复制（12） ppt课件

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1、第5章DNA复制(Chapter4DNAReplication)1单林娜制作Chapter4DNAReplication（DNA复制）5.1DNAReplication:AnOverview5.2EnzymologyofDNAReplication5.3BacterialDNAreplication5.4EukaryoticDNAreplication5.5Regulation0fDNAreplicationMolecularBiologyCourse2单林娜制作第一节DNA复制概述(DNAReplication:AnOvervie

2、w)一、基本概念二、DNA的半保留复制三、复制起点、方式和方向四、DNA复制的半不连续性3单林娜制作一、基本概念DNA复制亲代双链DNA分子在DNA聚合酶的作用下，分别以各单链DNA分子为模板，聚合与自身碱基可以互补配对的游离的dNTP，合成出两条与亲代DNA分子完全相同的子代DNA分子的过程。4单林娜制作复制子(Replicon，复制单位或复制元)DNA中含有一定复制起点和复制终点的复制单位。AunitofthegenomeinwhichDNAcontainaregionfromorigintoterminator复制子的长度大小

3、不均，1.3万—90万bp不等。5单林娜制作在真核生物中，染色体为DNA分子的载体，每条染色体含一个DNA分子。每个DNA分子上含多个复制子。一条染色体上的多数复制子在细胞周期的S期中，在ATP存在下只复制一次。6单林娜制作mammaliancell500-5000bp/minE.coli，37℃,0.5h,105bp/minDNA复制在细胞周期的S期7单林娜制作二、DNA的半保留复制（Semi-ConservationReplication）概念：复制过程中各以双螺旋DNA的其中一条链为模板合成其互补链，新生的互补链与母链构成子

4、代DNA分子。8单林娜制作理论上DNA的复制也可采用其它方式，如另一种叫全保留复制(conservativereplication)的复制方式也是可能的，在这个模型中两条DNA亲代链保留在一起作为子链合成的模板(图6-1)。9单林娜制作DNA复制的两种模型那么，那一种复制方式更为真实呢？10单林娜制作Semi-conservativemechanismwasdemonstratedexperimentallyin1958byMeselsonandStahl--------Proof11958Meselson-stahl设计的CsCl

5、超离心试验证实了DNA复制的这一特性。11单林娜制作CsCl(Cesiumchloride)densitygradientultracentrifugation（CsCl密度梯度超离心）LabeledE.ColiDNAwith15N14NDNAreplication12单林娜制作提取DNA，CsCl密度梯度离心细菌在有15N-标记的培养基上生长多代，使DNA双链充分标记转入14N后立即取出繁殖一代后取出繁殖二代后取出13单林娜制作DNAreplicationE.ColiDNA在15N-标记的营养液中生长多代，使DNA双链充分标记万有

6、引力将15N-标记的E.Coli加入14N培养液中细胞在14N中复制1次细胞在14N中复制第2次细胞在14N中复制第3次14单林娜制作DNAreplicationFigure:TheexpectedresultsoftwogenerationsofsemiconservativereplicationintheMeselson–Stahlexperiment.15单林娜制作15N标记实验·细胞生长在15N标记培养基中·转入正常N源培养基中·分离各代DNA·分析各代DNA的浮力密度15N标记DNA未标记DNACsCL密度梯度离心浮力密

7、度N15－DNA1.742g/mlN15－N14－DNA1.717g/mlN14－DNA1.710g/ml16单林娜制作17单林娜制作三、复制起点、方向和方式1、复制起点（origin，ori或O，复制原点）复制开始处DNA分子的特定位置原核生物（Prokaryote）：单复制起点，即——整个染色体只有一个复制单位18单林娜制作AllprokaryoticchromosomesandmanybacteriophageandviralDNAmoleculesarecirclesandcomprisesinglereplications

8、.（单复制子）19单林娜制作真核生物（Eukaryote）:多复制起点，即－－一个genome中有多个复制单位20单林娜制作ATrich富含AT&发夹结构“呼吸作用”十分明显，许多酶的结合位点真核生物的复制原点约300bp±复制起点序