富血小板血浆在口腔颌面外科中的应用

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1、富血小板血浆在口腔颌面外科中的应用邵山，徐欣，马跃，蓝菁，黄海云邵山、徐欣、马跃、蓝菁、黄海云，济南山东大学口腔医学院，250012富血小板血浆(platelet-richplasma，PRP)是把自体全血经过离心、分离而得到的血液制品，含有多种大量的自体生长因子，富含较高浓度的血小板，实质上是自体源性、浓缩的含血小板的血浆，故亦称之为血小板凝胶，富生长因子血小板或自体浓缩血小板。PRP能够释放多种大量的高浓度生长因子，主要有血小板衍化生长因子(PDGF)、转化生长因子-β(TGF-β)、成纤维细胞生长因子(FGF)和胰岛素样生长因子(IGF)等

2、[1-2]。由于PRP来源于自体血液，无毒性，无免疫源性，不会导致传染性疾病的传播，在临床应用中具有广阔的应用前景。近年来，大量研究表明PRP能显著促进软组织的愈合及骨组织的再生。　　一、PRP的制备及其主要成分　　1.PRP的制备：目前，PRP的制备方法各种文献报道不尽相同，所使用的仪器也相差较大。不同的离心次数、离心力和离心时间制作的PRP中血小板浓度和生长因子的活性也各不相同。一类是使用一次离心的方法即Anitua法[1]，现已经较少使用，因该法只有一次离心，所得血小板回收率明显较低，仅为(35±16.8)%。另一类为二次离心法得到，如Pe

3、trungaro、Landesberg、Aghaloo法等，目前采用的主要为二次离心得到。两次离心提取PRP的原理在于，根据血液中各组分的沉降系数差异，使沉降系数最大的红细胞首先沉淀，弃掉沉淀物后再次离心，就可以使沉降系数较小的血小板沉淀出来，得到高浓度血小板。所以，第一次离心后，弃去底层红细胞，经第二次离心时，只要有足够大的离心力和离心时间，就可以让更多的血小板沉淀出来。目前，一种更先进的技术可以使两次离心一次完成，使较小量的全血分离较高浓度的PRP。常用的有HARVESTSmartPRePSystem[3]，Harvest等应用该仪器制作的P

4、RP中血小板为全血血小板浓度的4.04倍，回收率为(78±15.8)%，其血小板回收率明显高于Anitua法。　　2.PRP的主要成分：PRP富含由血小板分泌的7种与所有创伤愈合过程有关的多种大量蛋白生长因子。这些生长因子包括3种同分异构体的血小板衍化生长因子(PDGFαα、PDGFββ、PDGFαβ)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、转化生长因子-β2(TGF-β2)、表皮样生长因子(EGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、FGF、IGF等[4]，它也含有血液中存在的3种蛋白质：纤维素、纤粘连蛋白及亲玻粘连蛋白[5]。这些因子对促进细胞的增

5、殖与分化及组织的形成有着极其重要的作用。可以明显促进骨折的愈合及骨缺损的修复与重建[4，6]。　　二、PRP在口腔颌面外科中的应用　　PRP多以凝胶的形式应用，PRP凝胶是PRP与凝血酶和氯化钙混合而成的一种具有黏性的胶状凝块。　　1.颌骨缺损的重建：传统的骨缺损的治疗方法主要有自体骨移植和同种异体骨移植、生物材料替代、组织工程技术、膜引导技术以及基因治疗等。当前研究较热门的还有利用生长因子与自体骨、异体(种)骨或生物替代材料等混合成复合物，填充到骨缺损区域，以达到修复骨缺损的目的。许多研究表明，单一使用血小板所含的某一生长因子，即可加速骨组织的

6、修复过程。目前绝大部分的生长因子是通过体外培养而得到的，比较单一，而且制备也较为繁琐，费用昂贵，PRP中含有大量的生长因子，被激活后可以分泌释放多种高浓度的生长因子，其释放的生长因子在骨折愈合的整个过程中起着至关重要的作用[7]。　　现在在颌骨缺损的治疗方面已有大量学者把PRP应用于动物实验和临床工作中。Fennis等[8]利用山羊将其下颌角离断制成下颌骨骨折动物模型。首先将PDLLA支架预先成形后桥接缺损，并用自体松质骨复合PRP植入下颌骨缺损区，与单纯植入自体松质骨作为对照组，术后3、6、12周X线检测结果表明复合PRP实验组骨愈合程度明显优

7、于对照组。Marx等[4]采用自体松质骨复合PRP修复88例下颌骨连续性缺损患者，发现PRP实验组较对照组成骨速度提高了1.62～2.16倍，同时成骨密度也明显高于对照组。　　2.种植体周围的应用：北京大学口腔医学院利用PRP加入植骨材料与新鲜血液混合均匀植入种植体周围骨缺损区域以引导骨组织再生的临床研究中，组织标本经甲苯胺蓝染色后在光镜下以40～200倍放大率观察对比实验组与对照组，植入β相磷酸三钙与PRP混合物实验组在光镜下可见即使在远离骨壁处，植骨颗粒周围也包绕着较为稠密的蓝染组织，新形成的编织骨排列更为整齐有序，高倍镜下可见到大量蓝染组织

8、侵入β相磷酸三钙颗粒微孔内部，颗粒吸收改建明显。认为PRP在促进口腔种植骨缺损区骨组织再生时无论从速度、数量和质量等方面都有一定的促进作