串联质谱如何定量

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时间:2018-08-01

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1、串联质谱如何定量?串联质谱定量时,是以后面产生的碎片峰(子离子)定量,但是这一子离子是由母离子在碰撞室产生的特征性碎片,所以用MRM定量灵敏度会比用SIM定量好很多。建立方法的步骤是:用一定溶度的标准品溶液(1-10ug/mL)Tune化合物的一级质谱条件,找到母离子的最佳质谱条件,然后对母离子进行打碎,优化碰撞能量,得到其特征性的子离子。最后利用该质谱条件和该母离子->子离子对进行定量。API和ABI如何区别?但API也是AtmospherePressureIonization(大气压电离,包括ESI、APCI和最新的大气压光电离APPI)的简称,A

2、PI是LCMS的关键,因为这一技术最开始是ABI公司发明的,所以ABI的LCMS和LCMSMS都以API命名,常见的型号有API2000,API3000,API4000。您问的API也可能是指这个。Q-Tof中的Q是什么意思??Q就是指的四极杆,TOF是指的飞行时间。QQQ是三重四极杆。两者是四极杆-飞行时间的串联一般的四极杆串联都是三重四极杆的空间串联,至于纯粹的二重四极杆没有听说过,但是QQ-TOF有没有就不是很清楚质量偏差怎么办?不知道你用的是哪个厂家的仪器,应该每个厂家都会随机带有校正液。质谱的质量数偏了,说明你的仪器该校正了,一般3个月就要校

3、一次机。做样前-检查氮气,流动相,质谱仪的真空度,毛细管温度,…1最好不用直接进样(容易污染离子源)!2做联用时最好分流(a可以使用常规柱,b缩短分析时间,c延长质量分析器寿命)3最好使用在线切换阀,降前每个样品的前后1-2分钟的流动相切入废液(避免样品中的盐进入质谱,做Sequence时可以把平衡柱子的流动相切入废液)4开始联用前,直接运行质谱数分钟,可以先将温度(毛细管温度和离子源温度(APCI))加热到预设定值(如果是APCI源还可以避免将烧掉heater,很贵的,我烧掉过一个)5待机时将切换阀置于waste,避免刚开液相时将流动相打入离子源,6

4、关机前毛细管的温度先降下来,稳定一段时间后再关闭电源,避免风扇停止转动后毛细管外围的热量向里扩散,容易引起内部线路及电子元器件老化加速,7每天清理毛细管口外部,擦洗干净,每次停机时注意清洗Skimmer,用无尘擦拭纸,kimberly那种,8如果用的是钢瓶而且天天做样的话,将两个钢瓶并联,当然,一月不做一次的话就算了,9做定量时注意离子源喷针的具体位置,否则标准曲线就不能用了,10不要不经过柱子分离进行定量分析,结果不可靠(竞争性抑制目标分子离子化)11如果是负离子检测的话,可以相流动相中加入少量异丙醇,12不好使用不挥发性盐,可以使用挥发性盐,但浓度

5、不要超过20mmol/l13需要使用酸的情况下可以用甲酸,乙酸,三氟乙酸可以用,但能用甲酸或乙酸时就别用TFA4CID和CAD区别?CID英文是collision-induceddissociation碰撞诱导解离。通常在真空接口处调节电压发生CID现象,一般是去除溶剂,如果电压增大,也会产生碎片离子。这是一级质谱的原理。CADcollision-activateddissociation碰撞活化解离。做二级质谱时,应该是发生在Q2处吧,选择的母离子的进入Q2后碰撞活化产生子离子,这个过程称为CAD.我们用的API3200,CID指的是Q0里面的诱导碰

6、撞的气体,CAD指的是Q3里面的诱导碰撞气体,也就是说,API里的CID&CAD都是指氮气。氮气发生器该使用吗?氮气发生器的工作原理是分离空气,电解膜的负极侧发生氧化反应,吃掉空气中的氧化性气体,在正极侧还原,空气流过电解池后就只剩下氮气和惰性气体,故国内发生器的纯度大多标有“相对含氧量”,氮气的纯度和空气流速,有效分解面的长度,电解电势的强弱都有关系,这种分离方法也决定了氮气的纯度不可能做的很高。加入电解质的作用就是提高水的导电率,使电化学反应能顺利进行。发生器对色谱的影响有一点常常被忽略,就是发生器内的开关电源工作事会对电网电压造成一定的干扰(压缩

7、机的启动和停止也会),所以色谱仪必须经过稳压电源供电,当然不用稳压电源的用户极少,但还是有,我遇见过。APCI和ESI的不同点?4离子产生的方式1.APCI利用电晕放电离子化,气相离子化。2.ESI利用离子蒸发,液相离子化。能被分析的化合物类型不同1.APCI弱极性,小分子化合物,且具有一定的挥发性2.ESI极性化合物和生物大分子。流速1.ESI0.001到0.25ml/min。2.APCI0.2到2ml/min。多电荷1.APCI不能生成一系列多电荷离子,所以不适合分析大分子。2.ESI能生成一系列多电荷离子,特别适用于蛋白,多肽类等生物分子。气质和

8、液质的检测器没有什么不同,都是四极杆和离子阱?气相和液相的差别有流动相、仪器结构、检测器、样品

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