兽医微生物实习总结

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1、动物科技学院本、专科生毕业实习总结姓名：学院：专业：班级：学号：2012年5月31日学生姓名学号专业班级指导教师实习地点预防兽医微生物实验室一、实习目的、任务1.熟悉实验室内微生物鉴定的基本流程。2.熟练实验室内细菌的鉴定的操作3.了解沙门氏菌形态与染色特性以及主要培养特性；4.熟悉沙门氏菌常规微生物学诊断法；5.掌握沙门氏菌生化试验的方法和原理；6．熟悉沙门氏菌在选择性和鉴别培养基上的生长表现；二、实习内容未知细菌的分离鉴定和培养，生化特性，以及微生物实验室常用的实验操作三、实习效果与收获通过这次实习，使我意识到了自身存在的一些不足，比如动手能力太差，对书本上的知识理解不够深入，最重要

2、的是通过这次实习，我收获了很多。这次实习，我主要做的是对一个细菌的简单的鉴定。沙门氏菌属(Salmonella)是肠杆菌科的一个大属，有2000多个血清型，我国发现的约有100个。沙门氏菌广泛存在于猪、牛、羊、家禽、鸟类、鼠类等多种动物的肠道和内脏中。1880年Eberth首先发现伤寒杆菌，1885年Salmon分离到猪霍乱杆菌，由于Salmon发现本属细菌的时间较早，在研究中的贡献较大，遂定名为沙门氏菌属Salmonella。本属细菌绝大多数成员对人和动物有致病性，能引起人和动物的败血症与胃肠炎，甚至流产，并能引起人类食物中毒，是人类细菌性食物中毒的最主要病原菌之一。1实验材料1.1菌

3、种：待检的病鸭体内分离的沙门氏菌1.2培养基：半固体培养基、普通平板、麦康凯平板、三糖铁高层斜面、蛋白胨水、葡萄糖蛋白胨水1.3生化管：葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖、甘露醇、枸橼酸盐、硫化氢、尿素1.4生化试剂：吲哚试剂、M-R试剂、V-P试剂2实验内容2.1配培养基营养琼脂培养基：称取33.0g营养琼脂于1000mL蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解，调节PH7.3±0.1，121℃高压灭菌15min，冷却后制成平板。麦康凯琼脂培养基：称取55.0g麦康凯琼脂于1000mL蒸馏水中加热煮沸至完全溶解，调节PH7.2±0.2，121℃高压灭菌20min，冷却后无菌条件下制成平板。三糖铁琼脂：称取

4、三糖铁琼脂63.4g于1L蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解，121℃高压蒸汽灭菌15min，冷却后制成高层斜面。枸橼酸盐培养基（购自北京陆桥技术有限责任公司）；葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖微量生化管（购自杭州天和微生物试剂有限公司）；胰蛋白胨水、葡萄糖蛋白胨水麦康凯培养基，呈红褐色，用于肠道菌的分离与鉴定；能分解乳糖的细菌--菌落红色；不能分解乳糖的细菌—菌落灰白色。三糖铁琼脂，制成三糖铁高层斜面，呈红褐色，用于测定细菌对葡萄糖、乳糖、蔗糖的发酵作用及能否产生硫化氢；能发酵乳糖、蔗糖，培养基呈黄色；发酵葡萄糖不发酵乳糖、蔗糖，底层呈黄色、斜面部分为红色(少量酸接触空气而氧化细菌生长利用

5、含氮物质,生成碱性化合物)；能产生硫化氢，培养基呈黑色；能产气的细菌，底层琼脂内有气泡。葡萄糖蛋白胨水，黄色液体培养基，用于增菌培养，做MR,VP试验。蛋白胨水，无色液体培养基，用于增菌培养，做吲哚试验。2.2细菌的分离培养无菌条件下将待检菌，取单菌落分别接种于普通培养基，麦康凯，恒温培养24-48小时后观察菌落的生长情况观察每种平板上细菌的生长情况，比较单个菌落的形态：染色镜检。2.3观察结果观察麦康凯、普通平板上细菌生长情况。该分离菌在普通琼脂平板上可形成灰白、圆形、光滑、湿润、微隆起、边缘光滑、直径1~2mm的菌落;在麦康凯培养基上长成半透明、圆形、湿润、直径约0.5~1mm的菌落

6、。该分离菌为革兰氏阴性小杆菌。分离培养实验操作过程中由于实验不小心出现了写差错，麦康凯平板上长有两种菌落，粉红色与灰白色中间带一黑点的菌落。粉红色的是大肠杆菌，能分解乳糖，第一次划线处有菌苔生成，第二次划线处有较多单个菌落出现，直径约2mm，为扁形光滑突起粉红色菌落，第三次划线处基本没有菌落出现；白色中间带一黑点的菌落为沙门氏菌，不能分解乳糖，第一次划线处看不到，第二次划线处有沙门氏菌菌落，但是仅观察到3个菌落，为扁形光滑突起灰白色菌落，直径约1.5mm，第三次划线处基本无细菌。分析此培养基结果，成功分离得到沙门氏菌的菌落，达到实验目的，但是划线技术不够成熟，划线后细菌在培养基上生长的线

7、条不优美，非常凌乱。普通平板上也成功分离得到沙门氏菌的菌落，达到实验目的，但是依旧划线技术不够成熟，划线结果不甚理想。挑取麦康凯培养基上的沙门氏菌的菌落，做镜检，革兰氏染色，结果显示大部分为紫色，少部分为红色，染色结果不甚理想，但是可以观察到是杆菌。革兰染色脱色时间不够，没有染好，技术不够成熟。2.4做生化试验2.4.1五糖发酵试验在无菌条件下，用接种针将分离纯化的疑似大肠杆菌单菌落接种于五糖微量反应管，并封口标号，置于37℃恒温培