dured-核酸电泳用试剂

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1、DuRed(同GelRed)核酸染料(10,000×DMSO溶液)DuRed核酸染料特点●无毒性:DuRed独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内,艾姆斯氏试验结果也表明,该染料的诱变性远远小于EB。●灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBRGreenI。●稳定性高:适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶;室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定,耐光性强。●信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。●操作简单:与EB一样,在预制胶和电泳过程中染料不降解;而电泳后染色过程也只需30分钟且无需脱色或冲洗,即可直接用紫

2、外凝胶透射仪观察。●适用范围广:可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳;可用于dsDNA、ssDNA或RNA染色。●与EB有相同的光谱特性,无需改变滤光片及观察装置:标准的EB滤光片或SYBR滤光片都适用,使用与观察EB相同的普通紫外凝胶透射仪观察即可,在300nm紫外光附近可得到最佳激发。但是DuRed不能被488nm氩离子激光器或相似波长的可见光完全激发,因此不推荐使用此类激发装置的成像系统。对于此类装置,我们推荐您使用DuGreen(Cat#011或012),它和SYBRGreenI的光谱相似

3、,灵敏度相当,但更加稳定。DuRed使用方法简介1.胶染法(用法同EB)(推荐方法)(1)制胶时加入DuRed核酸染料(例如:每50mL琼脂糖溶液中加入5μLDuRed10,000×储液,以此比例类推)。(2)按照常规方法进行电泳。注意事项:u此方法染色染料用量相对较少。500μL染料大约可以做100块50mL的胶。u由于DuRed具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷却。摇晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将DuRed储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。D

4、uRed兼容所有常用的电泳缓冲溶液。u含有染料的预制凝胶溶液可以大量制备,并长期保存直到使用。u此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。2.泡染法(1)按照常规方法进行电泳。(2)用H2O将DuRed10,000×储液稀释约3,300倍到0.1MNaCl中,制成3×染色液。(例如将15μLDuRed10,000×储液和5mL1MNaCl加到45mLH2O中)。(3)将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙烯容器中。缓慢加入足量的3×染色液浸没凝胶。室温振荡染色30min左右,最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同

5、。对于含3.5~10%丙烯酰胺的凝胶,染色时间通常介于30min到1h,并随丙烯酰胺含量增加而延长。注意事项:u用泡染法染色时,染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用3次左右。u3×DuRed染色液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。u如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关,请尝试:降低琼脂糖浓度;选用更长的凝胶;延长凝胶时间以保证边缘清晰;改进上样技巧或选择泡染法染色。几种核酸染料比较名称灵敏度稳定性适用性安全性价格DuRed(同GelRed)高高通用大小

6、片段电泳染色美国安全认定无毒中DuGreen(同GelGreen)高高通用大小片段电泳染色美国安全认定无毒中SUPERGreenI(同SYBRGreenI)极高差100bp以上片段电泳染色花菁染料,低毒高SUPERGreenII(同SYBRGreenII)极高差单链核酸分子电泳染色花菁染料,低毒高GoldViewI低高500bp以上片段电泳染色高毒性,强致癌低EB低高100bp以上片段电泳染色强致癌,强诱变低特别提醒:u如果您使用的是紫外成像仪,请选择DuRed(同GelRed);如果您使用激光成像仪或希望在可见光下观测,请选择DuGreen(同

7、GelGreen)。u在极少数情况下,质粒经某些酶切后的DNA样品会出现拖尾和分辨率降低,此时建议同时尝试两种染色方法以决定哪种方法更加合适。相关产品:目录号产品名称规格009DuRed(同GelRed)核酸染料(10,000×水溶液)500μL010DuRed(同GelRed)核酸染料(10,000×DMSO溶液)500μL011DuGreen(同GelGreen)核酸染料(10,000×水溶液)500μL012DuGreen(同GelGreen)核酸染料(10,000×DMSO溶液)500μL

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