果蝇唾腺染色体制片课件

果蝇唾腺染色体制片课件

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时间:2018-08-06

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1、实验六果蝇唾腺染色体制片一、实验目的二、实验材料三、实验原理四、实验用具药品五、实验步骤一、实验目的了解果蝇唾液腺染色体的形态学及遗传学特征;学习分离果蝇幼虫唾液腺的技术。实验目的实验材料实验原理实验用具药品实验步骤二、实验材料图1果蝇的生活史1.卵2.一龄幼虫3.二龄幼虫4.三龄幼虫5.蛹6.成虫野生型果蝇三龄幼虫实验目的实验材料实验原理实验用具药品实验步骤一龄幼虫两龄幼虫三龄幼虫果蝇不同生活周期形态观察蛹实验目的实验材料实验原理实验用具药品实验步骤三、实验原理果蝇唾腺染色体特点:巨大,是多线染色体;正常:间期DNA复制两条染色单体着

2、丝点裂开子染色体核分裂胞质分裂果蝇:有丝分裂停止在分裂间期,DNA不断自我复制,着丝点不裂开同源染色体紧密配对:体细胞联会,所以染色体只呈现单倍数;形成染色中心,从染色体中心处伸出5条长臂,1条短臂;染色后,出现一系列宽窄不同、染色深浅不一的横纹;实验目的实验材料实验原理实验用具药品实验步骤果蝇唾腺染色体图果蝇唾腺染色体模式核型实验目的实验材料实验原理实验用具药品实验步骤四、实验用具药品1.仪器用具:显微镜、双目解剖镜、培养瓶、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、吸水纸、酒精灯、火柴等。2.药品试剂:无水酒精、冰醋酸、1%醋酸洋红、改良苯酚品

3、红、生理盐水、1N盐酸、蒸馏水。3.培养基:玉米琼脂培养基。实验目的实验材料实验原理实验用具药品实验步骤实验目的实验材料实验原理实验用具药品实验步骤五、实验步骤1、选取幼虫;2、腺体剖取;3、腺体解离;4、染色;5、压片;6、观察。1、选取幼虫:取三龄幼虫,置于载玻片上,并滴加一滴生理盐水,观察幼虫结构:具一钝尾和带黑色口器的尖头端实验目的实验材料实验原理实验用具药品实验步骤尾头2、腺体剖取:实验目的实验材料实验原理实验用具药品实验步骤取两支解剖针,一针压住幼虫身体的近头端1/3处,固定幼虫,另一针压住幼虫头部,压点尽可能靠头部口器处。

4、将解剖针平稳前移,使头部与身体拉开,口器部分断开,体内各器官从切口挤出,一对唾腺也随之而出。唾腺脂肪体解剖针解剖针3、腺体解离:剥离脂肪体及其他杂物,分离出纯净的唾腺,用吸水纸小心吸去生理盐水。加1滴1NHCl,浸2—3分钟,使组织疏松,以便压片时细胞分散,染色体散开。实验目的实验材料实验原理实验用具药品实验步骤4、染色:用吸水纸吸去盐酸,加1滴蒸馏水轻轻冲洗后吸干,重复3~4次,洗净残留的盐酸。加2滴石炭酸品红染液,染色10—20分钟(此过程应保持腺体一直处于染液的浸泡中)。实验目的实验材料实验原理实验用具药品实验步骤5、压片:换上新

5、鲜染液或45%醋酸,取盖玻片和双面刀片,双面刀片放于盖玻片和载玻片间,吸去多余染液,进行压片。在盖玻片上用解剖针柄轻轻敲压,将染色体完全压散。将刀片取出,再用中指轻轻压片,使细胞充分分散。实验目的实验材料实验原理实验用具药品实验步骤6、观察:将制片置低倍镜下找到分散好的标本,移至视野中心,然后转到高倍镜下观察。对分散良好、染色体臂充分伸展的片子,应仔细观察染色体的横纹数量、形状和排列顺序,对照模式照片辨认出不同的染色体臂。实验目的实验材料实验原理实验用具药品实验步骤六、注意事项1.一定加生理盐水,否则唾腺易干。2.将脂肪组织清除干净。3

6、.水不可太多,否则幼虫会漂浮而且活跃。4.染色时间不可过长,否则背景也着色。5.压片时要揉,用力要均匀。6.染色完后,将旧的染色液吸去,加新的染色液,再压片。7.吸水时勿将唾腺一起吸走。七、作业及思考题1.绘制在显微镜下所看到的果蝇唾腺巨染色体示意图,标明实际标本在观察中所能分辨的典型部位。2.每人制1张染色体分散、横纹清晰的临时片。3.什么是染色中心(chromocenter)?4.根据你所学的知识,联会(synapsis)应出现在什么类型的细胞中?5.利用巨大染色体可以进行哪些遗传学研究?

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