对磺酸基杯[]芳烃与血红蛋白相互作用的光谱研究

《对磺酸基杯[]芳烃与血红蛋白相互作用的光谱研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、对磺酸基杯[4]芳烃与血红蛋白相互作用的光谱研究第23卷第6期分析科学Vo1.23No.6J0URNAIOFANALYTICALSCIENCE2007年12月Dec.2OO7文章编号:1006～6144(2007)06—0681—04对磺酸基杯[4]芳烃与血红蛋白相互作用的光谱研究林琳,孙素颜,穆雪.,刘睿,台保献¨(1.郑州大学化学系,郑州45OO52;2.厦门大学化学化工学院,福建厦门361005)摘要:用荧光光谱法和紫外可见分光光度法研究了表面活性剂存在下对磺酸基杯E4]芳烃与牛血红蛋白的相互作用机理.由Stern-Vo

2、lmer方程及紫外可见吸收光谱图确定对磺酸基杯E4]芳烃对血红蛋白的荧光猝灭过程为动态猝灭,求出了猝灭常数.由热力学参数判断二者之间的作用力主要是疏水作用.依据能量转移理论得出荧光给体一受体间的距离r.在同步荧光光谱中,对磺酸基杯E4]芳烃的加入对血红蛋白构象的改变不大.关键词:对磺酸基杯E4]芳烃;血红蛋白;荧光猝灭中图分类号:0657.39文献标识码:A血红蛋白(hemoglobin,Hb)是脊椎动物红细胞内的呼吸蛋白,起着运输Oz,COz,分解HzOz等与氧和能量代谢有关的重要作用.有关血红蛋白与内源及外源性化合物的结合

3、机制对于生命科学,化学,药学和临床医学具有重要的意义.而杯芳烃(Calixarene)被认为是继环糊精,冠醚之后的第三大类充满魅力的新型化合物.水溶性杯芳烃在生物学及制药方面的应用始于1955年Cornforth发现磺酸基杯芳烃具有抗结核的性质口:.由此,水溶性杯芳烃引起了科学工作者的广泛兴趣.研究发现其具有抗血栓,抗菌,抗癌和抗艾滋病病毒口],抑制酶及赖氨酰氧化酶等的活性.本文在模拟人体生理条件下(pH为7.4,离子强度为0.1),用荧光光谱法和紫外可见分光光度法研究了对磺酸基杯[4]芳烃(4一Sulfonicealix~4

4、]arene,SCX4)与血红蛋白的相互作用,计算了猝灭常数和热力学参数,同时考察了SCX4对血红蛋白构象的影响.其结果为水溶性杯芳烃在制药及生命科学研究方面提供了有益的实验数据.1实验部分1.1仪器和试剂日立F-3010型荧光光度计(日本,日立公司);UNICOUV一2102PC型紫外一可见分光光度计;HANApH213型酸度计.牛血红蛋白(天津市中山研究所)配制成1.56×10mol?I储备液并于冰箱4.C保存;1.0×10mol?L对磺酸基杯[4]芳烃溶液(AcrosOrganics公司,纯度为95);5.0×10mol

5、?I十二烷基硫酸钠溶液(SDS,上海化学试剂公司);pH一7.4的Tris—HC1缓冲溶液(内含0.1mol?LNaC1溶液);所用试剂均为分析纯以上,实验用水为二次蒸馏水.1.2实验方法在一系列10mI比色管中依次加入1mL血红蛋白储备液,2mLSDS溶液,一定量的SCX4溶液及2mL缓冲溶液,定容后放置15min.在最大激发波长281nm处测定体系的荧光强度,并扫描△一8Onm时的同步荧光光谱.收稿日期:2007—0320修回日期:200705—23基金项目:国家自然科学基金(No.20475O50);河南省基础与前沿技术

6、研究项目(No.O723[)()42(j()8O)通讯联系人:冶保献,男,博士,教授,研究方向:生物分析化学.681第6期林琳等:对磺酸基杯[4]芳烃与血红蛋白相互作用的光谱研究第23卷2结果与讨论2.1荧光光谱血红蛋白分子中含有色氨酸,酪氨酸和苯丙氨酸残基,能够发射荧光,但血红蛋白的内源荧光微弱(图la),加入表面活性剂后可以极大地增强其荧光强度(图lb),且最大发射波长由338nm蓝移至331nm.在此二元体系中再加入SCX4溶液后,体系的荧光强度明显降低(图lc).荧光峰的位置无变化.图2为SCX4浓度的改变对血红蛋白荧

7、光强度的影响.如图所示,随着SCX4浓度的增加,血红蛋白的荧光强度逐渐降低,表明二者间存在相互作用.Fig.1ThefluorescencespectraofHb(a),Hb-SDS(b)andHb-SDS-SCX4(c)Cscx4:3.5×10mol?L;Hb:1.56×10一mol?L一;csDs:1.0×10.mol?I.150Ol5O300350400450fnmOFig.2Thefluorescencequenchingspectraofhemo-globinuponadditionofSCX4Hb:1.56×10m

8、ol?L;sDs:1.0×10.mol?L;cscx4from1to7is0,0.1,0.5,1,1.5,2and2.5(×1Omol?I).Thelowestcurveisthespectraofhemo—globinwithoutSDS.2.2表面活性剂的选择表面活性剂对