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1、免疫磁珠技术在肿瘤学领域的应用【摘要】免疫磁珠是免疫微球的一种,它是包被有单克隆抗体的球型磁性微粒,可特异性地与靶物质结合使之具有磁响应性,可以保证被分离靶细胞的形态和功能的完整,具有灵敏度高、特异性高、检测速度快、重复性好、操作简单和不需要昂贵的仪器设备等优点,本文就该技术应用于肿瘤细胞的分离、富集与检测以及肿瘤的生物学研究和磁导向治疗、免疫磁性净化等领域的研究进展作一综述。【关键词】免疫磁珠技术;循环肿瘤细胞;免疫磁性净化;综述 [Abstract]Immunomagneticbeads,akindofimmu
2、nomagneticmicrospheres,arethesphericalmagneticparticlescoatedwithmonoclonalantibodies,whichcanspecificallycombinewiththetargetmaterialandgetmagneticresponsivenessandensurethemorphologicalandfunctionalintegrityoftheseparatedtargetcells.Thehighersensitivityandspe
3、cificity,rapiddetection,wellrepeatability,easieroperationandlessexpensiveequipmentrequirementmakethistechniquemorepopular.Immunomagneticbeadshavegraduallybeenappliedtotheseparation,enrichmentanddetectionoftumorcells,aswellastotumorousbiologicalresearchandtarget
4、edtherapy,immunomagneticpurificationandotherfields.14 [Keywords]immunomagneticbeads;circulatingtumorcells;immunomagneticpurification;review 免疫磁珠(immunomagneticbead,IMB)技术是近年来国内外研究的一种新的免疫学技术。IMB是免疫微球的一种,为包被有单克隆抗体的球型磁性微粒,可特异性地与靶物质结合使之具有磁响应性。该技术由JohnUgelstar等于19
5、79年首先制备出,从此被广泛地应用于医学卫生领域的许多方面,并由此引发了生物分离技术上的一次革命。 1IMB技术的基本原理 IMB是一些以金属小颗粒为核心的微球,其外层可以根据需要包被不同的免疫活性物质(抗原、抗体等),使其结合样本中具有相应免疫配基的靶细胞;再利用磁场的作用把这些磁珠与靶细胞的复合体分离出来。IMB技术区别于PCR技术和流式细胞技术的一个最明显的优势在于,它可以保证被分离靶细胞的形态和功能的完整。免疫磁珠技术同时还具有灵敏度高、特异性高、检测速度快、重复性好、操作简单和不需要昂贵的仪器设备等优点
6、。14 用IMB技术进行分离细胞有两种方式:直接从细胞混合液中分离出靶细胞的方法称为阳性分离;用IMB去除无关细胞使靶细胞得以纯化的方法称为阴性分离。 2肿瘤细胞的分离、富集与检测 肿瘤的转移和浸润是影响肿瘤患者预后的重要因素,易导致肿瘤的复发和转移,且早期即可发生,所以早期实体肿瘤也被认为是全身性疾病。IMB技术应用于肿瘤学可以确定临床分期、监测术后患者肿瘤复发与转移、评估预后、选择个体化的治疗策略。 基于IMB技术可以分离有活性特异细胞的基本原理,IMB技术广泛应用于肿瘤细胞的分离、富集与检测。根据肿瘤细
7、胞不同的生物学特性,先将特异的抗体标记在磁珠上,通过肿瘤细胞特异性抗体对肿瘤细胞表面抗原的特异识别,在磁场作用下达到分离细胞的目的。这样,肿瘤特异性抗原不仅被用来区分肿瘤细胞与正常细胞,还被用来将肿瘤细胞富集起来,大大增加了检测的敏感性。 分离肿瘤细胞的关键在于包被磁珠的特异性标记的选择。常用的肿瘤细胞的检测标记有细胞角蛋白、癌胚抗原、基质金属蛋白酶和端粒酶等。IMB特异性标记的选择直接关系到肿瘤细胞分离的灵敏度和特异性。阴性选择法利用IMB去除无关细胞从而使肿瘤细胞得以富集、纯化,主要的优点在于其不依赖肿瘤细胞表
8、达特异性标记。14 IMB在肿瘤细胞分离中的应用主要表现在以下几个方面： 2.1外周血中肿瘤细胞的检测 大量证据表明,原发肿瘤在早期就有肿瘤细胞脱落到循环系统,这些脱落的肿瘤细胞是常用的检测手段很难检测到的,被称为循环肿瘤细胞(circulatingtumorcell,CTC)、外周血微转移等。肿瘤治疗失败的主要原因就在于不能早期发现并控
