酶法评价鸡饲料营养价值的方法学研究进展

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1、酶法评价鸡饲料营养价值的方法学研究进展2010.0227对于畜禽养殖业而言，饲料营养价值评定意义重大，饲料营养价值评定的准确性对满足动物营养需要、为动物提供精确营养、提高养殖效益意义重大，而其中选择合适的评定方法是提高准确性的决定因素。饲料营养价值评定方法主要包括化学分析法、动物消化代谢试验、体外酶法等。化学分析法快速、简便，重复性高，但所测定的结果不足以准确反映饲料营养物质在动物体内的利用率；动物消化代谢试验法结果与动物实际情况接近，符合程度高，但耗时、费力，很难对饲料样品进行快速分析；应用仿生学原理建立的酶法由于吸收了前两

2、种方法优点(Uden，1992)[1]，重复性高、速度快、结果准确，因此得到越来越多研究者重视。鸡的基础代谢旺盛，生长周期短，生产力高，必需供给高营养水平的日粮以保证维持和生产需要，所以研究鸡用饲料原料营养价值评定方法意义重大。1酶法的分类酶法的定义为根据动物体内酶的性质、种类、酶的作用条件（如温度、pH值、水分等）、胃肠道的蠕动及营养物质的吸收等条件设计生物反应器，进行体外模拟饲料营养物质消化吸收过程的试验方法。酶评定饲料营养价值的方法分为两类。1.1单酶评定法该方法是主要利用胃蛋白酶在体外进行模拟消化评定饲料营养价值的一种

3、方法，将饲料在酸性（HCl）液体环境中，加入一定活性的胃蛋白酶，在恒温条件下模拟胃消化过程进行反应。此法只适合对饲料中蛋白质一种养分的营养价值和体内消化率进行评价和预测。酶法评价鸡饲料营养价值的方法学研究进展河北农业大学动物科技学院/梅学文陈宝江许晴中国农业科学院饲料研究所/于会民2010.02272010.0228Pedersen(1983)[2]建立了一套保持pH值恒定不变单酶法预测蛋白质体内消化率的操作程序，并利用该方法分别预测了31种植物性蛋白质饲料和11种动物性蛋白质饲料的体内消化率，相关性分别为r=0.85和0.9

4、2。研究表明，在一定范围内，通过测定蛋白质水解程度来预测饲料蛋白质体内消化率是可信的。利用单酶法评定蛋白质饲料时，饲料品质易受饲料粒度和胃蛋白酶剂量等因素的影响，且胃蛋白酶活性高低直接对该方法的可靠性产生影响。1.2多酶评定法饲料养分在动物消化道内的消化过程，不是由某种单一消化酶独立完成，因此必须对动物消化道内的各种环境条件进行有效模拟，所预测的结果才能与体内情况更为接近。随着对畜禽消化生理的深入研究，酶消化模拟技术由过去的单一酶法发展为现在的多酶法，多酶法不但对胃消化过程进行模拟，而且还对小肠消化以及大肠消化等过程进行模拟。

5、不仅增加了酶的数量还增加了消化产物的分离技术。多酶法根据模拟消化部位的不同又分为两步酶解法和三步酶解法。两步酶解法即模拟胃-小肠两部分的消化，先用胃蛋白酶进行消化，然后用肠液或胰酶进行消化，消化结束后利用离心或过滤的方法将已消化养分和未消化养分进行分离(Buchmann等，1979)[3]，此方法分离出来的蛋白质消化产物分子量通常偏大或偏小(Gauthier,1982)[4]。为了克服消化产物累积对酶促反应的抑制作用，Cave(1988)[5]利用半透膜去除消化产物，发现去除消化产物可以提高体内与体外养分消化率的相关性，Mau

6、rn(1955)[6]建立了连续透析法，将小肠消化过程放在透析袋内进行，并将透析袋浸泡在pH呈中性的缓冲液中，使消化产物不断从透析袋内透析出来进入缓冲液。该方法明显降低了消化产物积累对水解反应的抑制作用，提高了饲料养分酶解消化率。Drake（1991)[7]对透析袋截流分子量的大小及透析时间等对日粮营养酶解消化率的影响作了研究。研究表明：透析袋的截留分子量是影响酶解消化率的主要因素。三步酶解法，即胃消化、小肠消化、大肠消化，该方法在两步酶解法的基础上增加了瘤胃液或碳水化合物酶。Boisen和Femandez(1997)[8]研

7、究表明：三步酶解法可以用来评定单胃动物日粮的消化能。2酶法建立的理论依据营养物质在鸡消化道内主要经过物理降解和化学降解，微生物在鸡饲料营养物质的消化中不起直接作用，它主要是通过改变肠道形态来提高营养物质的消化(呙于明，2004)[9]，而酶的降解占化学降解的主导地位。不同品种鸡对营养物质消化率不同，如固始鸡与蛋鸡、肉鸡对日粮粗蛋白质表观利用率相似，测定其消化道胰蛋白酶活性，发现活性相近；粗脂肪表观利用率则由于胰腺和食糜中脂肪酶活性差异较大而相差显著[10]；袁建敏(2001)[11]等比较肉仔鸡与蛋公鸡蛋白消化酶活性和饲料氨基

8、酸消化率后，证明蛋白消化酶的高低与饲料氨基酸消化率强相关。同一动物对某一营养成分在消化道不同部位的消化率不同，这主要与消化道不同部位的酶活及酶的种类相关，如大部分淀粉在十二直肠前消化[12]。年龄不同，鸡对饲料营养物质的消化吸收不同，也与其消化道内酶的发育有关，研究表明,肉鸡