病理制片技术规范

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时间:2018-08-04

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1、病理制片技术的规范病理技术是病理学诊断不可分割的一部分,制片质量的好坏很大程度上影响病理医生做出正确的病理诊断。因此,保证和提高制片质量是每个病理技术员的责任。为了保证制片质量,减少差错,防范责任事故,避免医疗纠纷,有必要加强对病理技术进行科学规范管理和制片的控制,为提高临床病理诊断水平,促进临床病理学事业的发展做出我们应有的贡献。一、 高素质技术人员的规范管理1. 要有敬业精神,强烈的工作责任心、2. 努力学习,刻苦钻研,掌握过硬的基本功,引进和学习新技术,工作精益求精。3. 领导重视,为技术人员提供进修学习和提高的机会。4. 技术员和医生,技术员与技术员互相团结,密

2、切配合,发挥团队精神的作用、二、 仪器设备分规范管理1. 配备先进,高质量的仪器设备是保证和提高制片质量的重要条件、2. 正确使用,定期维修保养,保证仪器设备在最佳的状态下工作、三、 标本和资料档案的规范管理1. 标本和送检单的接收检查标本和送检单的名字是否相符,有否标本,有没有病史。标本补充固定液,送检单编号登记。 2. 资料档案的规范管理诊断报告发出后,附有诊断报告记录的送检单、玻片和组织蜡块存档并专人保管。建立严格的资料借出制度,确保档案资料不被丢失。四、 技术操作规范1. 及时固定组织:应采用10%~20%甲醛液(10%甲醛液即用浓甲醛液1份加蒸馏水9份稀释)固

3、定组织,因甲醛易氧化成甲酸,因此多会偏酸性,最理想的是配成中性甲醛液。巨大组织要切开固定,小块组织的固定时间约4小时左右,然后取材时修切成大小约22 x 22mm,厚不超过2mm的组织块进行脱水。取材时必须注意核对编号是否与送检单上的病理号一致,并记录好对大体标本的描述,取材组织的形状和数量。l 常规固定液的配制(1) 10%甲醛液浓甲醛 10ml蒸馏水 90ml(2 ) 缓冲中性甲醛液浓甲醛 10mlPBS缓冲液(Ph7.2) 90ml (3 ) 10%中性甲醛液浓甲醛 10ml蒸馏水 90ml碳酸钙 加至饱和•冷冻切片固定液(1) 乙醚酒精液无水乙醚 1份95%酒精

4、 1份(2) 酒精—冰醋酸液 95%酒精 100ml冰醋酸 3~5滴•细胞学涂片固定液的配制(1) 酒精—冰醋酸液95%酒精 97ml冰醋酸 3ml(2) 乙醚--酒精液95%酒精 50ml乙醚 50ml冰醋酸 1ml(3) Carney`s液无水酒精 60ml氯仿 30ml冰醋酸 10ml2. 脱水彻底:脱水液常用乙醇,用乙醇脱水要由低浓度逐级上行至高浓度(一般70%~100%的浓度),逐步置换组织内的水份。组织在乙醇脱水时,低浓度乙醇的时间可适当延长,高浓度乙醇脱水时间不能过长。3. 透明充分: 透明液多采用二甲苯,组织脱水后转入二甲苯,依据组织的大小、厚薄,约置3

5、0~90分钟。4. 浸蜡足够: 浸蜡多用纯净而熔点稍低(56~58度)的石蜡,浸蜡时采用三级或四级,以尽量清除二甲苯。浸蜡时间依据组织大小厚薄而定,一般为1~2少时。浸蜡时包埋机所设定的温度应比所用石蜡熔点稍高以保持石蜡恰在熔溶状态。这样,组织才能取得良好的浸蜡效果。如浸蜡温度过高,导致组织收缩,变硬变脆,难以切出理想切片。5. 包埋恰当:包埋时,包埋石蜡的温度要比组织高(约3~5度),否则包埋冷凝后组织与包埋石蜡分离,特别是在冷天包埋时,动作更要迅速,否则容易导致组织与石蜡融合不好,影响切片。包埋是时把组织最大最平切面或所需是病灶切面向下,对皮肤、肠管和囊壁等层次清楚

6、的组织其切面应包含有各层组织。组织包埋完后,要与取材时记录的组织形状和数量核对,发现问题,及时解决。6. 切片要薄:切片首要任务是把切片刀研磨锋利,这是能否切薄而平整切片的关键。其次要把刀架上的切片清除角调至2~5度,在此角范围内,才能切出良好蜡片。如使用一次性刀片,可转动刀座上的弧形刻度盘选取最合适的刻度(该合适刻度并不等于真正的切片清除角)。切片前要把切片机上有关的各螺旋拧紧,如没有拧紧或包埋少组织蜡块过硬时就会出现跳片,使蜡片成一截厚一截薄。切片的厚度应为3~4μm,对一些组织如淋巴结、鼻咽和扁桃体,切片的厚度应为2~3μm 。7。贴片烤片:切出的蜡片应放在恒温贴

7、片盆内展开,并根据所用包埋石蜡的温度调节水温在42~46度左右。为了利于展平蜡片,可先把蜡片放在一缸缸约10~15%乙醇内,然后用玻片再将蜡片移至恒温贴片盆,由于水的表面张力比乙醇大,蜡片由乙醇移至水后就很容易展平。贴片时再注意“定点”和“定向”。最后即可置入约60~65度的烤片箱内烤15~30分钟,也可放在热板上烘干,蜡片就可牢固地粘附在载玻片或盖玻片上。8. 切片在染色前必须脱蜡干净:未完全脱蜡的组织切片,染色后组织和细胞模糊不清。脱蜡要用两级或三级脱蜡剂如二甲苯,时间为10~20分钟,应视所用二甲苯的新旧以及室温情况而定。脱蜡时间宁

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