人教版生物选修3知识提纲

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1、选修三复习提纲专题1 基因工程一、基因工程:指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组和转基因技术,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。不同生物DNA的基本单位、空间结构、碱基配对方式都相同,故不同生物DNA能够重组。原理是基因重组。二、基因工程的基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)①来源:主要从原核生物中分离纯化出来。②功能:能识别特定双链DNA的核苷酸序列,并在特定位点切割两个核苷酸之间的磷酸二酯键。大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成。③

2、结果:产生的DNA片段末端有黏性末端和平末端两种形式。2、“分子缝合针”——DNA连接酶,缝合两个核苷酸之间的磷酸二酯键。①分类:根据酶来源的不同,可分为E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶两类。②作用:将两个DNA片段连接成重组DNA。E•coIiDNA连接酶来源于大肠杆菌,只能连接黏性末端;T4DNA连接酶能连接两种末端,但连接平末端的效率较低。3、“分子运输车”——载体,携带目的基因进入受体细胞。①特点:a、能在受体细胞中自我复制并稳定保存。b、有一至多个限制酶切割位点,供外源DNA片段插入。c、

3、有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。d、对受体细胞无害。②种类:质粒(核外能自我复制的小型双链环状DNA)、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒。三、基本操作程序第一步:目的基因的获取1、目的基因主要是指编码蛋白质的基因。2、目的:有了目的基因才能赋予一种生物以另一种生物的遗传特性。3、获取方法:①从基因文库中获取目的基因。②PCR技术扩增目的基因。③人工合成法:反转录法(mRNA反转录形成双链DNA)和化学合成法(已知蛋白质氨基酸序列化学合成DNA)。4、注意:①基因文库包括基因组文库(某生物的所有基因,有启动子

4、和内含子)和部分基因文库(某生物的部分基因,如cDNA文库,无启动子和内含子)。②cDNA指以mRNA为模板反转录产生的互补DNA。③反转录和逆转录没有本质区别,不过反转录在人工条件下实现,逆转录在生物体内发现。④PCR是聚合酶链式反应的缩写,是一种体外复制特定DNA片断的核酸合成技术。原理:DNA双连复制。条件:模板、2种引物、TaqDNA聚合酶、四种游离的脱氧核苷酸。结果:呈指数形式扩增。过程:每一次循环包括变性、复性、延伸。第二步:基因表达载体的构建-------基因工程的核心1、目的:使目的基因在受体

5、细胞中稳定存在遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因①启动子:是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位,启动转录过程。②终止子:是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因尾端,终止转录过程。③标记基因:鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。3、方法:同一种限制酶分别切割载体和含有目的基因的DNA分子,用DNA连接酶把两者连接。第三步:将目的基因导入受体细胞1、转化:指目的基因进入受体细胞内,并且在受体细

6、胞内维持稳定和表达的过程。2、常用方法:①导入植物细胞:农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法。常用受体细胞是体细胞。采用最多的方法:农杆菌转化法,原理:农杆菌能感染双子叶植物和裸子植物,目的基因插入Ti质粒T-DNA→转入农杆菌→导入植物细胞→目的基因插入受体细胞染色体DNA上。基因枪法是单子叶植物常用方法。花粉管通道法,借助花粉管通道使目的基因进入受体细胞。②导入动物细胞:显微注射法。常用受体细胞是受精卵。③导入微生物细胞:Ca+处理法,Ca+处理受体细胞→感受态细胞→吸收DNA分子。常用受体细胞是原核生物

7、,如大肠杆菌。原核生物特点:繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少。第四步:目的基因的检测和表达----只有通过检测和鉴定才能知道基因工程是否成功。1、检测目的基因是否插入受体细胞的染色体DNA上,采用DNA分子杂交技术。2、检测目的基因是否转录出mRNA,采用DNA-RNA杂交技术。53、检测目的基因是否翻译出蛋白质,采用抗原-抗体杂交技术。4、个体生物学水平的鉴定,如抗性鉴定,功能活性鉴定等。四、基因工程的应用1、植物基因工程:提高农作物的抗逆能力,改良农作物品质和利用植物生产药物等。2、动物基因工程:提高

8、动物生长速度,改善畜产品品质,转基因动物作为器官移植的供体,利用转基因工程菌生产药物。3、基因治疗:把正常的外源基因导入病人体内,使该基因表达产物发挥作用,从而达到治病的目的。方法分为体内基因治疗和体外基因治疗。五、蛋白质工程‐‐在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程。1、概念:指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质

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