通过基因枪和农杆菌介导用badh基因转化小麦

《通过基因枪和农杆菌介导用badh基因转化小麦》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、nCT●ilglGUUUHAEBD咖LI-SIHIGli华北农学报·2005，20(5)：1．9通过基因枪和农杆菌介导用BADH基因转化小麦RAZZAQAbdull’2，张艳敏1，赵和1，马峙英2，郭北海1，王海波1(1．河北省农林科学院遗传生理研究所，河北石家庄050051；2．河北农业大学，河北保定071001)摘要：土壤盐碱是一种严重障碍作物生产的环境因子，甜菜碱醛脱氢酶BADH基因是一种重要的可赋予植物渗透调节抗性的基因。本研究用基因枪法及农杆菌介导法向小麦幼胚和成熟胚愈伤组织导入了BADH基因。用PDS一1000／HE基因枪轰击2933块幼胚愈伤组织，

2、分化出了45株再生植株，分化率为1．53％。PCR分析表明，其中的5株为BADH基因转化植株。用PFY涂抹其叶片，进一步证实了PCR的结果。以小麦成熟胚愈伤组织为受体，用农杆菌介导转化1968块愈伤，仅再生出了5株绿苗，PCR检测结果均为阴性。但对其转化愈伤组织的PCR检测表明，外源基因已在受体细胞中实现了整合。以幼胚愈伤组织为受体，用农杆菌介导转化2933块愈伤，共再生出了21株绿苗。对其进行PCR检测，仅有5株为BADH基因转化植株。转化处理过的幼胚愈伤组织的绿苗再生率(0．72％)高于成熟胚愈伤(0．25％)。与对照相比，所有的转化植株均能够在0．5％Na

3、Cl(w／w)条件下正常生长，表明外源BADH基因已经整合并表达。关键词：遗传转化；小麦；农杆菌；基因枪；BADH基因中图分类号：$512．0l文献标识码：A文章编号：1000—7091(2005)05—0001—09TransformationofWheat耐thBADHThroughGeneGunandAgrobacteriumRAZZAQAbdull一，ZHANGYan．rainl，ZHAOHel，MAZhi—yin92，GUOBei—hail，WANGHai—b01(1．InstituteofGeneticsandPhysiology，HebeiAcad

4、emyofAgricultureandForestrySciences，Shijiazhuang050051，China；2．AgriculturalUniversityofHebei，Baoding071001，China)Abstract：Salinityisverysevereenvironmentalproblemhamperingcropproduction．BADHisanimportantgeneforconferringosmoticstresstolerancetoplants．InthisstudygenegunandAgrobacteriu

5、mwereemployedforthedeliveryofBADHintocallusofwheat．Bombardmentof2933ealliderivedfromimmatureembryosresultedinregenerationof45plant-letsafterselectiononphosphinothricin(P胛)withnetregenerationrateof1．53％．PCRanalysisconfirmedthepresenceofBADHgeneinfiveplants．ResultsofPPT-leafpaintingcon

6、formedtoPCRtest．IncaseofAgrobacteriumme—diatedtransformationfiveplant—letsregeneratedfrominoculationof1968calliderivedfrommatureembryosbutnonewasPCRpositive．PCRtestofcallifrommatureembryosexhibitedthesuccessfuldeliveryandintegrationoftransgene．Inocu—lationof2933eallifromimmatureembry

7、osresultedinregenerationof21plant-lets．PCRevaluationofregeneratedplant—letsindicatedthepresenceofBADHin5plantsonly．Netregenerationrateforimmatureembryos(0．72％)washi．gllerthanthatofmatureembryos(0．25％)．TransformedplantsobtainedthroughAgrobacteriumandgenegunwereabletothrivein0．5％NaCl(w

8、／w)withoutst