健肾颗粒剂对糖尿病肾病大鼠肾脏组织tgfβ1、et1mrna及肾功能的影响

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1、健肾颗粒剂对糖尿病肾病大鼠肾脏组织TGFβ1、ET1mRNA及肾功能的影响作者：徐丽梅马建伟马新英魏汉林董静张文龙蔡庆【摘要】［目的］观察中药健肾颗粒剂对DN大鼠肾脏组织中TGFβ1、ET1mRNA及肾功能影响。［方法］采用5/6肾切除加尾静脉注射STZ的方法复制大鼠DN动物模型，并随机分成健肾颗粒剂、苯拉普利、保肾康、病理对照及正常对照组，采用生化法检测肾功能，PCR方法检测肾脏组织中TGFβ1、ET1mRNA，组织病理学方法观察肾脏组织结构。［结果］健肾颗粒剂组大鼠血中Cr、BUN水平低于苯拉普利

2、、保肾康及病理对照组（P<0.05或P<0.01）；健肾颗粒剂组肾脏组织中TGFβ1、ET1mRNA表达明显低于其他三组（P<0.05或P<0.01），肾脏组织病理结构也较其他三组有明显改善；健肾颗粒剂降低DN大鼠血糖、尿蛋白及血脂的作用明显优于苯拉普利、保肾康及病理对照组（P<0.05或P<0.01）。［结论］健肾颗粒剂可明显改善DN大鼠肾功能，并有降血糖、调整血脂，下调DN大鼠肾脏TGFβ1、ET1mRNA的作用。【关键词】糖尿病肾病；健肾颗粒剂；转化生长因子β1

3、；内皮素1　　Abstract：［Objective］ToexploretheeffectsofTCM9JianshenGranuleonkidneyTGFβ1，ET1mRNAandfunctionofrats.［Method］Take5/6kidneyresectionandtailveininjectionofSTZtocopyratsDNmodel，andrandomlydividethemintogroupsofJianshenGranule（1）Benazeprilat（2），BaoshenKan

4、g（3），pathologicalcontrol（4）andnormalcontrol（5），takebiochemistrymethodtoobservekidneytissue.［Result］TheTGFβ1andET1mRNAexpressioningroup1ismarkedlylowerthanother3groups，soisitskidneypathologicalstructuremuchrelieved；JianshenGranuleismuchbetterthanBenazeprila

5、t，BaoshenKangandgroup4onreducingglucose，urinaryproteinandlipid.［Conclusion］JianshenGranulecanobviouslyimproveDNrats’kidneyfunction，alsoreduceglucose，regulatelipid，downregulateTGFβ1andET1mRNAaswell.　　Keywords：DN；JianshenGranule；TGFβ1；ET1糖尿病肾病是糖尿病的严重并发症之一，

6、是导致死亡的重要原因，但目前治疗上尚缺乏理想的方法。我们在健肾冲剂治疗慢性肾衰的基础上，为进一步探讨其对糖尿病肾病（diabeticnephropathy，DN）的作用，将其改进为无糖型颗粒剂，并观察了该方对DN大鼠肾功能、肾脏组织结构及肾脏TGFβ1、ET1mRNA的影响。9　　1材料与方法　　1.1材料　　实验动物：雄性Wistar大鼠50只，体重190～220g，购于军事医学科学院动物实验中心。实验药物及试剂健肾颗粒剂（主要药物为黄芪、山萸肉、山药、茯苓、当归、莪术等，由本院制剂中心制成无糖型颗粒剂），

7、每袋5g。保肾康片，成都亨达制药厂生产，批号980605；苯拉普利，瑞士诺华制药有限公司制造，批号011400。链尿佐菌素（STZ）为美国Sigma公司产品。总RNA提取试剂盒由美国GibcoBRL公司提供，反转录PCR试剂盒由Promega公司提供，TGFβ1、GAPDH引物由军事医学科学院提供。　　1.2方法　　1.2.1DN模型制作及动物分组　　40只大鼠常规麻醉，消毒后，腹部正中纵切口，暴露肾脏，剥离肾包膜，右肾结扎切除，左肾切除上下极后，明胶海棉止血，关闭腹腔，1周后每只大鼠按40mg/kg体重尾静

8、脉注射STZ（用0.1mmol／LpH4.5的枸橼酸酸缓冲液，将STZ配成2%的溶液，4℃9冰箱保存，新鲜配制）。72h后测定空腹血糖＞16mmol／L，尿糖呈强阳性，尿量超过正常组50%的大鼠为DN实验动物，给予高蛋白、高脂肪饲料喂养。然后将40只大鼠随机分成4组，每组10只。健肾颗粒剂组，每天按4g/kg给药；保肾康组，每天按34mg/kg给药；苯拉普利组，每天按3.