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1、山茱萸生品及制品二氯甲烷萃取部位对D-半乳糖致衰小鼠骨髓细胞的影响作者：赵青春,董菊,杨柳,王明艳,杜逸芳【摘要】目的研究山茱萸生、制品二氯甲烷萃取部位对D-半乳糖致衰小鼠骨髓细胞的影响。方法单细胞电泳观察D-半乳糖致衰小鼠骨髓细胞DNA损伤情况,RT-PCR法检测小鼠骨髓细胞p53基因的表达情况。结果D-半乳糖致衰模型组小鼠骨髓细胞DNA拖尾率高于正常对照组(P＜0.05),且Ⅲ、Ⅳ级(中重度)损伤细胞数较多；山茱萸生品及制品二氯甲烷萃取部位组小鼠骨髓细胞DNA的拖尾率均低于D-半乳糖致衰模型组(P＜0.05)。D-半乳糖致衰模型组小鼠骨髓细胞p5
2、3基因的表达高于正常对照组、阳性药组及制品组。结论D-半乳糖致衰小鼠骨髓细胞DNA有损伤,山茱萸生、制品二氯甲烷萃取部位对D-半乳糖致衰小鼠骨髓细胞有保护作用；D-半乳糖致衰小鼠骨髓p53基因表达上调,山茱萸制品二氯甲烷萃取部位能显著下调D-半乳糖致衰小鼠骨髓p53基因的表达。【关键词】山茱萸；二氯甲烷萃取部位；D-半乳糖；骨髓细胞；小鼠 Abstract：ObjectiveTostudytheinfluencesofdichloromethaneextractionfromcrudeandprocessedCornusOfficinalisonb
3、onemarrowcellsofagingmiceinducedby12D-galactose.MethodsDNAdamageofbonemarrowcellsofagingmiceinducedbyD-galactosewasdetectedbythecometassay,theexpressionofp53mRNAwasdetectedbyRT-PCR.ResultsThetailformationrateofmodelgroupwassignificantlyhigherthantherateofcontrolgroup(P＜0.05)wit
4、halargenumberofⅢandⅣDNAdamagecells.Thetailformationrateofdichloromethaneextractiongroupswerebothsignificantlylowerthantherateofmodelgroup(P＜0.05).p53mRNAexpressionofmodelgroupwashigherthantherestexceptthecrudeCornusOfficinalisgroup.ConclusionThereisDNAdamageofbonemarrowcellsofa
5、gingmiceinducedbyD-galactose.BothdichloromethaneextractionfromcrudeandprocessedCornusOfficinalisareprotective.p53mRNAexpressionup-regulatesinmodelgroup,whileitssignificantlydown-regulationisdetectedintheprocessedCornusOfficinalisgroup. Keywords：CornusOfficinalis；dichloromethan
6、eextraction；D-galactose；bonemarrowcells；mice 山茱萸为山茱萸科落叶小乔木植物山茱萸(CornusofficinalisSieb.et12Zucc.)的干燥成熟果肉,又名枣皮、山芋、药枣、肉枣(《本草纲目》)、实枣儿(《救荒本草》)等[1-2],其味酸、涩,微温,归肝、肾经,功能补益肝肾、涩精固脱。临床用于内热消渴、眩晕耳鸣、腰膝酸痛、阳痿遗精、尿遗尿频、崩漏带下、大汗虚脱等。近年研究表明,山茱萸具有调节免疫、降血糖、抗休克、抑制血小板聚集、抗氧化、抗炎、抗菌、抗癌、保肝、治疗不育症等多种药理作用[3]。本
7、实验在以往课题研究的基础上,选取山茱萸生、制品二氯甲烷萃取部位,研究其对D-半乳糖致衰小鼠骨髓细胞的影响。 1实验材料 1.1药物与试剂 吐温-80、D-半乳糖,国药集团化学试剂有限公司,批号F20080324；生理盐水,上海百特医疗用品有限公司；维生素E胶丸,浙江医药股份有限公司新昌制药厂；TRIZOL,invitrogen；RT-PCR试剂盒,Promega；琼脂糖,中国医药上海化学试剂公司；TBE,生工·生物工程(上海)有限公司；正常熔点琼脂糖(NMPA),华美生物工程公司产品；低熔点琼脂糖(LMPA),Sigma公司产品,进口分装；Tr
8、itonX-100,Amresco公司产品,进口分装；溴化乙锭(EB),Sigma公司产品,进口分装。 1
