茶园土壤微生物群落结构变化动态的研究

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1、茶园土壤微生物群落结构变化动态的研究报告人：苏远科指导老师:刘波研究员农业生物资源研究所农业生物资源研究所论文概述研究意义研究内容结论分析技术路线农业生物资源研究所论文概述磷脂脂肪酸(phospholipidfattyacid，PLFA)图谱分析，在微生物群落动态分析上的应用十分广泛。磷脂是构成生物细胞膜的主要成分，约占细胞干重的5％。在细胞死亡时，细胞膜很快被降解，磷脂脂肪酸被迅速代谢掉，因此它只在活细胞中存在，十分适合于微生物群落的动态监测。另一个重要因素是脂肪酸具有属的特异性，特殊的甲基脂肪酸已经被作为微生物分类

2、的依据。磷脂脂肪酸谱图分析法首先将磷脂脂肪酸部分提取出来，然后用气相色谱分析，得出PLFA谱图。群落的微生物结构发生变化，即可以通过谱图的变化得到快速有效的监测。本文就是利用PLFA图谱分析研究安溪不同树龄，海拔高度，季节的茶园土壤微生物群落动态变化，从而对安溪茶园土壤微生物群落结构及变化有一定的了解，对茶园生态建设提供理论指导。农业生物资源研究所研究意义安溪乌龙茶全国文明，茶香，茶色，茶味，都有独到之处，形成如此优良的品质和当地自然环境包括地理水文光照土壤等是分布不开的，在这种独特的环境中一定也孕育着独特的土壤微生物群

3、落。茶园土壤微生物群落作为一种指标反映茶园土壤及茶树生长状况。对茶园生态建设有一定的指导意义。目前在国内还很少人利用磷脂脂肪酸图谱分析对茶园土壤微生物群落进行研究。所以本文应用PLFA分析法对不同树龄，海拔，季节的茶园土壤微生物群落变化动态进行比较系统的研究，有一定理论意义和实用价值。农业生物资源研究所研究内容从安溪感德和西平两地，根据不同季节，不同树龄，不同海拔采集茶园土样。进行土壤磷脂脂肪酸提取及测定。通过聚类分析主成分分析等统计学方法对磷脂脂肪酸图谱分析来研究茶园土壤微生物群落在不同季节，海拔高度，及不同树龄情况下

4、茶园土壤微生物群落动态变化及差异。土样采集地点选择农业生物资源研究所技术路线土样采集和保存土样磷脂脂肪酸提取和测定测量数据处理和汇总不同季节茶园土壤磷脂脂肪酸分析不同树龄茶园土壤磷脂脂肪酸分析不同海拔高度茶园土壤磷脂脂肪酸分析农业生物资源研究所磷脂脂肪酸提取方法及步骤KOH甲醇溶液和4g的新鲜土样加到50ml的离心试管中，混合均匀在37℃下温育1h(脂肪酸释放，并甲脂化，样品10min涡悬1次)加入3ml1.0mol/L的醋酸溶液中和pH值，充分摇匀。加10ml正己烷，使磷脂脂肪酸（PLFA）转到有机相中，800r/mi

5、n离心，将上层正己烷转到试管中，在N2气流下挥发掉溶剂用1ml体积比为1:1的正己烷:甲基丁基醚溶液溶解,用作GC分析。碱裂解与甲脂化中和脂肪酸萃取脂肪酸提取GC分析农业生物资源研究所土样编号海拔（m）茶园树龄（年）备注16003剑斗后山茶场老茶园改造26003剑斗后山茶场老茶园改造新土35003剑斗仙荣村47003感德槐杨茶园57003感德槐杨茶园新土68003感得槐东村大岭75004剑斗仙荣村88005感德槐东村大岭98008感德槐东村大岭1080015感德槐东村大岭1150022剑斗仙荣村1250022剑斗仙荣村新

6、土1370022感德槐杨茶园1470022感得槐杨茶园新土1570025剑斗黄壤土1650015感德仙荣新土1780010感德槐东村大岭新土不同海拔高度茶园土壤微生物PLFAs生物标记分析土样采集时间地点及生境类型农业生物资源研究所不同海拔高度茶园土壤微生物PLFAs生物标记分析图1不同海拔茶园土壤磷脂脂肪酸生物标记总量比较农业生物资源研究所图2不同海拔茶树根际土壤细菌，真菌，放线菌特征性磷脂脂肪酸标记含量的变化不同海拔高度茶园土壤微生物PLFAs生物标记分析农业生物资源研究所20:0020:1ω9Ca17:1ω9C10

7、Me18:012:03OH13:02OH15:03OHi15:1G16:12OH17:0010Me17:0i17:03OH18:02OH19:010Me14:1ω5C16:0NALCOHOLi15:03OHi15:1F17:0CYCLO12:0014:0018:3ω6C(6,9,12)15:0cy19:0ω8Ci16:017:0A18:0016:010Me16:0018:1ω9Ci15:016:1ω5Ci17:016:0A18:1ω7C类型一其特征为磷脂脂肪酸生物标记为不完全分布且分布量低类型二其特征是磷脂脂肪酸生物标记

8、完全分布、在各海拔平均分布量较高不同海拔高度茶园土壤微生物PLFAs生物标记分析农业生物资源研究所当欧氏距离为10左右时，可将不同海拔茶园的磷脂脂肪酸生物标记分成两个大的类群。类型Ⅰ包括脂肪酸标生物标记20:00、20:1ω9C、a17:1ω9C、12:00、10Me18:0、12:03OH、13:02OH、14:0