dna修复酶在胃癌组织中的表达变化及临床意义

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1、DNA修复酶在胃癌组织中的表达变化及临床意义作者：吴迎爽周宁程毅魏贵亮谢震祁贺薄爱华张晓丽邢立强【摘要】目的：检测胃癌组织中DNA损伤修复酶(O6—甲基鸟嘌呤—DNA甲基转移酶O6—methylguanineDNAmethyltransferase,MGMT)的表达变化，探讨其表达和胃癌临床病理特征之间的关系,进一步用于指导临床化疗方案的制定。方法：采用免疫组化方法（SABC法）检测55例胃癌标本中MGMT的表达情况。结果：MGMT在胃癌组织中的阳性表达率为43.64%（24/55），其阳性表达与年龄、

2、病理类型有关，而与性别`、分化程度、侵犯深度、淋巴结转移的相关性不明显。结论：MGMT对胃癌化学治疗方案的制定有指导作用。【关键词】胃癌；DNA损伤修复酶；免疫组化【ABSTRACT】Objective:ToinvestigatetheexpressionchangeofDNArepairingenzymeMGMTingastriccarcinoma,andtherelationshipbetweentheexpressionandpathologiccharateristic,soastoguidem

3、akingupoftreatingplan.Methods:Detecttheexpressionof55caseswithgastriccarcinomabySABCimmunohistochemistry.Results:Thepositive7expressionrateofMGMTinthegastriccarcinomawas43.64%(24/55).Therewasasignficantstatisticdifferencebetweenageandpathologictypeinth

4、eexpressionofMGMT,butnoobviouscorrelationamongsex,defferentiationdegree,invasiondepthandlymphnodemetastasis.Conclusion:TheexpressionofMGMTcanguidetomakeupaplanfortreatinggastriccarcinoma.【KEYWORD】Gastricarcinoma;DNArepairingenzyme(MGMT);Immunohistochemis

5、try烷化剂与DNA相互作用可以在DNA分子中形成各种烷化碱基，其中O6—甲基鸟嘌呤与基因突变和癌症发生关系最为密切。生物体内含有一种高度专一性DNA修复酶即O6—甲基鸟嘌呤—DNA甲基转移酶（O6—methylguanineDNAmethyltransferaseMGMT），该酶能够有效地修复DNA分子中O6位鸟嘌呤的烷化碱基,在防止烷化剂诱导的致癌、致突变和抗癌化疗过程中均起重要作用[1]，从而有效维持着基因组的稳定。本文主要讨论DNA损伤修复酶MGMT在胃癌中的表达变化及其与胃癌临床病理特征之间

6、的关系,进一步用于指导胃癌化学治疗方案的制定。1资料和方法71.1标本来源收集河北北方学院附属第一医院肿瘤外科2002.3～2005.4月间胃癌根治术切除的55例标本。其中女性患者17例,男性患者38例;年龄在29～79岁之间,平均年龄为53.87岁;高分化腺癌28例,中分化腺癌6例,低分化腺癌12例；粘液腺癌9例。所有患者术前均未经化疗和放疗。1.2试剂兔抗人MGMT多克隆抗体购自武汉博士德生物有限公司,SABC免疫组化试剂盒及DAB显色试剂盒均购自北京中杉金桥生物技有限公司。1.3方法（1）术后立即

7、取材,以4%多聚甲醛0.1MPSB(pH=7.2内含0.1ÞPS)固定约3h,常规脱水，浸蜡，包埋,连续切片,厚度约5μm；（2）将切片贴于涂有多聚赖氨酸的载玻片上,常规脱蜡至水；（3）抗原热修复：将切片浸入0.01M枸橼酸盐缓冲液，微波炉加热至沸腾，间隔5～10min,反复1～2次；（4）滴加5%BSA封闭液,室温20min;(5)滴加一抗(兔抗人IgG),4℃过夜;(6)0.01mol/LPBS冲洗2min×3次;(7)滴加生物素化山羊抗小鼠IgG,20℃～37℃,20min;(8)0.

8、01mol/LPBS冲洗2min×3次;(9)滴加试剂SABC,20℃～37℃,20min;(10)0.01mol/LPBS冲洗5min×4次;(11)DAB显色;(12)脱水,透明,封片。7阴性对照，以PBS代替一抗，其余步骤相同；阳性对照片为已知人胃癌阳性组织切片。1.4结果判定光镜下观察MGMT阳性物质分布在胞浆中,呈棕黄色。每张切片中阳性细胞数>5%为阳性病例,阳性细胞数<5%为阴性病例。1.5统计学处理组间比较采用χ2