edfs40对深低温保存兔颈总动脉结构和舒缩功能的影响

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1、EDFS40对深低温保存兔颈总动脉结构和舒缩功能的影响作者：蒋安，刘峰，刘昌，宋宇龙，孟珂伟，吕毅蒋安【摘要】目的评价玻璃化溶液EDFS40对深低温保存兔颈总动脉形态结构和舒缩功能的影响。方法无菌条件下取兔颈总动脉，分别以EDFS40和1.5mol/L二甲亚砜为低温保护剂，经玻璃化法和慢速冷冻法深低温保存14d。复温后和新鲜动脉进行大体和显微形态的观察，器官浴槽内进行非内皮依赖性舒缩功能的测定。结果EDFS40组动脉的大体、组织学及超微结构与新鲜动脉相似，对氯化钾的收缩力和慢速冷冻组动脉无明显差别(P>0.05)，对去甲肾上腺素和硝普钠的收缩或舒张张力优于后者(P<

2、0.05)，但均低于新鲜动脉(P<0.05)。结论EDFS40能较好保持兔颈总动脉的形态结构及功能，可用于血管的玻璃化保存。【关键词】深低温保存；兔；颈总动脉；EDFS40；玻璃化　　ABSTRACT:ObjectiveToassesstheeffectofEDFS40onthestructureandvasomotoricityofrabbitcarotidsincryopreservation.MethodsThefreshcarotids,takenfromrabbitsunderasepticconditions,werepreservedfor14daysinl

3、iquidnitrogenbyvitrificationorslowfreezingmethodwith10EDFS40ordimethylsulfoxide(1.5mol/L).Themorphologicalchangesofbothfreshandthawedcarotidswereobservedbyvisualexamination,opticalandelectronmicroscopes,respectively.Theirendotheliumindependentvasoconstrictionandvasodilatationweredetectedino

4、rganbath.ResultsThemorphologicalchangesoftheEDFS40vitrifiedarteriesweresimilartothoseofthefreshcarotidsundermacrography,opticalandelectronmicroscopes.AndtherewasnoobviousdifferenceincontractiontoKClbetweenthecryopreservationgroupandtheslowfreezinggroup(P>0.05).Thecontractileandrelaxantr

5、esponsesofvitrifiedarteriestoNEorSNPweresignificantlybetterthanthoseofthefrozenarteries(P<0.05);both,however,werestillinferiortothevasomotoricityofthefresharteries(P<0.05).ConclusionTherabbitcarotidsvitrifiedwithEDFS40canhavetheirstructureandvasomotorfunctionmaintainedwithoutobviousdam

6、age,whichmayindicatetheusageofEDFS40invitrificationofbloodvessels.　　KEYWORDS:cryopreservation;rabbit;carotidartery;EDFS40;vitrification10　　玻璃化冷冻保存方法采用高浓度低温保护剂(cryoprotectiveagent,CPA)及较快的降温速率，使细胞内外迅速达到玻璃态，从而避免细胞内外冰晶形成所致的损害，有效地保存组织的活性[16]。高浓度的CPA可以引起组织或细胞的毒性损伤，因此寻求低毒性、高渗透性的CPA或CPA的组合成为关键。在本研

7、究中，我们选用玻璃化溶液EDFS40冷冻保存兔颈总动脉，通过观察复温后血管组织结构和舒缩功能的变化，探讨EDFS40应用于血管玻璃化保存的实际意义。　　1材料与方法　　1.1血管的获取　　健康家兔15只，体重2.5～3.0kg，雌雄不限，以氯胺酮(20mg/kg)、异丙嗪(10mg/kg)、速眠新Ⅱ号(0.3mL/kg)混合液肌注麻醉，切取左右两侧颈总动脉，置于4℃Hanks溶液中备用。解剖显微镜下仔细清理结缔组织和脂肪组织，将动脉切成10～15mm的血管段，共30段。随机分为新鲜组、EDF