生物组织中还原性糖、蛋白质的鉴定导学案

生物组织中还原性糖、蛋白质的鉴定导学案

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时间:2018-08-04

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1、高一年级生物导学案班级__________姓名__________组别________生物组织中还原性糖、蛋白质的鉴定【课前自主预习】一.实验目的:  尝试用化学试剂检测生物组织中还原性糖和蛋白质,阐明实验原理—颜色反应,识记和区分用于还原性糖、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色,初步掌握鉴定上述化合物的基本方法,学会描述实验现象,掌握NaOH溶液和CuSO4溶液的使用方法。二.实验原理:某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。1.生物组织中普遍存在的还原性糖类较多,有单糖、麦芽糖和乳糖。由于分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基,因此叫做还原糖;蔗糖、淀粉

2、等分子内没有,为非还原糖。实验中所用的斐林试剂,只能鉴定生物组织中还原性糖,而不能鉴定非还原性糖。还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu2O沉淀。如:葡萄糖+2Cu2++4OH—  加热葡萄糖酸+Cu2O↓(砖红色)+H2O即Cu2+被还原成Cu2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。用斐林试剂鉴定还原糖时,溶液变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色沉淀2.蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。(蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用,产生紫色反应。)三.实验材料1.做还原性糖鉴定实验,应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如

3、苹果、梨。(因为组织的颜色较浅,易于观察。)经试验比较,颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。2.做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。四、实验试剂1.斐林试剂(包括甲液:质量浓度为0.1g/mLNaOH溶液和乙液:质量浓度为0.05g/mLCuSO4溶液)2.双缩脲试剂(包括A液:质量浓度为0.1g/mLNaOH溶液和B液:质量浓度为0.01g/mLCuSO4溶液)五、方法步骤:(一)还原性糖的鉴定操作方法注意问题解释1.制备组织样液。(去皮、切块、研磨、过滤)苹果或梨组织液必须临时制备。因苹果多酚氧化酶含量高,组织液很易被氧化成褐色,将产生的颜色掩

4、盖。2.取1支试管,向试管内注入2mL组织样液。  3.向试管内注入1mL新制的斐林试剂,振荡。应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂; 切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。斐林试剂很不稳定,甲、乙液混合保存时,生成的Cu(OH)2在70~900C下分解成黑色CuO和水;甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应,无CuOH生成。4.试管放在盛有50-650最好用试管夹夹住试管上部,使试管底部不触及烧杯底部,试管口不朝向实验者。防止试管内的溶液冲出试管,造成烫伤;高一年级生物导学案班级__________姓名_________

5、_组别________C温水的大烧杯中,加热约2分钟,观察到溶液颜色:浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)  (三)、蛋白质的鉴定操作方法注意问题解释制备组织样液。(浸泡、去皮研磨、过滤。) 黄豆浸泡1至2天,容易研磨成浆,也可购新鲜豆浆以节约实验时间。鉴定。加样液约2ml于试管中,加入双缩脲试剂A,摇匀;再加入双缩脲试剂B液3~4滴,摇匀,溶液变紫色。A液和B液也要分开配制,储存。鉴定时先加A液后加B液。  CuSO4溶液不能多加。先加NaOH溶液,为Cu2+与蛋白质反应提供一个碱性的环境。A、B液混装或同时加入,会导致Cu2+变成Cu(OH)2沉淀,而失效。否则CuSO4的蓝色会遮盖

6、反应的真实颜色。可用蛋清代替豆浆。蛋清要先稀释。如果稀释不够,在实验中蛋清粘在试管壁,与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上,使反应不容易彻底,并且试管也不易洗干净。【课堂自主探究】思考1.完成下列表格:还原性糖淀粉蛋白质试剂现象思考2.试以葡萄糖为例写出相应方程式:思考3.蛋白质检测的反应机制是什么?思考4.做还原性糖鉴定实验应选择什么样的实验材料?为什么?思考5.为什么苹果或梨组织液必须临时制备?思考6.做蛋白质的鉴定实验应选择什么样的实验材料?思考7.斐林试剂与双缩脲试剂相同吗?区别是什么?思考8.实验中应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、乙液等量混匀成

7、斐林试剂,为什么?思考9.实验中能否将斐林试剂的甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测?为什么?思考10.还原糖溶液检测过程中出现的颜色变化过程是怎样的?思考11.蛋白质检测时为什么要先加双缩脲试剂A液后加B液,而不能同时加入?思考12.检测时向试管内加双缩脲试剂B液4滴,为什么CuSO4溶液不能多加?

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