为它的作用往往是负面的。虽然也有赤霉素能刺激不定胚发育成正常小植株的报道，但在使用中仍需慎重，不可轻易添加。赤霉素有20多种，其中在组织培养中最常用的是GA3。在组织培养中与生长素和细胞分裂素相比，赤霉素不太常用，据报道赤霉素能刺激不定胚正常发育成小植株溶解方法：95％酒精保存：配成一定浓度后，冰箱冷藏保存赤霉素易