碳源对琥珀酸放线杆菌发酵产丁二酸的影响及其代谢流量分析

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1、微生物学通报SEP20,2009,36(9):1283~1288Microbiology©2009byInstituteofMicrobiology,CAStongbao@im.ac.cn研究报告碳源对琥珀酸放线杆菌发酵产丁二酸的影响及其代谢流量分析刘宇鹏1,2郑璞2倪晔2董晋军2孙志浩2*(1.河南大学生命科学学院生物工程研究所河南开封475004)(2.教育部工业生物技术重点实验室江南大学生物工程学院江苏无锡214122)摘要:在厌氧条件下,Actinobacillussuccinogenes能够利用单糖、双糖和糖醇

2、等碳水化合物发酵生成丁二酸,其中以山梨醇为碳源时丁二酸的产量最高。代谢流量分析结果表明:与葡萄糖发酵相比较,由于代谢系统中积累了更多的NADH,使得代谢网络关键节点PYR和AcCoA处的代谢流量分配有了较大的变化,导致更多的碳源流向丁二酸和乙醇,而乙酸和甲酸的分泌相对减少。关键词:琥珀酸放线杆菌,碳源,代谢流量分析(MFA)EffectofDifferentCarbonSourcesonSuccinicAcidProductionofActinobacillussuccinogenesandMetabolicFluxAn

3、alysisLIUYu-Peng1,2ZHENGPu2NIYe2DONGJin-Jun2SUNZhi-Hao2*(1.InstituteofBiotechnology,CollegeofLifeScience,HenanUniversity,Kaifeng,Henan475004,China)(2.KeyLaboratoryofIndustrialBiotechnology,MinistryofEducation,SchoolofBiotechnology,JiangnanUniversity,Wuxi,Jiangsu2

4、14122,China)Abstract:Inanaerobicbottlesfermentation,glucose,fructose,xylose,lactose,maltose,sucroseandsugaralcoholscouldbeusedtoproducesuccinicacidwithActinobacillussuccinogenes.Whensorbitolwasutilizedasthecarbonsourceinthebatchfermentation,moresuccinateandethano

5、lwereproducedcomparedwiththoseusingglucose,whileproducinglessacetateandformate.ThemetabolicfluxanalysisresultsshowedthatthefluxpartitioningatPEPnodewasstablewhenglucosewasreplacedbysorbitol,butthefluxpartitioningatPYRandAcCoAnodeschangedalotbecausemorereducingpow

6、er(NADH)wasgeneratedtomeetthemorerequirementthesynthesisofsuccinateandethanol.Keywords:Actinobacillussuccinogenes,Carbonsources,Metabolicfluxanalysis(MFA)丁二酸(Succinicacid)又称琥珀酸,是一种重要的化工产品,广泛应用于医药、农药、染料、香料、油漆、食品、塑料和化学工业。化学合成的丁二酸因依赖石化原料等原因,存在生产成本增高的趋势,基金项目:国家863计划

7、项目(No.2006AA02Z235);长江学者和创新团队发展计划(No.IRT0532);河南省教育厅自然科学基础研究计划项目(No.2009B180004);河南大学校内基金项目(No.2008YBGG042)资助*通讯作者:Tel:86-510-85918252;:sunw@public1.wx.js.cn收稿日期:2009-01-06;接受日期:2009-05-13从而使微生物发酵可再生原料生产丁二酸的方法倍受重视。发酵法生产丁二酸是以可再生糖源(如葡萄糖)和二氧化碳作为主要原料,不仅摆脱了对石化原料的依赖,而且

8、开辟了利用温室气体二氧化碳的新途径,使得丁二酸发酵成为一个新兴的、很有发展潜力的绿色工艺,成为近年来国内外的研究热点[1]。代谢工程的实质在于对细胞代谢流量及其控制进行定量分析,并在此基础上对代谢过程进行合理调节,以最大限度地提高目的代谢产物的产率[2]。代谢流量分析(Metabolicfluxanalysis,MF

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