现代生物学导论_复习笔记

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1、1生命基本特征：基本单位：细胞基本功能：新陈代谢，生长，运动通过繁殖延续，遗传基本物质：DNA个体发育，系统进化适应性2polyU全部苯丙氨酸内含子外显子不编码蛋白，原核无编码蛋白翻译：5'->3'表达调控：转录水平前体加工核膜向细胞质运输细胞质中稳定性mRNA选择性调节蛋白质活化和后处理3基因文库的构建将总DNA包含的基因组各片段分别克隆在质粒或噬菌体载体上，便构成了该生物的基因文库。费时费事内含子序列逆转录：以mRNA为模板，以短的寡核苷酸（oligo(dT)）分子作引物，加入dATP,dTTP,dGTP和dCTP,ol

2、igo(dT)与mRNA分子的多聚A（polyA）尾巴碱基配对。大肠杆菌DNA聚合酶I的Klenow片段的作用下：人工合成互补子链——互补DNA（cDNA）。转录产生编码特殊蛋白的mRNA。——用cDNA方法获取的DNA片段往往是具有特定功能的目的基因PCR技术酶促反应大量扩增（包括分离）目的基因。4种物质：（1）模板DNA；（2）（目的基因两条链5’端互补）DNA引物（短DNA单链）；（3）TaqDNA聚合酶；（4）dNTP（dATP,dTTP,dGTP和dCTP变性：解链；退火：配对；延伸：合成2^n个4限制性内切酶：2

3、00多EcoRI特异识别GAATTC及其互补碱基组成的双链片段,粘性末端T4连接酶载体：常用包括细菌质粒、l噬菌体、cosmid质粒等。检测：酶切：利用lacZ基因的插入失活筛选重组质粒lacZ表达半乳糖苷酶，含IPTG和X-gal，X-gal被半乳糖苷酶水解成兰色，电泳：琼脂糖凝胶电泳分离鉴定大小不等的酶解片段,磷酸基团带负电荷载体法转化——农杆菌介导法基因的直接转移（1）高压电脉冲电激穿孔（2）基因枪法（3）微注射法5人胚胎干细胞包括人胚胎来源的干细胞、生殖细胞起源的干细胞和通过核移植所获得的干细胞。用于研究的人胚胎干细

4、胞只能通过下列方式获得：（一）体外受精时多余的配子或囊胚；（二）自然或自愿选择流产的胎儿细胞；（三）体细胞核移植技术所获得的囊胚和单性分裂囊胚；（四）自愿捐献的生殖细胞。利用体外受精、体细胞核移植、单性复制技术或遗传修饰获得的囊胚，其体外培养期限自受精或核移植开始不得超过14天。6被转移的氢原子所携带的能量储藏在新化学键中XH2(还原型底物)＋NAD+→X(氧化型底物)＋NADH＋H+XH2(还原型底物)＋NADP+→X(氧化型底物)＋NADPH＋H+XH2(还原型底物)＋FAD→X(氧化型底物)＋FADH2还原态的NADH

5、和FADH2等还可将所接受的电子和氢传递给其他传递体如细胞色素、辅酶Q等。NAD＋:尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸，辅酶INADP＋：尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸，辅酶IIFAD:黄素腺嘌呤二核苷酸琥珀酸脱氢酶是唯一嵌入到线粒体内膜的酶线粒体的内膜上含有电子传递链及ATP酶复合体由葡萄糖到丙酮酸的糖酵解过程中，所有的中间产物都是以磷酸化合物的形式来实现的。糖酵解发生在细胞质中的10步反应，前5步为准备阶段，需要消耗2分子ATP来启动，后5步为产生ATP的贮能阶段，共产出4分子ATP，还形成2个高能化合物NADH。糖酵解将六碳的葡萄糖分

6、解成2个三碳的丙酮酸，净产生2个ATP，生成2分子NADH。参与化合物是①葡萄糖，②ADP和磷酸，③NAD+。需要10种酶的参与，大部分酶需要Mg2＋作为辅助因子。但丙酮酸需先转变成乙酰辅酶A后才进入三羧酸循环。该循环过程中的第一个化合物为柠檬酸；循环的最后产物是草酰乙酸。分解1分子丙酮酸形成3分子CO2、4分子NADH和1分子FADH2及1分子ATP。电子传递链又称呼吸链，主要成分是线粒体内膜上的蛋白复合物，这些复合物包含了一系列的电子传递体。通过一系列的氧化还原反应，将高能电子从NADH和FADH2最终传递给分子氧，生成

7、水。随着电子能量水平的逐步下降，高能电子所释放的化学能就通过磷酸化途径贮存到ATP分子中，这个过程也被称为氧化磷酸化过程。在磷酸化过程中，相关的酶将底物分子上的磷酸基团直接转移到ADP分子上。整个糖酵解中ATP的形成都是底物水平的磷酸化反应在呼吸链电子传递过程中，电子从最上游的经呼吸链传递到分子氧：每分子NADH释放出的能量可产生2.5分子ATP；每分子的FADH2可产生1.5分子ATP。糖酵解：底物水平的磷酸化产生4个ATP，己糖活化消耗2个ATP，脱氢反应产生2个NADH，经电子传递链生成3或5个ATP，净产生5或7个A

8、TP；Krebs循环：底物水平的磷酸化产生2个ATP，脱氢反应产生8个NADH和2个FADH2，8个NADH经电子传递链生成20个ATP，2个FADH2经电子传递链生成3个ATP，净产生25个ATP。整个有氧呼吸过程净产生30还是32个ATP取决于糖酵解阶段产生于细胞质中的NADH穿过线粒